肖 靜,潘 宇,李曉紅,吳岳恒,姜 霖,楊翔宇,余細勇,△(廣東省人民醫(yī)院,廣東省醫(yī)學科學院醫(yī)學研究中心,廣東廣州50080;南方醫(yī)科大學,廣東廣州5055;廣州醫(yī)科大學藥學院,廣東廣州546)
心臟干細胞可通過旁分泌exosome保護心肌細胞發(fā)生凋亡
肖靜1,2,潘宇1,李曉紅1,吳岳恒1,姜霖1,2,楊翔宇1,2,余細勇1,3△
(1廣東省人民醫(yī)院,廣東省醫(yī)學科學院醫(yī)學研究中心,廣東廣州510080;2南方醫(yī)科大學,廣東廣州510515;3廣州醫(yī)科大學藥學院,廣東廣州511436)
心臟干細胞移植在心肌梗死治療中具有廣泛應用,外泌體(exosome)被認為是細胞旁分泌的重要介質(zhì)。本研究擬建立心臟固有干細胞(CPCs)的成熟分離方法,并初步探索CPCs分泌的exosome在體外保護氧化應激狀態(tài)下心肌細胞的凋亡。原代分離培養(yǎng)鑒定Sca-1 + CPCs,離心加試劑盒分離出CPCs分泌的exosome,并進行表型鑒定和粒徑分析;將心肌細胞分成對照組與CPC-exo預處理組,用H2O2處理心肌細胞誘導其凋亡,Western blot (WB)檢測cleaved caspase-3蛋白水平。結果顯示:磁珠分選出的細胞用免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)Sca-1呈現(xiàn)陽性表達,流式細胞術提示分選前和分選后Sca-1陽性細胞的比例差異具有統(tǒng)計學意義(n =3,P<0. 01) ; CPCs來源的exosome,WB結果提示其CD63表達陽性;體外凋亡保護的WB結果顯示,加了CPC-exo的細胞凋亡狀態(tài)明顯改善,且相關蛋白表達顯著降低(P<0. 05)。因此,心臟干細胞可以分泌出攜帶有重要信息物質(zhì)的exosome,能在體外保護心肌細胞,避免其發(fā)生凋亡,為臨床心梗等疾病提供全新的治療策略。
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