易中華
(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,江西南昌330045)
豬場中霉菌毒素的危害及防控
易中華
(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,江西南昌330045)
霉菌毒素是真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物,常見的霉菌包括,曲霉菌、鐮刀菌和青霉菌,它們可在農(nóng)作物生長和收獲期間及加工后的作物上生長。豬飼料中最常見的霉菌毒素有黃曲霉毒素、嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、煙曲霉毒素和赭曲霉毒素等,偶爾還伴有其他霉菌毒素的污染。霉菌毒素不但對豬產(chǎn)生毒害作用,而且可通過食物鏈危及人類健康。飼料和豬肉中的霉菌毒素有致癌的潛在危險,還有一些微妙的未知毒性作用,這與全球關(guān)注的健康危機緊密相關(guān)。
霉菌毒素對豬產(chǎn)生的毒害作用因在飼料中的含毒量、喂飼的時間、其他霉菌毒素存在與否、動物本身的物種、年齡及健康狀況而有所不同。臨床反應(yīng)的變化可自急性中毒癥狀至慢性癥狀。如黃曲霉毒素的毒害作用通過其免疫抑制作用增加豬對疾病的易感性,同時造成出血和消化性障礙;嘔吐毒素造成豬厭食;玉米赤霉烯酮影響繁殖性能;赭曲霉毒素導(dǎo)致腎受損。
1.1 黃曲霉毒素
黃曲霉毒素主要是黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的。其他曲菌、青霉菌、鐮孢霉菌和鏈霉菌屬的放線菌也能產(chǎn)生黃曲霉毒素。黃曲霉毒素是免疫功能的抑制劑,中毒的第一個癥狀為采食量降低,通常約于開始飼喂后3~4天發(fā)生。依污染的嚴(yán)重程度,黃曲霉毒素造成的損失包括,飼料效率下降、生長延遲、屠體品質(zhì)不佳和死亡。 在20~200微克/千克的低質(zhì)量濃度時,黃曲霉毒素減少飼料攝入量、降低飼料利用率和免疫抑制。泌乳母豬的飼糧中若出現(xiàn)超過500微克/千克含量時,則會因乳汁中的黃曲霉毒素而造成仔豬生長遲緩和死亡。即使離乳后不再飼喂含黃曲霉毒素的飼糧,但是仔豬生長受阻,飼養(yǎng)效果下降的情況會一直持續(xù)至上市。而且低質(zhì)量濃度的黃曲霉毒素還會造成微血管脆弱而容易引起皮下出血及挫傷等。長期采食含有黃曲霉毒素的動物,其肝、免疫系統(tǒng)及造血功能都會受損。黃曲霉毒素通過干擾肝中脂肪向其他組織的輸送,使脂肪大量堆積在肝而產(chǎn)生斑點,同時還會干擾肝合成維生素和解毒的其他功能。
1.2 嘔吐毒素
嘔吐毒素學(xué)名脫氧雪腐鐮菌烯醇,由污染小麥的雪腐鐮刀菌和寄生在谷物的燕麥鐮刀菌產(chǎn)生。對生長肥育豬而言,用含有14毫克/千克嘔吐毒素的飼料飼喂豬,10~20分鐘內(nèi)即會出現(xiàn)嘔吐、不正常的焦慮和磨牙現(xiàn)象。持續(xù)低劑量飼喂會導(dǎo)致皮膚溫度下降、胃食管部增生和血漿中α-球蛋白含量降低。嘔吐毒素會強力抑制豬的采食量和生長速度,在嘔吐毒素含量為0~14毫克/千克的試驗中,Williams等發(fā)現(xiàn),飼糧中每增加1毫克/千克嘔吐毒素,生長肥育豬的采食量即減少6%,在含毒量超過10毫克/千克即完全拒食。
