黃敏　張紅梅　張靜　段微

Graves病患者Th1/Th2細胞因子的變化及臨床意義

黃敏張紅梅張靜段微

【摘要】目的測定Graves病患者干擾素γ( IFN-γ)、白細胞介素-2( IL-2)、IL-4和IL-10的水平，探討Th1/Th2細胞平衡在Graves病發(fā)病中的作用。方法對照組、Graves病組各80例，共160例。采用化學發(fā)光免疫法測定甲狀腺功能。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。結(jié)果Graves病組血清IL-4和IL-10水平分別為( 22．64±10．25) ng/ml和( 26．51±11．08) ng/ml，顯著高于對照組( P＜0．05) ; Graves病組血清IFN-γ水平為( 83．44±11．17) ng/ml，顯著低于對照組( P＜0．05) ;但Graves病組IL-2水平為( 79．38±10．54) ng/ml，與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義( P＞0．05)。Graves病組患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10分別為( 3．74± 0．13)、( 3．19±0．10)、( 3．44±0．15)、( 2．82±0．09)，比值均顯著低于對照組( P＜0．05)。結(jié)論Graves病患者Th1/Th2免疫平衡以Th2細胞的體液免疫占優(yōu)勢為主，IL-4/IL-10可作為Graves病患者治療中新型的藥物靶點。

【關(guān)鍵詞】Graves病; Th1/Th2;細胞因子

項目來源:湖北省衛(wèi)生廳科研基金一般性項目(編號: JX6B88)

作者單位: 430015武漢市，湖北省新華醫(yī)院內(nèi)分泌科

Graves病即毒性彌漫性甲狀腺腫，是一種器官特異性自身免疫紊亂性疾病，典型的臨床表現(xiàn)主要包括高代謝癥群、甲狀腺腫大和眼病三個方面［1］，盡管其病因和病機尚未完全闡明，目前認為與遺傳因素、環(huán)境因素及自身免疫因素有關(guān)［2］。有研究表明，Th1/Th2失衡在Graves病發(fā)病機制中起著重要作用［3］，但是Graves病中有關(guān)Th1和Th2的研究結(jié)果報道并不一致，即細胞因子在系統(tǒng)循環(huán)中的作用以及他們在Graves病發(fā)病機制中的作用尚存在異議。本文主要分析Graves病患者Th1型細胞因子( IFN-γ、IL-2)和Th2型細胞因子( IL-4、IL-10)的水平，探討Th1/Th2細胞平衡在Graves病發(fā)病中的作用，為Graves病臨床診治提供參考借鑒。

1　資料與方法

1．1一般資料選擇2011年3月至2013年6月我院內(nèi)分泌科就診患者，按Graves病診斷標準進行篩選［1］，并除外常見炎癥及免疫性疾病后共納入Graves病患者(均為初發(fā)未治) 80例為GD組，男34例，女46 例;平均年齡( 36±10)歲;選擇同期體檢健康者80例為對照組，男38例，女42例;平均年齡( 35±12)歲。2組性別比、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義( P＞0．05)。

1．2方法清晨空腹取血5 ml，其中3 ml檢測甲狀腺功能，包括游離三碘甲狀腺原氨酸( FT3)、游離甲狀腺素( FT4)、促甲狀腺激素( TSH)、甲狀腺球蛋白抗體( TGAb)和甲狀腺過氧化物酶抗體( TPOAb)，檢測采用德國西門子ADVIA Centaur XP全自動化學發(fā)光免疫分析儀，試劑為西門子公司提供。2 ml離心后血清置于－80℃保存，采用酶聯(lián)免疫吸附測定( ELISA)法成批檢測血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司公司，按照產(chǎn)品說明書進行操作。

1．3統(tǒng)計學分析應(yīng)用SPSS 11．0統(tǒng)計軟件，計量資料以珋x±s表示，采用t檢驗，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2．12組甲狀腺功能水平比較GD組FT3、FT4水平較對照組顯著升高( P＜0．01)，TSH水平較對照組顯著降低( P＜0．01) ;且GD組患者TGAb和TPOAb水平較對照組顯著升高( P＜0．05)。見表1。

表1　2組甲狀腺功能水平比較　n =80，珋x±s

2．22組細胞因子水平比較GD組血清IL-4和IL-10水平顯著高于對照組( P＜0．05)，IFN-γ水平顯著低于對照組( P＜0．05)，但IL-2水平差異無統(tǒng)計學意義( P＞0．05)。見表2。

表2　2組細胞因子水平比較　n =80，ng/ml，珋x±s

2．32組Th1/Th2比較GD組患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10顯著低于對照組( P＜0．05)。見表3。

表3　2組Th1/Th2的比較　n =80，珋x±s

3　討論

Graves病是甲亢最常見的類型，其病因和發(fā)病機制尚未完全闡明，目前認為是在遺傳易感的基礎(chǔ)上，由于感染、精神創(chuàng)傷等應(yīng)激因素而誘發(fā)的一種自身免疫性甲狀腺疾病。

多個研究表明T細胞激活和異常細胞因子生成與Graves病相關(guān)［4，5］。細胞因子在體內(nèi)通過旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用，形成了十分復(fù)雜的細胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，參與人體多種重要的生理功能包括調(diào)控免疫應(yīng)答。輔助性T細胞( helper T cell)簡稱Th細胞，能分泌多種細胞因子。Th細胞主要分為Th1細胞與Th2細胞兩種。其中，Th1細胞主要分泌IL-2、IFN-γ、IFN-α、TNF等，輔助抗體生成，可激發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，介導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答。Th2細胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等，主要刺激B細胞增殖并產(chǎn)生免疫球蛋白G( IgG)和免疫球蛋白E( IgE)抗體，介導(dǎo)體液免疫。Th1/Th2代表機體復(fù)雜的細胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，可以從整體上評估機體免疫功能［6］。

