蔡文婷

（國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利局專利審查協(xié)作廣東中心，廣東廣州510530）

農(nóng)業(yè)廢棄物發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的研究進(jìn)展

蔡文婷

（國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利局專利審查協(xié)作廣東中心，廣東廣州510530）

綜述了國(guó)內(nèi)外單細(xì)胞蛋白（SCP）開發(fā)利用和用農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP的發(fā)展與現(xiàn)狀，重點(diǎn)介紹了利用纖維素原料和農(nóng)副加工產(chǎn)品廢棄物生產(chǎn)SCP的研究進(jìn)展及面臨的問題，并對(duì)農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提出了建議。

單細(xì)胞蛋白質(zhì)（SCP）；農(nóng)業(yè)廢棄物；纖維素

單細(xì)胞蛋白（single cell protein，簡(jiǎn)稱SCP），亦稱微生物蛋白或菌體蛋白。SCP所含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)極為豐富，除含有大量蛋白質(zhì)和人體必須的8種氨基酸以外，還含有多種維生素、碳水化合物、脂類等。目前人們公認(rèn)SCP是最具前景的蛋白質(zhì)新資源之一，對(duì)解決糧食中蛋白質(zhì)不足和動(dòng)物飼料等問題有重要作用[1]。與此同時(shí)，中國(guó)作為一個(gè)農(nóng)業(yè)大國(guó)，每年都會(huì)產(chǎn)生大量的農(nóng)業(yè)廢棄物（其中包含著大量的糖質(zhì)、纖維素、木質(zhì)素等可再生生物資源），這些物質(zhì)因得不到合理利用而被焚燒或填埋，這不僅使生物質(zhì)資源白白浪費(fèi)，同時(shí)還造成了環(huán)境污染。在這種背景下，利用微生物將這些物質(zhì)轉(zhuǎn)化為高酶活單細(xì)胞蛋白，就成為國(guó)際上令人矚目的研究課題。不僅能夠提高資源的利用效率，而且對(duì)消除環(huán)境污染，改善生態(tài)環(huán)境都具有重要意義。

1 國(guó)內(nèi)外SCP開發(fā)利用概況

1.1國(guó)外SCP開發(fā)利用概況

1955年聯(lián)合國(guó)農(nóng)糧組織的蛋白質(zhì)咨詢組織（PAG）強(qiáng)調(diào)了SCP的重要性，制定了SCP的研究指導(dǎo)方針。隨著石油價(jià)格的逐漸增高，而且其生產(chǎn)的SCP往往含有致癌物質(zhì)，研究人員開始逐步轉(zhuǎn)向其他的原料生產(chǎn)SCP。由于甲烷蘊(yùn)藏量大、來源廣泛、價(jià)格低、不含致癌的稠環(huán)芳烴等雜質(zhì)，一度被作為第二代石油蛋白的原料加以研究。后來人們逐漸發(fā)現(xiàn)利用甲醇、乙醇等作為SCP的生產(chǎn)碳源，比甲烷、石蠟和其他烷烴更具有優(yōu)勢(shì)。

然而從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看，以石油、乙醇等原料生產(chǎn)SCP并不經(jīng)濟(jì)，因?yàn)槠滟Y源有限，而且價(jià)格在不斷上漲，特別是石油中含有致癌烴類，使得其生產(chǎn)的SCP存在安全隱患。因此，世界各國(guó)的研究人員都逐漸轉(zhuǎn)向了利用各種有機(jī)廢棄物作為原料生產(chǎn)SCP的研究。在這一領(lǐng)域中，俄羅斯處于領(lǐng)先地位，他們主要利用食品工業(yè)廢水和農(nóng)產(chǎn)品下腳料，如酒精廢液、玉米芯、棉籽殼等生產(chǎn)飼料酵母，年產(chǎn)50萬(wàn)t以上。保加利亞以木材水解液和部分酒精廢液為原料，建成了兩座年產(chǎn)2.5萬(wàn)t的SCP工廠。美國(guó)以麥秸為原料，經(jīng)雙菌株固態(tài)發(fā)酵，使麥秸的蛋白質(zhì)含量增至16%～18%，纖維素分解率達(dá)31%。