1.3 T-2毒素
T-2毒素是由念珠球菌屬產(chǎn)生的新月毒素中的一種,新月毒素已超過100種,飼糧中的含量超過0.4毫克/千克就會對動物產(chǎn)生中毒癥狀。T-2毒素屬于組織刺激因子和致炎物質(zhì),直接損傷皮膚和黏膜。表現(xiàn)為厭食、嘔吐、瘦弱、生長停滯、皮膚黏膜壞死、胃腸機能紊亂、繁殖和神經(jīng)機能障礙、血凝不良、肝功能下降、白細(xì)胞減少和免疫機能降低。T-2毒素通過影響DNA和RNA的合成及通過阻斷翻譯的啟動而影響蛋白質(zhì)合成,而且T-2毒素還會引起胸腺萎縮、腸道淋巴腺壞死并破壞皮膚黏膜的完整性。抑制白細(xì)胞和補體C3的生成,從而影響機體免疫機能。
1.4 玉米赤霉烯酮
玉米赤霉烯酮也稱為F-2毒素,是由禾谷鐮孢霉菌產(chǎn)生,具有雌激素作用的霉菌毒素,其臨床癥狀隨接觸劑量和豬年齡不同而異。在所有的圈養(yǎng)動物中,豬對玉米赤霉烯酮最為敏感,而受影響最大的部位主要是其生殖系統(tǒng)。較低質(zhì)量濃度會誘發(fā)女性化現(xiàn)象,較高質(zhì)量濃度會干擾排卵、受孕、植入及胚胎的發(fā)育。后備母豬最為敏感,0.5~1毫克/千克低含量即可造成假發(fā)情、陰道脫垂或脫肛。玉米赤霉烯酮會增加懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)及死產(chǎn)的概率,初生仔豬的存活率較差、出現(xiàn)八字腿及外陰部腫脹。Golhl指出,飼糧中10毫克/千克的F-2毒素會延長母豬自離乳至配種的間隔時間,降低窩仔數(shù)和增加畸形豬的數(shù)量。F-2毒素使年輕公豬性欲下降、睪丸變小和睪丸生精細(xì)胞上皮細(xì)胞變性,最后形成精子發(fā)育不良、不孕及生精細(xì)管周圍組織的炎癥反應(yīng)等。
1.5 煙曲霉毒素
近幾年來歐洲、非洲、亞洲和南美洲等地的玉米和動物飼料已遭煙曲霉霉菌毒素的污染,其中發(fā)生最多的是煙曲霉毒素B1(FB1)。對生長豬而言,1毫克/千克的FB1會降低豬生長速率8 %,而10毫克/千克的FB1則可降低11%。而對肥育豬,1毫克/千克FB1即可對屠體品質(zhì)造成有害的影響(脂肪厚度增加和瘦肉率降低),造成養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟上的損失。短期飼喂煙曲霉毒素會使豬產(chǎn)生肺水腫。肝、肺和胰是FB1的標(biāo)的器官,低劑量會造成慢性漸進式的肝疾病,而較高劑量則有急性肺水腫發(fā)生。Motelin等發(fā)現(xiàn),給斷奶仔豬飼喂超過23和175毫克/千克的FB1即分別會有肝受損和肺水腫的情形。低于12毫克/千克含毒量不會對肝組織病理造成任何不良的影響。在飼喂100毫克/千克的FB1第7天后再連續(xù)飼喂83天的190毫克/千克FB1后發(fā)現(xiàn),肝損害及食道末端黏膜受損。當(dāng)FB1以非致死劑量(上至100毫克/千克)連續(xù)17天飼喂泌乳豬后,在母豬乳汁中并未偵測到FB1含量,并且仔豬亦未出現(xiàn)中毒癥狀。
1.6 赭曲霉毒素
