王治蘭 賈淑娟 陳俊紅

北京大學(xué)首鋼醫(yī)院消化內(nèi)科，北京100144

幽門螺桿菌感染與胃癌組織中HER2表達(dá)的相關(guān)性研究

王治蘭 賈淑娟 陳俊紅

北京大學(xué)首鋼醫(yī)院消化內(nèi)科，北京100144

目的探討幽門螺桿菌感染與胃癌HER2表達(dá)的相關(guān)性。方法選取2010年1月～2014年12月在我院診斷的168例胃癌患者納入本研究，分析其臨床特點(diǎn)和病理特征。使用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)胃癌患者中HER2蛋白的表達(dá)，Hp檢測(cè)方法采用Warthin-Stally（W-S）銀染法染色。結(jié)果122例（72.6%）胃癌患者中幽門螺桿菌陽性，而18例（10.7%）患者HER2蛋白表達(dá)陽性。胃癌的不同病理類型中HER2蛋白表達(dá)率明顯不同，管狀腺癌中HER2蛋白表達(dá)率為12.8%（16/125），其他類型為4.7%（2/43）。HER2蛋白表達(dá)與幽門螺桿菌感染無相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論胃癌患者幽門螺桿菌感染與HER2蛋白表達(dá)并無相關(guān)性，提示幽門螺桿菌導(dǎo)致胃癌的發(fā)病機(jī)制可能并不是通過影響HER2基因的活化，而是影響了其他致癌通路。

胃腫瘤；基因；erbB-2；免疫組織化學(xué)；幽門螺桿菌

幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）感染與胃癌的發(fā)生發(fā)展具有明確的相關(guān)性。近年來的研究發(fā)現(xiàn)HER2可表達(dá)于約20%的胃癌患者中。HER2基因活化以及HER2蛋白的過表達(dá)也與胃癌的發(fā)生有關(guān)。近年來，針對(duì)HER2靶點(diǎn)的曲妥珠單抗逐漸應(yīng)用于HER2陽性的胃癌患者，不但提高了緩解率，而且改善了總生存率。但是，關(guān)于胃癌患者Hp感染與HER2蛋白表達(dá)之間的研究較少，二者之間的相關(guān)性仍未得到明確。本文回顧性分析我院收治的168例胃癌患者，探討HER2表達(dá)與幽門螺桿菌感染、臨床病理特點(diǎn)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

回顧性分析2010年1月～2014年12月在我院診斷和治療的168例胃癌患者的臨床與病理資料。所有病例均經(jīng)手術(shù)切除進(jìn)行病理診斷。

1.2 Hp檢測(cè)方法和判定

采用Warthin-Stally（W-S）銀染法染色。常規(guī)脫蠟至水，1%硝酸銀液55℃孵育50min。5%明膠、3%對(duì)苯二酚和2%硝酸銀混合液染色，55℃溫水洗，醋酸鹽緩沖液洗，脫水，透明，封片。W-S銀染法染HP為棕色或棕黑色、呈短桿狀，弧形或S形。

1.3 HER2表達(dá)的診斷標(biāo)準(zhǔn)

所有胃癌標(biāo)本均由兩位有經(jīng)驗(yàn)的高年資病理醫(yī)師按照修訂后的HercepTest評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立閱片。修訂后HercepTest評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0為沒有染色，或<10%的細(xì)胞有膜染色；1+為>10%的細(xì)胞有微弱/勉強(qiáng)可見的膜染色，或細(xì)胞只有部分膜染色；2+為>10%的腫瘤細(xì)胞有弱到中等的完全或基底外側(cè)膜染色；3+為>10%的腫瘤細(xì)胞有中等到強(qiáng)的完全或基底外側(cè)膜染色。0和1+視為無或低表達(dá)，2+視為意義不明確，3+視為過表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，分類變量的比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特點(diǎn)

中位年齡56歲（24～76歲）。男114例，女54例，男女比例2.11∶1。病理類型：管狀腺癌125例，乳頭狀腺癌3例，黏液腺癌10例，印戒細(xì)胞癌28例，未分化癌2例。Hp陽性率為72.6%（122/168）。HER2蛋白在所有胃癌標(biāo)本中的陽性表達(dá)率為10.7%（18/168）。見表1。

表1 168例胃癌患者HER2陽性表達(dá)率與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

2.2 HER2陽性表達(dá)率與胃癌患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

HER2蛋白陽性表達(dá)率在胃癌的不同病理類型中各有不同，其中管狀腺癌中HER2蛋白表達(dá)率高達(dá)12.8%（16/125），而其他類型僅為4.7%（2/43）。Hp感染組和無Hp感染組的HER2蛋白陽性表達(dá)率并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