1.2國(guó)內(nèi)SCP開發(fā)利用概況

我國(guó)自20世紀(jì)50年代末期就已經(jīng)開始利用有機(jī)廢棄物生產(chǎn)SCP：黑龍江伊春南岔木材廠利用木材水解液生產(chǎn)酵母飼料，年產(chǎn)2 000 t。20世紀(jì)80年代中期，南方許多味精廠都籌建了年產(chǎn)千噸的飼料酵母車間。同時(shí)，以酒精廢液為原料生產(chǎn)SCP也取得了一定的進(jìn)展。生產(chǎn)酒精的原料有兩類：一是用蜜糖做原料，二是用薯干淀粉等作原料。用蜜糖酒精廢液生產(chǎn)SCP，國(guó)內(nèi)外已有較成熟的經(jīng)驗(yàn)，即用蒸餾的廢液添補(bǔ)蜜糖的澄清液直接培養(yǎng)飼料。廣西輕工廠與廣西紅河糖廠協(xié)作，建設(shè)了中間生產(chǎn)裝置，產(chǎn)品的蛋白質(zhì)含量達(dá)42%以上。

近年來利用植物纖維素為原料生產(chǎn)SCP也越來越受到重視。湖南石門縣糧食局以稻殼、稻草、麥秸、玉米芯等為原料接種側(cè)耳菌，使產(chǎn)品纖維素含量降低，蛋白質(zhì)含量提高。四川資中糖廠用纖維素酶水解蔗渣所得糖液生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白，5 t蔗渣可生產(chǎn)1 t單細(xì)胞蛋白。

2 農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP的發(fā)展現(xiàn)狀

為了解決食品中蛋白質(zhì)不足和動(dòng)物飼料問題，近年來人們逐漸將注意力轉(zhuǎn)向了利用農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP的研究上面，這其中主要以利用植物性廢棄物和農(nóng)副加工產(chǎn)品產(chǎn)生的廢棄物生產(chǎn)SCP為主。

2.1利用木質(zhì)纖維原料生產(chǎn)轉(zhuǎn)化SCP

2.1.1木質(zhì)纖維原料的化學(xué)組成

植物性廢棄物中含有大量的木質(zhì)纖維素，其是植物界中僅次于纖維素的最豐富和最重要的有機(jī)高聚物，其基本結(jié)構(gòu)單元是苯基丙烷，靠多種共鍵連接形成一種不溶性的、異質(zhì)的、無(wú)光學(xué)活性的、無(wú)規(guī)則的、如晶體的、高度分支的三維空間結(jié)構(gòu)的高分子聚合物。木質(zhì)素以一種物理屏障存在，包圍纖維素，成為外圍莖質(zhì)，保護(hù)纖維素免遭微生物及酶的攻擊，成為許多工業(yè)化過程中有效利用纖維素的一個(gè)障礙[2]。

2.1.2木質(zhì)纖維原料生產(chǎn)轉(zhuǎn)化SCP的工藝技術(shù)

利用木質(zhì)生物質(zhì)資源生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的方法有3種：第一種是先將原料經(jīng)纖維素酶、半纖維素酶等糖化后，再用酵母等微生物生產(chǎn)SCP；第二種是直接利用纖維素和半纖維素分解菌和酵母菌同時(shí)糖化發(fā)酵菌體轉(zhuǎn)化成SCP，包括液態(tài)發(fā)酵和固態(tài)發(fā)酵；第三種是利用纖維素半纖維素水解液生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白。

陳彥等人[3]研究了不同無(wú)機(jī)酸水解玉米芯的還原糖得率和培養(yǎng)所得SCP量綜合考慮催化活性、糖得率和水解糖的質(zhì)量，最后選定稀H2SO4作為水解酸。酸解法條件劇烈，會(huì)生成糠醛等有毒的分解產(chǎn)物，而且成本高，對(duì)設(shè)備有腐蝕作用，所以不宜在發(fā)酵工業(yè)上使用。

Cara C等人比較了蒸汽爆裂法與堿處理法對(duì)木質(zhì)纖維素的預(yù)處理能力，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：氫氧化鈉雖有較強(qiáng)的脫木質(zhì)素和降低結(jié)晶度的能力，但在脫木質(zhì)素的同時(shí)，半纖維素也被分解，致使損失太多，同時(shí)還存在試劑的回收、中和、洗滌等問題。

在利用木質(zhì)纖維素生產(chǎn)SCP時(shí)，除了預(yù)處理這一關(guān)鍵步驟以外，混合菌株的發(fā)酵也是關(guān)鍵。馬旭光等人[4]利用經(jīng)航天誘變篩選的高產(chǎn)纖維素酶活菌株黑曲霉ZM-8和高生物積累量的啤酒酵母YB-6，采用混菌固態(tài)發(fā)酵方式，研究了啤酒酵母YB-6的接種量、接種時(shí)間、黑曲霉ZM-8和啤酒酵母YB-6共生發(fā)酵時(shí)間等因素，在玉米秸稈為主要原料的培養(yǎng)基中對(duì)黑曲霉ZM-8產(chǎn)纖維素酶活和發(fā)酵產(chǎn)物中單細(xì)胞蛋白（SCP）含量的影響。

