番華彩， 白亭亭， 楊佩文， 郭志祥， 曾 莉

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所，云南昆明 650205)

?

云南省部分地區(qū)稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性研究

番華彩， 白亭亭， 楊佩文， 郭志祥， 曾 莉*

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所，云南昆明 650205)

[目的]了解云南省部分稻區(qū)稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性，為三環(huán)唑的科學(xué)使用及抗藥性監(jiān)測提供理論依據(jù)。[方法]采用菌絲生長速率法測定了云南省部分稻區(qū)的稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性。[結(jié)果]供試稻瘟病菌對三環(huán)唑的抑制中濃度(EC50值)在41.284 9～72.722 4 mg/L，不同地區(qū)菌株敏感性存在差異，其中最敏感的是大理地區(qū)菌株，其EC50平均值為49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地區(qū)菌株，其EC50平均值為65.000 4 mg/L，二者相差1.33倍。[結(jié)論]大多數(shù)菌株對三環(huán)唑表現(xiàn)敏感，但也出現(xiàn)低水平抗藥性的群體，采用三環(huán)唑防治稻瘟病具有一定的風(fēng)險(xiǎn)性。

稻瘟病菌；三環(huán)唑；敏感性

稻瘟病(M.grisea)是我國水稻的三大主要病害之一。20世紀(jì)90年代以來，我國稻瘟病的年發(fā)生面積均在380萬hm2以上，年損失稻谷達(dá)數(shù)億千克[1-2]。在云南省，稻瘟病主要發(fā)生在優(yōu)質(zhì)稻區(qū)和高海拔水稻種植區(qū)以及山區(qū)，常年發(fā)生面積23萬hm2左右，約占水稻種植面積的24%。每年因稻瘟病發(fā)生而造成的水稻產(chǎn)量損失在10萬t以上。近年來，稻瘟病在云南各水稻產(chǎn)區(qū)均呈現(xiàn)出中等偏重發(fā)生趨勢，嚴(yán)重制約了水稻產(chǎn)量的增加和品質(zhì)的提高[3-4]。稻瘟病的防治措施主要包括抗病育種、藥劑防治和栽培管理。其中抗病品種多是基于“基因?qū)颉睂W(xué)說的垂直抗性品種, 抗病性易喪失。化學(xué)防治具有經(jīng)濟(jì)、高效、方便、迅速等優(yōu)點(diǎn)，一直是稻瘟病綜合治理體系中不可缺少的部分，在病害大流行或品種抗病性喪失期間更是最主要的、不可替代的防治手段[5]。

目前，用于防治稻瘟病的化學(xué)藥劑主要有三環(huán)唑、富士一號(hào)、稻瘟凈、異稻瘟凈、克瘟散、嘧菌酯、苯氧菌酯和烯丙異噻唑等。三環(huán)唑是一類黑色素合成抑制劑，屬間接作用化合物。該藥劑由于對病原菌沒有直接的殺菌或抑菌作用，其獨(dú)特的作用機(jī)制使得化合物具有高效、低毒和低抗藥性風(fēng)險(xiǎn)的特點(diǎn)，是未來殺菌劑發(fā)展的重要方向之一。在我國，三環(huán)唑是目前防治稻瘟病的主要藥劑，其內(nèi)吸性強(qiáng)，能迅速被水稻各部位吸收，持效期長，藥效穩(wěn)定，用量低并且抗雨水沖刷[5-7]，可用于浸根或葉面噴霧處理。筆者用毒力測定方法測定了云南省部分地區(qū)稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性，旨在為三環(huán)唑的科學(xué)使用及抗藥性監(jiān)測提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試菌株。供試稻瘟病菌菌株分別采自云南省宜良縣、紅河州、保山市、大理市和江川縣(表1)。

1.1.2供試藥劑。75%三環(huán)唑可濕性粉劑由四川省化學(xué)工業(yè)研究設(shè)計(jì)院生產(chǎn)。

表1 試驗(yàn)菌株編號(hào)和采集地點(diǎn)

