王新英，史軍輝，劉茂秀

(新疆林業(yè)科學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830046)

胡楊優(yōu)株花芽嫁接制種技術(shù)初探

王新英，史軍輝，劉茂秀

(新疆林業(yè)科學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830046)

胡楊樹體高大，干形彎曲，分枝較多，飽滿花芽多著生于樹體頂部，人工控制授粉困難。為了獲取具有優(yōu)良性狀的子代，加快其制種進程，通過近幾年對胡楊物候期觀測、枝接及芽接繁殖技術(shù)的探索，初步形成一套行之有效的胡楊優(yōu)株人工控制授粉制種技術(shù)：(1)以2～3年生健壯胡楊實生幼苗為砧木，地徑為0.7～1.2 cm為宜；(2)3月初采集優(yōu)株雄花枝，采用水培方式收集花粉；(3)萌動前采集優(yōu)株飽滿、粗大雌花枝，采用“T”形芽接法將花芽嫁接到砧木上：(4)花序長出后，及時修剪枝葉，待花序伸長，苞片張開，柱頭微卷發(fā)淡黃時后即套袋進行控制授粉：(5)授粉結(jié)實后解袋，待蒴果變成黃綠色即可采種。試驗表明：胡楊芽接成活率較高，嫁接25 d后成活率達83%，授粉坐果率62%，種子的平均發(fā)芽率為31%。研究結(jié)果可為胡楊優(yōu)株繁育提供技術(shù)支撐，為干旱區(qū)防護林建設(shè)提供新材料。

胡楊；花芽嫁接；人工授粉；種子采收

新疆受干旱氣候和封閉內(nèi)陸盆地的影響，原生與次生鹽堿地具有面積大、類型多、積鹽重、形成復(fù)雜等特點[1]，全疆鹽漬化面積達1.1×105km2，約占全國鹽漬土面積的1/3[2]。胡楊(PopuluseuphraticaOliv.)是楊柳科楊屬中最古老、最原始的木本植物，是典型的潛水旱中生至中生植物，是荒漠和半荒漠地區(qū)唯一自然成林的喬木樹種[3]，具有極強的抗逆性，能在干旱、鹽堿化、多風(fēng)沙的惡劣環(huán)境下生長。對于遏制沙漠?dāng)U張、保護和改善自然環(huán)境，維護調(diào)控干旱荒漠區(qū)脆弱的生態(tài)系統(tǒng)平衡、改善綠洲農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要意義[4-5]。雜交育種是創(chuàng)造優(yōu)良品種的一個重要手段。通過雜交育種，培育出具有胡楊優(yōu)良特性的雜交品種，對改良胡楊品種具有重要的現(xiàn)實意義。胡楊屬于胡楊派中的唯一種，它與楊屬其他各派的楊樹之間的人工雜交都屬于遠緣雜交，具有不親和性[6]。不少學(xué)者對胡楊雜交改良進行了大量的工作，但這個古老的樹種遺傳特性十分牢固，獲得優(yōu)良的改良品系較少。不少學(xué)者又進行大量雜交，應(yīng)用黑楊、加拿大楊、香脂楊、苦楊、灰楊等與胡楊雜交，同樣未能成功。1952年NA.卡巴采夫在莫斯科林業(yè)研究院進行了異葉楊與鉆天楊、香脂楊、銀白楊、山楊、雅勃洛夫楊、雜種山楊、莫斯科銀白楊的雜交，結(jié)果僅在山楊、雜種山楊和莫斯科銀白楊的雜交上取得良好效果[7-10]。近年來，彭儒勝等[11]選用遼楊3號、107楊、小葉楊、河北楊、銀白楊作為母本與胡楊雜交，并進行離體子房/胚珠培養(yǎng)，克服了授粉后種子未成熟蒴果就脫落而得不到雜種植株的問題。張東亞等[12]分別以胡楊為母本及父本與青楊派和黑楊派、白楊派的16種楊樹進行雜交，僅獲得以胡楊為母本雜交種苗組合4個，以胡楊為父本雜交種苗組合3個。胡楊作為干旱風(fēng)沙區(qū)生態(tài)公益林建設(shè)的主要樹種之一，發(fā)揮著不可替代的作用。但胡楊較其他速生楊生長緩慢，且干形彎曲，用材性較差，經(jīng)濟效益低下，不利于胡楊大面積的推廣種植。隨著人工林面積的不斷增長，對胡楊良種壯苗的需求迅速擴大，急需選育出生長快、干形好、抗逆性強的優(yōu)質(zhì)胡楊良種。目前選擇胡楊優(yōu)良雌雄單株進行定向雜交育種的研究尚未見報道。因此，本文以胡楊優(yōu)株為父母本，以雄花芽本砧嫁接培養(yǎng)雄株，雌花芽切枝室內(nèi)水培，采用人工授粉方式進行雜交，以期獲得性狀優(yōu)良的胡楊子代，為新疆困難立地條件下造林提供優(yōu)質(zhì)良種。