在利用植物性廢棄物生產(chǎn)SCP時(shí)，國(guó)內(nèi)主要集中在對(duì)秸稈的研究，而國(guó)外以稻草生產(chǎn)SCP的研究較多，但無(wú)論用哪種原料，當(dāng)前人們面對(duì)的問題還是集中在原料的預(yù)處理與利用生物技術(shù)培養(yǎng)高效、高產(chǎn)的混合菌株兩個(gè)主要方面，因此這兩個(gè)方面也將是今后木質(zhì)纖維素生產(chǎn)SCP的研究重點(diǎn)。

2.2利用農(nóng)副產(chǎn)品加工剩余物生產(chǎn)轉(zhuǎn)化SCP

我國(guó)是產(chǎn)橘大國(guó)，柑橘加工后廢渣占果實(shí)質(zhì)量的25%～50%，但我國(guó)對(duì)柑橘?gòu)U渣利用較少，多作為廢棄物處理。以柑橘?gòu)U渣為原料，利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料，對(duì)解決我國(guó)蛋白飼料資源短缺、提高水果種植及加工效益、減少環(huán)境污染均有重要的意義。近年來，吳厚玖等[5]對(duì)柑橘?gòu)U渣發(fā)酵飼料用菌種、化學(xué)成分、喂養(yǎng)效果等進(jìn)行了初步研究；王偉軍等[6]通過3，5-二硝基水楊酸法測(cè)定蘋果渣中含3.02 g/100 g還原糖，直接稱量法測(cè)定蘋果渣中的水分含量為83.97%。對(duì)比分析酒精酵母、面包酵母、野生酵母等發(fā)酵菌種，確定相同條件下酒精酵母單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量最多。

廢糖蜜是糖廠的副產(chǎn)物，具有產(chǎn)量大、含糖量高的特點(diǎn)，其中含有大量酵母可以利用的可發(fā)酵性糖。因此，廢糖蜜是一種可以被利用生產(chǎn)SCP的資源。Lee Bum-Kyu和Shojaosadati Seyed Abbas也分別對(duì)廢糖蜜轉(zhuǎn)化SCP進(jìn)行了研究，前者通過不同的培養(yǎng)方式生產(chǎn)產(chǎn)阮假絲酵母，發(fā)現(xiàn)給料分批培養(yǎng)方式最好，得到的細(xì)胞產(chǎn)率和生產(chǎn)率分別為0.51 g/g底物和1.95 g/L·h-1，生產(chǎn)成本US$2.76/kg干細(xì)胞，低于商品酵母的售價(jià)，也低于藻類和光合細(xì)菌的生產(chǎn)成本。除利用果渣、廢蜜糖生產(chǎn)轉(zhuǎn)化SCP以外，也有研究人員對(duì)利用淀粉、奶酪副產(chǎn)物生產(chǎn)SCP進(jìn)行了研究。Paul Deepen在乳制品副產(chǎn)物中添加0.8%磷酸氫二銨和10×10-6的吲哚-3-乙酸發(fā)酵生產(chǎn)脆皮酵母，產(chǎn)品粗蛋白含量達(dá)到37%，總核酸為48.2%，不在毒性范圍。

3 農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP所面臨的問題

近年來，盡管利用農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)SCP取得了很大進(jìn)展，很多國(guó)家也都相繼投入了工業(yè)化生產(chǎn)，但該技術(shù)在大規(guī)模商業(yè)生產(chǎn)中仍存在一些關(guān)鍵性問題，主要分為以下3個(gè)方面。

（1）技術(shù)可行性。在實(shí)際應(yīng)用中，由于植物材料中纖維素微晶結(jié)構(gòu)的存在和半纖維素——木質(zhì)素層對(duì)纖維素的包圍與粘合作用，水分難以滲入，纖維素酶不能與基質(zhì)充分接觸，作用緩慢，影響了纖維素的酶解率和菌體蛋白轉(zhuǎn)化率。秸稈利用研究中用以生產(chǎn)的單一菌種的酶系不全，活性低、降解效果不理想及易受降解產(chǎn)物阻遏的原因，使得此項(xiàng)技術(shù)還處于研究過程之中。提高菌種酶產(chǎn)量、活力和穩(wěn)定性，改變纖維材料的結(jié)構(gòu)，提高對(duì)酶的敏感性，設(shè)計(jì)合理的發(fā)酵工藝路線，是木質(zhì)纖維原料生產(chǎn)轉(zhuǎn)化SCP研究中的重點(diǎn)內(nèi)容。