赭曲霉毒素是由赭曲霉及鮮綠青霉等所產(chǎn)生的一種霉菌腎毒素,它分為A和B2種類型。赭曲霉毒素A的毒性較大,在自然污染的飼料中常見。豬攝入1毫克/千克的赭曲霉毒素A可在5~6天致死。飼喂含1毫克/千克質(zhì)量濃度的赭曲霉毒素的日糧,3個月后可引起豬煩渴、尿頻、生長遲緩和飼料利用率降低。
黃曲霉毒素/(微克/千克)生長或肥育階段<100無臨床反應(yīng),殘留于肝中200~400生長延遲及飼料效率降低;可能造成免疫抑制 400~800肝顯微病變,免疫抑制;血清中肝酵素活性上升800~1200生長遲緩,采食量降低;被毛粗糙,黃疸,低蛋白血癥1200~2000黃疸,低凝血素血癥,抑郁,厭食,部分死亡現(xiàn)象>2000急性肝病和低凝血素癥,3~10天內(nèi)死亡??諔鸦蚝髠淠肛i500~750對分娩懷孕無影響,仔豬生長遲緩,嘔吐毒素/(毫克/千克)無臨床影響,對攝食量造成最低限度的影響5~10采食量減少25%~50%。完全拒食,神經(jīng)癥狀T-2毒素/(毫克/千克)無影響。飼料攝食量降低;對口腔或皮膚造成刺激;免疫抑制。完全拒食,嘔吐玉米赤霉烯酮/(毫克/千克)未發(fā)情后備母豬1~3具雌激素作用;陰唇陰道炎,脫垂發(fā)情母豬或后備豬3~10仍有黃體及發(fā)情期,假懷孕及懷孕母豬>30于配種后1~3周飼喂會造成早期胚胎死亡。煙曲霉毒素/(毫克/千克)所有母豬50~100急性肺水腫、肝??;淋巴胚細(xì)胞生殖受損;采食量降低。 赭曲霉毒素肥育階段200/(微克/千克)屠宰時有輕度腎病變,增質(zhì)量下降1000/(微克/千克)劇渴,生長遲緩,氮血癥,糖尿癥4000/(微克/千克)多尿,劇渴母豬或后備母豬3~9/(毫克/千克)第1個月飼喂時能正常懷孕。
目前防控霉菌及霉菌毒素危害最關(guān)鍵的便是做好飼料的防霉和脫毒兩個環(huán)節(jié)。
2.1 飼料防霉
飼料防霉關(guān)鍵在于要嚴(yán)格控制飼料和原料的水分含量、控制飼料加工過程中的水分和溫度、選育和培養(yǎng)抗霉菌的飼料作物品種、選擇適當(dāng)?shù)姆N植或收獲技術(shù)、注意飼料產(chǎn)品的包裝、貯存、運輸與飼料中添加防霉劑等。但需注意的一點是使用防霉劑無法去除飼料原料中已存有的霉菌毒素,添加防霉劑僅僅只是預(yù)防未來霉菌的生長。
預(yù)防飼料霉變的主要措施如下。
1)減少污染。在采購原料時要加強檢查和驗收,防止霉變原料進廠,保持飼料倉庫、加工運輸設(shè)備干凈和無污染,對生產(chǎn)線上有些容易長期殘留飼料的部位要定期檢查清理,對出現(xiàn)霉變和結(jié)塊的飼料要徹底清理干凈。
2)控制原料含水量,保持環(huán)境干燥。一般要求飼料原料的含水量不超過13%,對含水量超標(biāo)的飼料原料應(yīng)及時曬干。貯存飼料的倉庫要干燥,貯藏時下面要墊底,上方周圍要留空隙,使空氣流通。對貯存較久者要定期進行水分監(jiān)測,含水量超標(biāo)應(yīng)及時采取措施。