迄今Th1/Th2細胞平衡在Graves病中的作用仍然存在異議。多數(shù)研究報道，在Graves病中Th1/Th2細胞平衡失衡偏向以Th2占優(yōu)勢的免疫應(yīng)答［7］。然而也有不同觀點，Okumura等［8］發(fā)現(xiàn)Graves病患者甲狀腺內(nèi)淋巴細胞既有Th1型細胞因子也有Th2型細胞因子的分泌，未見明顯的Th1/Th2細胞因子平衡的偏移。

且在Graves病中研究Th1/Th2細胞平衡失衡時，多選擇檢測血清TNF-α、IFN-γ、IL-2及IL-6、IL-4的含量的變化。而2013年Esfahanian等［9］報道在Graves病眼病中Th1/Th2細胞平衡失衡偏向以Th2占優(yōu)勢的免疫應(yīng)答，且IL-10與Graves病的中度和重度眼病相關(guān)。

IL-10于1989年首次報道，當時認為其僅由Th2細胞亞群分泌并能專一抑制Th1亞群特異細胞因子，如IFN-γ的分泌是一種細胞因子合成抑制因子，多年來有關(guān)IL-10的負向調(diào)節(jié)作用及其應(yīng)用研究不斷取得進展。近年IL-10免疫刺激的作用及免疫生物學意義的研究也正逐漸深入，其雙向免疫調(diào)節(jié)活性受到愈來愈多的關(guān)注，并由此猜測IL-10可能是一種多能細胞因子［10］。

本研究結(jié)果顯示，Graves病患者血清IL-4和IL-10水平顯著高于正常對照組，IFN-γ水平顯著低于正常對照組，雖然IL-2水平水平無顯著性差異，但Graves病患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10均顯著低于正常對照組，表明Graves病患者甲狀腺內(nèi)Th2體液免疫應(yīng)答強度增加，相應(yīng)的細胞因子分泌增多，導(dǎo)致Th1/Th2細胞平衡向Th2偏離。

分析其原因可能是: Th2細胞占優(yōu)勢時體液免疫加強，可誘導(dǎo)B淋巴細胞大量分泌自身抗體-TGAb和TPOAb，使細胞分泌大量甲狀腺激素，引起甲狀腺濾泡上皮細胞增生肥大、甲狀腺內(nèi)淋巴細胞浸潤并出現(xiàn)功能亢進，導(dǎo)致Graves病［11，12］。

鑒于此次研究結(jié)果，后期我們將對IL-4和IL-10 在Graves病中的活化機制以及對TGAb和TPOAb調(diào)控的具體過程進行進一步研究，從分子水平對Graves病的發(fā)生發(fā)展做出根源性解釋，以指導(dǎo)臨床藥物的開發(fā)與應(yīng)用，從而尋找出IL-4/IL-10特異性的阻斷劑，以便有效治療Graves病。

參考文獻

1Menconi F，Marcocci C，Marinò M．Diagnosis and classification of Graves’disease．Autoimmun Rev，2014，13: 398-402．

2Tomer Y．Mechanisms of autoimmune thyroid diseases: from genetics to epigenetics．Annu Rev Pathol，2014，9: 147-156．

3Kocjan T，Wraber B，Repnik U，et al．Changes in Th1/Th2 cytokine balance in Graves’disease．Pflugers Arch，2000，440( 5 Suppl) : R94-95．

4Al-Humaidi MA．Serum cytokines levels in Graves’disease．Saudi Med J，2000，21: 639-644．

5Hidaka Y，Amino N．Organ-specific autoimmune diseases and cytokines．Rinsho Byori，1999，47: 335-339．

6Striz I，Brabcova E，Kolesar L，et al．Cytokine networking of innate immunity cells: a potential target of therapy．Clin Sci( Lond)，2014，126: 593-612．

7Phenekos C，Vryonidou A，Gritzapis AD，et al．Th1 and Th2 serum cytokine profiles characterize patients with Hashimotops thyroiditis( Th1) and Graves disease( Th2)．Neuroimmunomodulation，2004，11: 209-213．

8Okumura M，Hidaka Y，Matsuzuka F，et al．CD30 expression and interleukin-4 and interferon-gamma production of intrathyroidal lymphocytes in Graves disease．Thyroid，1999，9: 333-339．

9Esfahanian F，Naimi E，Doroodgar F，et al．Th1/Th2 cytokines in patients with Graves’disease with or without ophthalmopathy．Iran J Allergy Asthma Immunol，2013，12: 168-175．

10Wilke CM，Wei S，Wang L，et al．Dual biological effects of the cytokines interleukin-10 and interferon-gamma．Cancer Immunol Immunother，2011，60: 1529-1541．

11Guo J，Rapoport B，McLachlan SM．Balance of Th1/Th2 cytokines in thyroid autoantibody synthesis in vitro．Autoimmunity，1999，30: 1-9．

12Li H，Wang T．The autoimmunity in Graves’s disease．Front Biosci ( Landmark Ed)，2013，18: 782-787．

·論著·

收稿日期:( 2014－05－10)

doi:10．3969/j．issn．1002－7386．2015．04．012

【中圖分類號】R 581．1

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002－7386( 2015) 04－0517－02