1.2 方法

1.2.1含藥培養(yǎng)基的制備。在無菌條件下，將三環(huán)唑配制成一定濃度的稀釋液，按一定比例加入到滅菌培養(yǎng)基中，配制成藥劑濃度分別為60、70、80、90、100、110、120 mg/L的含藥培養(yǎng)基，將含藥培養(yǎng)基混合均勻后倒入直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，制成不同濃度的含藥平板，備用。

1.2.2敏感性測定。采用生長速率法。在PDA平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)各菌株7 d后，用滅菌的打孔器從各菌株菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌絲塊，用接菌針取菌苔，菌面向下，分別接種到含不同濃度三環(huán)唑的PDA培養(yǎng)基平板上, 每處理3次重復(fù)，以加入無菌水的培養(yǎng)基平板為對照。28 ℃下恒溫培養(yǎng)，7 d后用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，計(jì)算藥劑對菌絲生長的抑制百分率。通過各處理濃度的對數(shù)(X) 和菌絲生長抑制率的幾率值(Y) 進(jìn)行回歸分析，計(jì)算出三環(huán)唑?qū)Ω鲄⒃嚲甑囊种浦袧舛菶C50。

菌絲生長抑制率=[1-(藥劑處理菌落直徑-5 mm)/(對照處理菌落直徑-5 mm)]×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 三環(huán)唑?qū)Φ疚敛【玖y定結(jié)果由表2可知，三環(huán)唑?qū)Φ疚辆z生長有一定的抑制作用，隨藥劑濃度升高，菌絲生長抑制率依次增加。當(dāng)藥劑濃度為60 mg/L時(shí)，云南保山菌株的平均菌絲抑制率達(dá)45.51%；云南昆明宜良菌株的平均菌絲抑制率達(dá)43.24%；云南玉溪江川菌株的平均菌絲抑制率達(dá)51.60%；云南大理菌株的平均菌絲抑制率達(dá)54.07%；云南紅河菌株的平均菌絲抑制率達(dá)50.95%；供試菌株的平均菌絲抑制率達(dá)49.36%。當(dāng)藥劑濃度為120 mg/L時(shí)，云南保山菌株的平均菌絲抑制率達(dá)84.81%；云南昆明宜良菌株的平均菌絲抑制率達(dá)77.89%；云南玉溪江川菌株的平均菌絲抑制率達(dá)78.84%；云南大理菌株的平均菌絲抑制率達(dá)79.48%；云南紅河菌株的平均菌絲抑制率達(dá)79.97%；供試菌株的平均菌絲抑制率達(dá)80.20%。

表2 不同濃度三環(huán)唑?qū)Φ疚敛【z抑制率 %

2.2 不同地區(qū)稻瘟病菌對三環(huán)唑敏感性檢測結(jié)果由表3可知，不同菌株對三環(huán)唑敏感性不同。最敏感菌株是08HH-3菌株，最不敏感的菌株是08BS-5菌株，其EC50分別為37.920 3、68.895 5 mg/L，相差1.33 倍。供試菌株中，采自保山的平均EC50值為63.248 1 mg/L，宜良的平均EC50值為65.000 4 mg/L，江川的平均EC50值為54.732 0 mg/L，大理的平均EC50值為49.004 3 mg/L，紅河的平均EC50值為53.808 1 mg/L。

表3 云南省不同地區(qū)稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性

3 結(jié)論與討論

該研究結(jié)果表明，來自云南不同地區(qū)的稻瘟病菌菌株對三環(huán)唑的敏感性存在一定差異。最敏感的是大理地區(qū)菌株，其EC50值為49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地區(qū)菌株，其EC50值為65.000 4 mg/L，相差1.33倍，相差倍數(shù)不大。其原因可能是由菌株個(gè)體差異引起的或者由于抗藥性問題所致，還需進(jìn)一步研究。