3)適當(dāng)添加防霉劑和抗氧化劑。防霉劑可通過破壞霉菌的細(xì)胞壁或細(xì)胞內(nèi)的酸抑制霉菌的繁殖生長和產(chǎn)毒,當(dāng)飼料中的含水量高于安全貯藏含水率上限標(biāo)準(zhǔn)時可考慮添加防霉劑。目前,防霉劑使用較多的是丙酸及其鹽類(丙酸鈣、丙酸鈉和丙酸鉀),丙酸的添加量為飼料的0.3%,丙酸鈣的添加量為飼料量的0.2%~0.5%。飼料中使用防霉劑主要是根據(jù)季節(jié)和水分含量來決定是否使用和用量,在秋冬季等干燥和涼爽季節(jié),飼料水分低于11%,一般不必使用防霉劑;而水分超過12%就應(yīng)使用防霉劑,飼料中水分較高及高溫高濕季節(jié)還應(yīng)提高防霉劑的用量。飼料的發(fā)霉過程也伴隨著飼料中營養(yǎng)成分的氧化過程,一般防霉劑都應(yīng)與抗氧化劑一起使用,組成一個完整的防霉抗氧化體系,才能有效地延長貯存期。如:魚粉添加750毫克/千克的山道喹(主要是用來作防氧化劑),對抗氧化和防霉有極好的作用。
4)飼料的合理儲存。裝運飼料防止雨淋日曬。儲存飼料倉庫應(yīng)通風(fēng)、陰涼、干燥且地勢高,底部要有支架隔離地面。要定期消毒、打掃和防鼠。堆放要規(guī)范,若環(huán)境溫度高于10℃時,堆碼高度不超過14層(袋)。料堆應(yīng)與窗和墻保持一定距離,并注意保存時間不宜過長。
2.2 飼料脫毒
飼料發(fā)生霉變,尤其是大量的飼料原料發(fā)生霉變,全部丟棄會損失慘重,但是如果霉變很嚴(yán)重則應(yīng)棄之,因其養(yǎng)分已嚴(yán)重流失,對于輕度霉變的飼料與原料,則可根據(jù)具體情況,采用不同的方法進行脫毒處理。脫毒方法一般有物理脫毒法、化學(xué)脫毒法、酶解法和吸附法。
2.2.1 物理脫毒法和化學(xué)脫毒法
物理脫毒法主要有水洗法、剔除法、脫胚去毒法、溶劑提取法、加熱去毒法和輻射法等;化學(xué)脫毒法主要是采用堿或氧化劑進行處理脫毒。上述的諸多脫毒方法,在實際應(yīng)用中及對于目前飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)來說均不適用,因其操作不但困難 (大批量的飼料及原料用此類方法是沒法進行的),而且經(jīng)化學(xué)脫毒處理后往往會降低飼料的營養(yǎng)品質(zhì)和適口性。
2.2.2 酶解法
主要是選用某些酶,利用其降解作用,使霉菌毒素破壞或降低其毒性。如內(nèi)脂酶可斷裂玉米赤霉烯酮的內(nèi)脂環(huán),而環(huán)氧化酶降解單端孢酶毒素12和13環(huán)氧組。與物理學(xué)和化學(xué)方法相比,酶的降解處理法對飼料營養(yǎng)成分的損失和影響較少。但在實際應(yīng)用中,尤其是在飼料工業(yè)出現(xiàn)了一些問題:一是酶不耐熱,在高溫易失活,而飼料成品的制作過程,尤其是壓制顆粒飼料均需經(jīng)過高溫。二是使用酶解脫毒法成本較高,普遍難以接受。三是在利用酶降解霉菌毒素的毒性時,某些霉菌毒素需要一套完整酶系才能徹底降解其毒性,如在進行降解玉米赤霉烯酮時,部分的酶只是將其轉(zhuǎn)化成了另外一種物質(zhì),而轉(zhuǎn)化的這種物質(zhì)仍具有毒性,需要一系列的酶才能將其完全降解成無毒物質(zhì),這一系列的酶目前仍處于研究階段。
2.2.3 吸附法
