藥理學(xué)

RISK信號通路在β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑clenbuterol減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷中的作用

張秋芳，譚艷，汪選斌，等

目的：研究β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑clenbuterol對原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的作用及其是否與激活再灌注損傷挽救激酶（reperfusion injury salvage kinase，RISK）信號通路有關(guān)?方法：將原代培養(yǎng)的新生Wistar大鼠乳鼠心肌細(xì)胞分為8組，①正常培養(yǎng)組；②缺氧/復(fù)氧（A/R）組；③clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R；④ICI118，551（10 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R組；⑤美托洛爾metoprolol（10 μmol·L-1）+clenbuterol （1 μmol·L-1）+A/R組；⑥ metoprolol（10 μmol·L-1）+A/R組；⑦PD98059（20 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R組；⑧ LY294002（10 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R組?采用MTT法測定各組細(xì)胞存活率；比色法檢測心肌細(xì)胞培養(yǎng)液的乳酸脫氫酶（LDH）含量；Hoechst 33342熒光染色法檢測細(xì)胞凋亡率；分子探針DCFH-DA檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平；Western blot檢測心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧后ERK及p-ERK1/2蛋白的表達(dá)水平?結(jié)果：與A/R組比較，clenbuterol+A/R組明顯增高細(xì)胞存活率，降低LDH含量，降低細(xì)胞凋亡率，ROS產(chǎn)生減少，p-ERK1/2蛋白表達(dá)水平增高，而選擇性β2受體阻斷劑ICI118， 551可取消clenbuterol的上述作用，β1受體阻斷劑Metoprolol對clenbuterol的作用無影響，PI3K抑制劑LY294002和ERK1/2抑制劑PD98059可阻斷clenbuterol對心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用?結(jié)論：clenbuterol能夠減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷，加入選擇性β2受體阻斷劑ICI118，551，PI3K抑制劑LY294002和ERK抑制劑PD98059均使clenbuterol的保護(hù)作用取消，表明clenbuterol可通過激動(dòng)β2腎上腺素受體，激活RISK信號通路發(fā)揮抗心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的作用?

clenbuterol；缺氧/復(fù)氧；心肌細(xì)胞；磷酸化ERK；PI3K；reperfusion injury salvage kinase（RISK）

來源出版物：中國藥理學(xué)通報(bào), 2015, 31(10): 1368-1374聯(lián)系郵箱：張秋芳，zqf1112000@163.com