黃星等[8-10]研究報(bào)道，廣西、廣東、安徽、江蘇和遼寧等稻區(qū)的稻瘟病菌對三環(huán)唑仍屬于低抗藥性風(fēng)險(xiǎn)，關(guān)于云南稻瘟病菌是否對三環(huán)唑產(chǎn)生了抗藥性，需進(jìn)一步研究。三環(huán)唑與其他防治稻瘟病藥劑的作用機(jī)理不同，稻瘟凈和異稻瘟凈屬于單作用位點(diǎn)殺菌劑，易產(chǎn)生抗藥性，而三環(huán)唑則屬于雙位點(diǎn)作用殺菌劑，主要作用于合成黑色素生物途徑中的三羥基奈酚還原酶和四羥基奈酚還原酶，不易產(chǎn)生抗藥性，屬于低抗性風(fēng)險(xiǎn)類農(nóng)藥[11]。該藥劑除了具有抗侵入的作用機(jī)制外，還具有誘導(dǎo)抗病反應(yīng)、抑制孢子黏液分泌等多種作用。

[1] 陳利鋒,徐敬友.農(nóng)業(yè)植物病理學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005.

[2] 周光召.面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展[M].北京:中國科技出版社,1999.

[3] 呂建平.稻瘟病防治技術(shù)[J].農(nóng)村實(shí)用技術(shù), 2006(6): 25.

[4] 呂建平. 2005年云南省病蟲害發(fā)生趨勢預(yù)報(bào)[J].山東農(nóng)藥信息,2005(7): 31.

[5] 張傳清,周明國,朱國念.稻瘟病化學(xué)防治藥劑的歷史沿革與研究現(xiàn)狀[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào),2009,11(1): 72-80.

[6] 陳明麗,紀(jì)明山,劉志恒,等.遼寧省稻瘟病菌對烯肟菌酯的敏感性檢測[J]. 農(nóng)藥,2008,47(2): 142-144.

[7] 馬秀云.三環(huán)唑防治稻瘟病小竅門[J].南方農(nóng)業(yè),2008,2(2): 49.

[8] 黃星,張傳清,陳長軍,等. 稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性檢測與抗藥風(fēng)險(xiǎn)分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2005,21(4): 298-300.

[9] 張楊,侯東艷,祁之秋,等. 稻瘟病菌對三環(huán)唑抗藥性風(fēng)險(xiǎn)研究[J].沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,40(1):99-102.

[10] 張傳清,周明國,薛娜.稻瘟病菌對三環(huán)唑的敏感性檢測技術(shù)與抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評估[J].中國水稻科學(xué),2005,19(1):79-84.

[11] 楊榮明,周明國,葉鐘音.三環(huán)唑防治稻瘟病的作用機(jī)制[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1998,21(2): 34-37.

Sensitivity Detection ofMagnaporthegriseafrom Parts of Yunnan Province to Tricyclazole

FAN Hua-cai, BAI Ting-ting, YANG Pei-wen, ZENG Li*et al

(Institute of Agriculture Environment and Resource, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming, Yunnan 650205)

[Objective] The sensitivity ofM.griseafrom parts of Yunnan Province to Tricyclazole was understood to provide theoretical basis for use and resistance monitoring of Tricyclazole. [Method] The sensitivity of rice blast fungi isolates to Tricyclazole in parts of Yunnan Province was measured by mycelium growth rate method. [Result] TheEC50of strains was dispersive from 41.284 9 mg/L to 72.722 4 mg/L. The sensitivity of different strains to Tricyclazole had difference. The most sensitive strains was Dali strains, and the average ofEC50was 49.004 3 mg/L. The least sensitive strains were Yiliang strains, and the average ofEC50was 65.000 4 mg/L. The sensitivity difference between them was 1.33 times. [Conclusion] Most of the strains were still higher sensitivity. Some low-level resistance sub-groups were appeared. Using Tricyclazole to control rice blast had some risks.

M.grisea; Tricyclezole; Sensitivity

國家香蕉產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)(CARS-32)；云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所所長青年基金項(xiàng)目(hz2012001)；云南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2011FB119)。

番華彩(1980- )，女，云南德宏人，助理研究員，碩士，從事植物病理學(xué)、香蕉病害等研究。*通訊作者，研究員，碩士，從事植物病理學(xué)、香蕉病蟲害及綜合防控技術(shù)等研究。

2014-11-26

S 435.111.4+1

A

0517-6611(2015)02-142-02