2.3 Hp感染與胃癌患者HER2陽性表達(dá)的相關(guān)性分析

Hp感染與HER2陽性表達(dá)之間并無相關(guān)性（r= 0.133，P=0.087）。

3 討論

HER2是位于17q21的癌基因，編碼相對(duì)分子質(zhì)量為185 000的跨膜糖蛋白，屬于HER受體家族，具酪氨酸激酶活性[1]。HER2基因的擴(kuò)增及其蛋白的陽性表達(dá)在乳腺癌中得到深入地研究，其致癌機(jī)制為抑制凋亡，促進(jìn)增殖；增加腫瘤細(xì)胞的侵襲力；促進(jìn)腫瘤血管新生和淋巴管新生。研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中HER2蛋白表達(dá)與浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、病理類型具有相關(guān)性[2]。

免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HER2既經(jīng)濟(jì)又便于操作，而且與熒光原位雜交技術(shù)檢測(cè)之間有很好的符合率[3，4]，因此成為臨床上首選的檢測(cè)方法[5]。本研究選擇免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HER2過表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃癌患者中HER2蛋白陽性表達(dá)率為10.7%，HER2蛋白陽性表達(dá)與胃癌不同病理類型中HER2陽性表達(dá)率具有明顯差異，其中管狀腺癌中HER2蛋白表達(dá)率明顯高于其他類型，這就在病理學(xué)方面為胃癌的靶向治療提供了依據(jù)。

針對(duì)HER2靶點(diǎn)的曲妥珠單抗廣泛用于乳腺癌的治療并獲得了很好的療效[6]。曲妥珠單抗用于治療HER2陽性胃癌患者也取得了讓人振奮的效果。有研究首次證實(shí)對(duì)于胃癌患者中表達(dá)HER2的亞群，曲妥珠單抗是一種新型有效、安全的治療藥物[7]。該研究納入594例HER2免疫組化+++或FISH陽性患者，隨機(jī)分為聯(lián)合治療組（曲妥珠單抗聯(lián)合順鉑及5-氟尿嘧啶或卡培他濱）和單純化療組，共進(jìn)行6周期治療，曲妥珠單抗持續(xù)應(yīng)用至疾病進(jìn)展。中位隨訪17.1個(gè)月，聯(lián)合治療組和單純化療組的客觀有效率分別為47.3%和34.5%，中位OS分別為13.5個(gè)月和11.1個(gè)月。

胃癌的發(fā)生發(fā)展與遺傳和環(huán)境因素密切相關(guān)[8]。HP感染作為環(huán)境因素之一，不但參與了慢性胃炎、消化性潰瘍等疾病發(fā)生[9]，而且在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用[10]。研究證實(shí)[11]，Hp破壞宿主細(xì)胞質(zhì)膜,使局部的細(xì)胞外Ca2+逆流，Ca2+可促進(jìn)膜聯(lián)蛋白家族成員A1和A4及細(xì)胞表面修復(fù)因子LMAP-2的表達(dá)增加，促進(jìn)宿主細(xì)胞增殖，進(jìn)而導(dǎo)致癌變的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中Hp陽性率高達(dá)72.6%（122/168），提示Hp感染參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展。

目前關(guān)于Hp感染與胃癌HER2陽性表達(dá)的相關(guān)性研究報(bào)道較少。武鴻美等[12]對(duì)860例胃癌患者進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn).HEB2蛋白在胃癌中的陽性表達(dá)與腫瘤分化、Lauren分型及WHO分型相關(guān)，與年齡、性別、腫瘤發(fā)生部位及臨床分期不相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)HER2蛋白陽性表達(dá)與Hp感染并無相關(guān)性，與年齡、性別、腫瘤發(fā)生部位及臨床分期之間也無相關(guān)性，與國(guó)內(nèi)外的報(bào)道相一致[12-14]。提示Hp感染導(dǎo)致胃癌發(fā)病的機(jī)制并非是因?yàn)镠er2基因的活化，而是可能通過影響其他的信號(hào)通路進(jìn)而導(dǎo)致的胃癌的發(fā)生[15-16]。

總之，盡管胃癌對(duì)化療、放療敏感性不高，5年生存率也不盡如人意，但是隨著靶向時(shí)代的來臨，針對(duì)胃癌發(fā)生機(jī)制中靶點(diǎn)的藥物逐漸應(yīng)用于臨床，必將在個(gè)體化治療層面開啟胃癌靶向治療的新篇章，而Hp感染導(dǎo)致胃癌機(jī)制的研究也將更加深入。

[1]Akiyama T，Sudo C，Ogawara H，et al.The product of the human c-erbB-2 gene：A 185-kilodalton glycoprotein with tyrosine kinase activity[J].Science，1986，232（4758）：1644-1646.