（2）SCP安全性。利用纖維質(zhì)原料生產(chǎn)SCP時(shí)，若采用酸法水解，由于條件較劇烈，會(huì)產(chǎn)生糠醛等有毒物質(zhì)，此外農(nóng)副產(chǎn)品加工剩余物中也含有農(nóng)藥殘余物以及有害病原菌，因此在利用農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)食用蛋白質(zhì)及動(dòng)物飼料時(shí)，這是必須要注意的問題。

（3）經(jīng)濟(jì)性。盡管利用農(nóng)業(yè)廢棄物能夠降低生產(chǎn)成本，特別是對(duì)于農(nóng)副加工產(chǎn)品行業(yè)不僅能夠提高產(chǎn)品附加值，而且有效地減少了環(huán)境污染，但是對(duì)于纖維質(zhì)原料來說，其質(zhì)輕、松散、占地大，給運(yùn)輸和貯存帶來很大困難，因此必須全面地開發(fā)單細(xì)胞蛋白質(zhì)服務(wù)中心，提供原料供應(yīng)、產(chǎn)品生產(chǎn)、市場(chǎng)銷售、飼喂形成網(wǎng)絡(luò)化、一體化的服務(wù)，才能真正的節(jié)省成本。

[1]彭志英.食品生物技術(shù)[M].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2001．

[2]梁新紅，常景玲.作物秸桿生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的研究概況[J].山西食品工業(yè)，2003(3)：5-7.

[3]陳彥，林曉艷，尹淑媛.制備單細(xì)胞蛋白的玉米芯原料酸水解催化劑選擇與多目標(biāo)優(yōu)化[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2004，16(5)：703-704.

[4]馬旭光，張宗舟.混菌固態(tài)發(fā)酵玉米秸稈生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的研究[J].中國(guó)釀造，2010(214)：26-28.

[5]吳厚玖，孫志高，王華.試論我國(guó)柑桔加工業(yè)發(fā)展方向[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2006(4)：85-89.

[6]王偉軍，李延華，張?zhí)m威，等.利用蘋果渣生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的研究[J].中國(guó)釀造，2008(197)：55-57.

《中國(guó)城市生活垃圾管理狀況評(píng)估報(bào)告》發(fā)布

我國(guó)城市生活垃圾清運(yùn)量大且增長(zhǎng)快速，從1979年的2 508萬(wàn)t增長(zhǎng)至2012年的17 081萬(wàn)t，增加了6.8倍，已成為我國(guó)可持續(xù)發(fā)展的重要障礙。

《中國(guó)城市生活垃圾管理狀況評(píng)估報(bào)告》(以下簡(jiǎn)稱《報(bào)告》)日前發(fā)布。“2012年，我國(guó)城市生活垃圾無(wú)害化處理率(考慮市轄區(qū)的農(nóng)村部分)僅為62.02%，城市人均生活垃圾日清運(yùn)量為1.12 kg，生活垃圾簡(jiǎn)單填埋量為814.1萬(wàn)t，占垃圾清運(yùn)量的6.59%……”《報(bào)告》中的這些數(shù)據(jù)表明，我國(guó)城市生活垃圾管理現(xiàn)狀堪憂。

據(jù)悉，《報(bào)告》是由中國(guó)人民大學(xué)國(guó)家發(fā)展與戰(zhàn)略研究院完成。利用2006—2012年公開的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，結(jié)合案例調(diào)查，從無(wú)害化、減量化、資源化、無(wú)害化前提下的低成本化4個(gè)角度評(píng)估了全國(guó)地級(jí)及以上城市的生活垃圾管理效果，并提出改進(jìn)城市生活垃圾管理要從源頭分類抓起，同時(shí)要加快信息公開的步伐。

The progress of fermentation of single cell protein（SCP）by agricultural residue

CAI Wenting
（Patent Examination Center of Guangdong Province,Guangzhou 510530,China）

The application and development trend of producing single cell protein home and abroad were introduced. The importance of producing single cell protein from agricultural residue was discussed,which included the progress of fermentation of single cell protein(SCP)by cellulose material and agricultural by-products.It also discussed the problems existing in the production of SCP and the application prospect.

single cell protein;agricultural residue;cellulose

X712

A

1674-0912（2015）05-0038-03

2015-03-09）

蔡文婷（1986-），女，寧夏銀川人，碩士研究生，研究實(shí)習(xí)員，專業(yè)方向：水處理研究。