即在飼料中添加霉菌毒素吸附劑進行脫毒的一種方法。這種方法仍是比較可行的(目前國外已普遍使用),在飼料工業(yè)及養(yǎng)殖業(yè)來說是一種比較常用、簡便和有效的脫毒方法。在實際生產(chǎn)中應(yīng)選擇合適的吸附劑,要求既能有效地降低霉菌毒素對動物的危害,又不至于對動物生長造成負(fù)面影響。理想的吸附劑應(yīng)有吸附不同種類霉菌毒素的能力;使用量應(yīng)低且有效;能在飼料中迅速均勻地混合;加工制粒、膨化和儲存期間有較強的穩(wěn)定性;對維生素、微量元素、藥物及其他營養(yǎng)物質(zhì)無吸附作用;在寬pH范圍內(nèi)具有較高的穩(wěn)定性,排出后應(yīng)能被生物降解;本身應(yīng)不含污染物。
目前,飼料中脫毒效果較好的霉菌毒素吸附劑主要有鋁硅酸鹽類、有機物類(酵母細(xì)胞壁等)及其他樹脂類(消膽胺等)。天然鋁硅酸鹽,如:沸石、蒙脫石、硅藻土和高嶺土等,因為具有較大的表面積和離子吸附能力,對霉菌毒素有一定的選擇吸附能力而引起研究者的興趣。鋁硅酸鹽類吸附劑尤其對黃曲霉毒素有良好的吸附能力,并且有不少體內(nèi)(喂養(yǎng))試驗結(jié)果證實了這類吸附劑的實際效果,但它們對玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和單端孢菌素等毒素吸附能力不足。不過通過適當(dāng)?shù)母男杂锌赡苁顾哂懈鼜V泛的吸附能力。這類吸附劑的另一個缺點是,它們對維生素及礦物鹽有非選擇性吸附能力。有機物類,如:酵母細(xì)胞壁具有特殊結(jié)構(gòu),對霉菌毒素產(chǎn)生吸附力。試驗結(jié)果表明:酵母細(xì)胞壁可以吸附2.7毫克/克玉米赤霉烯酮,并且這種吸附平衡可以在10分鐘內(nèi)達到,在這一點它比鋁硅酸鹽類吸附劑有優(yōu)勢。葡甘露聚糖對霉菌毒素也有一定的吸附能力。Swamy等進行的豬體內(nèi)試驗結(jié)果表明:葡甘露聚糖對鐮刀菌產(chǎn)生的毒素有一定的脫毒作用。葡甘露聚糖的作用方式應(yīng)和酵母細(xì)胞壁的作用方式相似。酯化葡甘露聚糖(EGM)是一種新型的霉菌毒素吸附劑,是從酵母細(xì)胞中提取出的功能性糖類。EGM有很大的表面區(qū)域,1千克的EGM有相當(dāng)于2.2百米的平方的表面區(qū)域。其表面富含不同孔徑的孔穴,用以大面積地捕捉不同種類的霉菌毒素。因此,EGM對多種霉菌毒素具有較強的吸附作用,而且吸附后的霉菌毒素不易被解離;對飼料中其他營養(yǎng)成分無顯著負(fù)作用,還可能對動物的其他生理功能有著積極的作用,是一種廣譜的具有很大潛力的霉菌毒素吸附劑。
除上述常見的幾種吸附劑外,研究者和生產(chǎn)者也在不斷地探索新的霉菌毒素吸附劑,并且取得了一定的進展。如:消膽胺和交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮(PVPP)。消膽胺是一種陰離子交換樹脂,一般用于腸道中吸附膽汁酸,降低低密度脂蛋白和膽固醇質(zhì)量濃度。但體外研究表明:這種樹脂對赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素有較強的吸附能力。Giuseppina等體外模擬健康豬胃腸道,研究不同吸附劑對玉米赤霉烯酮在胃腸道吸收的影響,結(jié)果表明:消膽胺可以使小腸對玉米赤霉烯酮的吸附率從32%下降到16%。PVPP是一種不溶性高分子極性多孔性兩性化合物,體外試驗結(jié)果表明:它可以吸附0.3毫克/克玉米赤霉烯酮。