[2]Scaltriti M，Verma C，Guzman M，et al.Lapatinib，a HER2 tyrosine kinase inhibitor，induces stabilization and accumulation of HER2 and potentiates trastuzumab-dependent cell cytotoxicity[J].Oncogene，2009，28（6）：803-814.

[3]Li Z，Dabbs DJ，Cooper KL，et al.Dual HER2 gene protein assay：focused study of breast cancers with 2+immunohistochemical expression[J].Am J Clin Pathol，2015，143（3）：451-458.

[4]Dennis J，Parsa R，Chau D，et al.Quantification of human epidermal growth factor receptor 2 immunohistochemistry using the Ventana Image Analysis System：Correlation with gene amplification by fluorescence in situ hybridization：the importance of instrument validation for achieving high（>95%）concordance rate[J].Am J Surg Pathol，2015，39（5）：624-631.

[5]《胃癌HER2檢測(cè)指南》編寫組.胃癌HER2檢測(cè)指南[J].中華病理學(xué)雜志，2011，40（8）：553-557.

[6]Kawalec P，?opuch S，Mikrut A.Effectiveness of targeted therapy in patients with previously untreated metastatic breast cancer：A systematic review and meta-analysis[J]. Clin Breast Cancer，2015，15（2）：90-100.

[7]Bang YJ，Van Cutsem E，F(xiàn)eyereislova A，et al.Trastuzumab in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2-positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer（ToGA）：A phase 3，open-label，randomised controlled trial[J].Lancet，2010，376（9742）：687-697.

[8]Park JY，von Karsa L，Herrero R.Prevention strategies for gastric cancer：A global perspective[J].Clin Endosc，2014，47（6）：478-489.

[9]Roesler BM，Rabelo-Gon?alves EM，Zeitune JM.Virulence Factors of Helicobacter pylori：A Review[J].Clin Med Insights Gastroenterol，2014，7：9-17.

[10]De Sablet T，Piazuelo MB，Shaffer CL，et al.Phylogeographic origin of Helicobacter pylori is a determinant of gastric cancer risk[J].Gut，2011，60（9）：1189-1195.

[11]Lin LL，Huang HC，Ogihara S，et al.Helicobacter pylori Disrupts Host Cell Membranes，Initiating a Repair Response and Cell Proliferation[J].Int J Mol Sci，2012，13（8）：10176-10192.

[12]武鴻美，劉艷輝，林鋒，等.中國(guó)胃癌患者HER2蛋白表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系[J].中華病理學(xué)雜志，2011，40（5）：296-299.

[13]Gravalos C，Jimeno A.HER2 in gastric cancer：A new prognostic factor and a novel therapeutic target[J].Ann Oncol，2008，19（9）：1523-1529.

[14]Hofmann M，Stoss O，Shi D，et al.Assessment of a HER2 scoring system for gastric cancer：Results from a validation study[J].Histopathology，2008，52（7）：797-805.

[15]Koeppel M，Garcia-Alcalde F，Glowinski F，et al.Helicobacter pylori Infection Causes Characteristic DNA Damage Patterns in Human Cells[J].Cell Rep，2015，11（11）：1703-1713.

[16]Chiurillo MA.Role of the Wnt/β-catenin pathway in gastric cancer：An in-depth literature review[J].World J Exp Med，2015，5（2）：84-102.

Correlation analysis of helicobacter pylori infection with HER2 protein expression in gastric cancer tissue

WANG ZhilanJIA ShujuanCHEN Junhong
Department of Gastroenterology,Peking University Shougang Hospital,Beijing100144,China

Objective To evaluate the correlation analysis of helicobacter pylori infection with HER2 protein expression in gastric cancer tissue．Methods Clinical and pathological data of 168 patients with gastric carcinoma diagnosed in our hospital from January 2010 to December 2014 were enrolled in this study.The clinical characteristics and pathological feature were retrospectively analyzed.HER2 protein expression was examined by immunohistochemical staining, and the helicobacter pylori infection was detected by Warthin-Stally staining.Results All 122 cases(72.6%)of patients with positive gastric cancer,and 18 cases(10.7%)with positive HER2 protein expression.HER2 protein expression rate in different pathological types of gastric cancer was significantly different.And the HER2 protein expression rate in tubular adenocarcinoma was 12.8%(16/125),while that in other types was 4.7%(2/43).There was no correlation between HER2 protein expression and Helicobacter pylori infection(P>0.05).Conclusion There is no correlation between helicobacter pylori infection and HER2 expression expression in patients with gastric carcinoma,implying that the helicobacter pylori may affect the other carcinogenic pathways rather than influence the HER2 gene activation.

Stomach neoplasms；Genes；erbB-2；Immunohistochemistry；Helicobacter pylori

R735.2

A

1673-9701（2015）24-0014-03

2015-07-20）