1 胡楊優(yōu)株選擇

選擇性狀優(yōu)良的胡楊雌雄單株是本項研究的基礎(chǔ)。2011年10月，對新疆胡楊分布較多的區(qū)域之一巴音郭楞蒙古自治州尉犁縣的天然胡楊林和人工林采用典型抽樣調(diào)查法進行調(diào)查。

典型樣樹(即候選優(yōu)良單株)的確定是通過當(dāng)?shù)亓謽I(yè)技術(shù)人員的推薦和實地觀測。觀測指標有樹高(H)、胸徑(D1.3)、通直度(T)、明顯度(VI)及枝下高(HB)等5個指標進行每木檢尺，主干通直度、明顯度根據(jù)李鐵民等[13]的方法劃分，劃分標準見表1。通過調(diào)查在農(nóng)二師31團9連和尉犁縣興平鄉(xiāng)哈拉洪村確定生長健壯、具有明顯頂端優(yōu)勢、樹干通直、無病蟲害的優(yōu)良雌雄單株各3株。優(yōu)株性狀見表2。

表1 主干性狀評判標準及分值

表2 胡楊優(yōu)株性狀表

2 花粉采集與制備

根據(jù)胡楊生物學(xué)特性，2月底在標定好的胡楊優(yōu)良雄株上選擇生長健壯、花芽飽滿的花枝進行采集，每個優(yōu)株上各采集5個花枝。采集后立即用保鮮膜包好，放入移動冰箱中，帶回烏魯木齊，雪藏。4月初，將采集的花枝采用室內(nèi)切枝水培方法進行花粉收集。室內(nèi)晝夜溫度在12～20 ℃，濕度60%～70%。及時修剪葉芽，以防營養(yǎng)不足，每2 d更換1次水培罐內(nèi)的陳水。水培5～7 d后，花序伸長，花粉呈金黃色時，人工收集花粉。收集好后裝入玻璃瓶中，硅膠密封，放入低溫冰箱冷藏，待用。

3 嫁接

3.1 砧木和接芽準備

砧木的大小、粗細對嫁接成活率密切相關(guān)。根據(jù)劉茂秀等[14]研究結(jié)果，選擇2年生、地徑為0.7～1.2 cm的胡楊苗為砧木。3月初，將砧木移栽至試驗區(qū)內(nèi)，為促進砧木盡快緩苗，將其定干至80 cm，3個月后開始試驗?；ㄑ康倪x擇對嫁接成活率至關(guān)重要。萌動前，在已標定好的雌株上，采集樹體中上部花芽飽滿的花枝，每株樹上采集20～30枝，迅速裝入移動冰箱中，帶回試驗地進行花芽嫁接。

3.2 嫁接技術(shù)

胡楊花枝嫁接采用單芽“T”形芽接法。宜選擇陰天進行嫁接，若晴天嫁接，應(yīng)選擇早晚時段，避開高溫。嫁接前，將砧木的側(cè)枝全部清除干凈。嫁接時，選取花枝中下部飽滿的花芽進行芽接。首先用嫁接刀削去花芽一側(cè)下部的樹皮(深達木質(zhì)部)，削面長2～3 cm，下剪口削成45°斜角；然后將砧木平茬至50 cm左右，在靠近頂端一側(cè)的木質(zhì)部與韌皮部切開，留皮層，刀口長2～3 cm，將花芽接穗的削面與砧木的削面相對，使砧穗形成層對齊(只有一側(cè)對齊即可)，并將所留皮層敷于芽下方切口處，這樣就形成多個愈合面，有利于接口愈合，然后用塑料薄膜條綁扎嚴密，剪口與削口都要包嚴，防止失水，影響成活。

