下調(diào)Sam68基因表達促進急性淋巴細胞白血病Jurkat細胞凋亡*
2015-01-26 04:36:31李元葉李慶華龐天翔中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院血液學研究所血液病醫(yī)院實驗血液學國家重點實驗室北京100032
中國病理生理雜志 2015年10期
王 齊，李元葉，許 華，李慶華，龐天翔(中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院，血液學研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學國家重點實驗室，北京100032)
下調(diào)Sam68基因表達促進急性淋巴細胞白血病Jurkat細胞凋亡*
王齊，李元葉，許華，李慶華△，龐天翔△
(中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院，血液學研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學國家重點實驗室，北京100032)
目的:探討Sam68蛋白對白血病細胞Jurkat凋亡的影響。方法:針對Sam68靶點構(gòu)建pLKO-Tet-On條件性真核表達干擾載體，制備慢病毒并感染Jurkat細胞，誘導(dǎo)干擾載體表達，篩選穩(wěn)定表達shRNA細胞;采用實時熒光定量和免疫印跡技術(shù)檢測干擾效率;應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡，采用免疫印跡技術(shù)檢測凋亡相關(guān)蛋白表達水平變化情況。結(jié)果: Sam68基因表達下調(diào)的細胞凋亡數(shù)量增多，伴隨caspase-3活化水平增加和PARP活化水平下降，Akt磷酸化水平下降，Erk和Bcl-xL表達水平無明顯變化。結(jié)論: Sam68基因表達下調(diào)可通過影響Akt信號通路影響caspase-3和PARP蛋白表達，從而促進Jurkat細胞凋亡。
國家自然科學基金資助項目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學基金資助項目(No.14JCZDJC34900)
△E-mail: pang@ihcams.ac.cn
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