3.3 嫁接后管理

嫁接后，及時灌水，保持土壤濕潤。花芽萌發(fā)后，要對接口下新萌發(fā)的本砧芽及時抹除以免與嫁接芽爭養(yǎng)分和陽光，利于接芽成活?；ㄑ坑虾?，要及時解去綁扎膜。待花序長出后，加強肥水管理和病蟲害的防治。

嫁接25 d后，調(diào)查嫁接成活率，芽接成活率可達83.0%。但由于花芽及砧木個體差異，同一時間嫁接的花序生長情況有所差異。

4 人工控制授粉

4.1 授粉

對嫁接成活的花芽，每隔3 d觀察一次花序發(fā)育狀態(tài)，待花序苞片張開，柱頭微卷發(fā)淡黃時即進行控制授粉。7月18日開始授粉，授粉時將提前收集好的花粉從冰箱中拿出，用毛筆蘸少量花粉輕彈均勻灑落在柱頭上，毛筆不要觸及柱頭，花粉不宜過多，授粉結(jié)束后套袋隔離，防止花粉污染。因各株雌花成熟情況不均一，根據(jù)成熟情況，分開授粉，以提高授粉成功率。5 d后解袋。調(diào)查授粉坐果率，坐果率為62%。

4.2 授粉后管理

授粉2～3 d內(nèi)澆水不能噴灑到花序，以防止花粉被沖走；及時剪除花序周圍的新發(fā)枝。加強水肥管理，每次灌水時隨水追施2～3 kg尿素，保證花序的營養(yǎng)供應(yīng)。

5 種子采收及發(fā)芽試驗

天然胡楊種子成熟期差別較大，一般6—9月均有種子成熟。而本試驗中由于授粉時間接近，種子成熟較集中。9月低，果序由綠色變成黃綠色時，種子已基本發(fā)育成熟，進行采摘。將采摘后的蒴果進行人工處理，得到胡楊種子。按照林木種子檢驗規(guī)程進行若干次試驗所獲種子的發(fā)芽情況，使用人工光照培養(yǎng)箱進行種子發(fā)芽試驗。試驗結(jié)果表明種子發(fā)芽率平均為31.0%，最高達56.0%。

6 小結(jié)與討論

6.1 胡楊優(yōu)株花芽嫁接制種技術(shù)通過采集胡楊優(yōu)株的雌雄花枝，采用胡楊本砧芽接方法培養(yǎng)母本，以切枝水培方法培養(yǎng)父本，人工授粉進行制種。該項技術(shù)操作方便、安全、快捷，不僅克服了由于胡楊樹體高大，人工控制授粉困難的難題，而且還可獲取具有優(yōu)良性狀的胡楊子代，可應(yīng)用于大量父本、母本的雜交育種工作。

6.2 花粉活力持續(xù)時間的長短對有效完成授粉受精作用有直接影響。胡楊花粉在常溫狀態(tài)下第1天的花粉活力為62%，第8天降低為30.3%[15]，所以控制授粉的時機是獲得大量種子的關(guān)鍵。將花粉過早的涂于花序上，還沒到雌花柱頭發(fā)育成熟，花粉已失去活力，卵細胞沒能完成受精；若授粉時間較晚，這時雌花柱頭已萎蔫，同樣不能完成受精。因此，在授粉時需注意觀察胡楊花序中柱頭的發(fā)育情況，待柱頭微卷發(fā)淡黃色時，及時授粉，以獲得較好的坐果率。

6.3 試驗中，胡楊種子的平均發(fā)芽率較低，僅為31.0%，而且還出現(xiàn)種子未成熟蒴果就脫落的情況。在下一步的研究中，可嘗試采用離體子房/胚珠培養(yǎng)的方法獲得大量具有優(yōu)良性狀的種子，為新疆困難立地條件造林提供優(yōu)質(zhì)良種。

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1005-5215(2015)03-0105-03

2014-12-09

2012年新疆維吾爾自治區(qū)林業(yè)科技專項青年基金項目：胡楊雜交育種初步研究

王新英(1981-)，女，新疆昌吉人，碩士，助理研究員，主要從事荒漠化防治與鹽堿地治理研究，Email：30396106@qq.com

S792.11

A

10.13601/j.issn.1005-5215.2015.03.043