于吉鋒，李江凌，王文貴，廖黨金，魏 甬，李興玉，林 毅，葉健強(qiáng)

（四川省畜牧科學(xué)研究院，成都610066）

·簡(jiǎn)報(bào)·

川藏黑豬與長(zhǎng)白豬仔豬豬瘟母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律比較研究

于吉鋒，李江凌，王文貴，廖黨金，魏 甬，李興玉，林 毅，葉健強(qiáng)

為探索川藏黑豬和長(zhǎng)白豬的豬瘟免疫方法，本研究采用豬瘟阻斷ELISA對(duì)0、1、4、7、10、20、25、30、35日齡時(shí)川藏黑豬與長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體水平進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示，川藏黑豬仔豬和長(zhǎng)白豬仔豬出生后哺母乳前的豬瘟母源抗體均為0，哺母乳后d1，豬瘟母源抗體分別為＞210和28.2，合格率分別為100%和87%。4日齡和7日齡時(shí)，川藏黑豬仔豬的豬瘟母源抗體仍為≥210，合格率100%；長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體為28.4和27.4，合格率100%和83%；隨后川藏黑豬仔豬的豬瘟母源抗體呈下降趨勢(shì)，35日齡達(dá)到保護(hù)臨界值（24.0）；長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體下降更迅速，25日齡時(shí)其母源抗體水平已達(dá)臨界值（24.0）。檢測(cè)結(jié)果表明無(wú)論是母源抗體水平還是母源抗體持續(xù)時(shí)間，川藏黑豬與長(zhǎng)白豬仔豬之間有較大差異，川藏黑豬仔豬豬瘟疫苗的首免時(shí)間應(yīng)為35日齡，而長(zhǎng)白豬仔豬豬瘟疫苗的首免時(shí)間應(yīng)為25日齡。

豬瘟；母源抗體；消長(zhǎng)規(guī)律；川藏黑豬；長(zhǎng)白豬

（四川省畜牧科學(xué)研究院，成都610066）

豬瘟（classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的一種急性、烈性傳染病，屬我國(guó)一類動(dòng)物疫病，每年因此造成的損失達(dá)數(shù)十億計(jì)[1,2]，嚴(yán)重威脅我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。疫苗免疫接種是控制豬瘟最有效的方法之一，但其免疫抗體產(chǎn)生的水平，除了與疫苗本身有關(guān)，還與動(dòng)物種類、品種等因素相關(guān)[3,4]。新生仔豬的免疫器官尚未發(fā)育成熟，通過(guò)吸食初乳可獲得母源抗體，從而抵抗豬瘟病毒感染，但母源抗體對(duì)免疫疫苗會(huì)造成影響，初免過(guò)早會(huì)因母源抗體的中和作用造成免疫抗體水平低甚至免疫失敗，初免過(guò)晚會(huì)導(dǎo)致仔豬暴漏在豬瘟疫病的威脅之中[5,6]，因此確定最佳的首免日齡是預(yù)防仔豬感染豬瘟的關(guān)鍵。

不同品種豬的母源抗體在仔豬體內(nèi)持續(xù)時(shí)間有一定差異，杜喜等[7]確定金華豬仔豬在28日齡進(jìn)行豬瘟疫苗首免，李渤南等[8]研究證實(shí)煙臺(tái)黑豬和魯煙白豬仔豬的豬瘟母源抗體水平變化差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，現(xiàn)有長(zhǎng)白豬仔豬豬瘟首免日齡一般為21～25日齡。川藏黑豬（農(nóng)01新品種證字第23號(hào)）是四川省畜牧科學(xué)研究院歷經(jīng)多年培育而成的一個(gè)新品種，具有產(chǎn)仔數(shù)高，肉質(zhì)優(yōu)、抗逆性強(qiáng)、生產(chǎn)效率高等突出優(yōu)點(diǎn)。四川省是我國(guó)生豬養(yǎng)殖大省，長(zhǎng)白豬也是四川省飼養(yǎng)的主要品種之一，本研究比較這兩個(gè)品種仔豬豬瘟的母源抗體差異，為制定川藏黑豬與長(zhǎng)白豬的豬瘟免疫程序提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 分別選擇年齡、胎次、飼養(yǎng)狀況、環(huán)境條件相近且同一天分娩的5頭健康川藏黑豬母豬和5頭長(zhǎng)白豬母豬，以及所產(chǎn)仔豬各25頭，母豬產(chǎn)前豬瘟免疫抗體檢測(cè)合格，其仔豬21日齡斷乳。試驗(yàn)期間，參試豬均用該養(yǎng)豬場(chǎng)常規(guī)飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)。1.1.2 疫苗及主要試劑 豬瘟疫苗為脾淋巴苗，中牧實(shí)業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批文號(hào)：獸藥生字（2010）220051001；豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒（阻斷ELISA）購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。

1.2 方法

1.2.1 免疫方法 母豬在配種前2周免疫豬瘟脾淋疫苗4頭份。

1.2.2 采血及血清制備 分別在仔豬0、1、4、7、10、20、25、30、35日齡時(shí)，每只前腔靜脈采血2～3 mL，母豬耳源靜脈采血2～3 mL（長(zhǎng)白豬采集到25日齡時(shí)已達(dá)臨界值，后續(xù)未繼續(xù)采血檢測(cè)）。將血液置入已編號(hào)無(wú)菌試管內(nèi)，靜置自然凝集析出血清，或500×g離心5 min取其上清液即血清，對(duì)分離血清立刻進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)。

1.2.3 抗體檢測(cè) 按豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操進(jìn)行，將采集的血清進(jìn)行豬瘟抗體阻斷率檢測(cè)。

1.2.4 豬瘟抗體效價(jià)的換算 抗體阻斷率與抗體效價(jià)比較，參照該檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書（見(jiàn)表1）。

1.2.5 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 豬瘟抗體效價(jià)≥24判為抗體合格。

2 結(jié)果與討論

2.1 川藏黑豬母豬與長(zhǎng)白豬母豬豬瘟免疫抗體效價(jià)川藏黑豬母豬和長(zhǎng)白豬母的豬瘟免疫抗體水平分別在29.2～210和28.0～210，合格率均為100%（見(jiàn)表2），川藏黑豬母豬比長(zhǎng)白豬母豬的豬瘟免疫抗體水平高，尤其是10～35日齡時(shí)川藏黑豬母豬的豬瘟免疫抗體水平顯著高于長(zhǎng)白豬母豬的豬瘟免疫抗體水平，但兩者的免疫抗體水平均維持在較高水平并遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于保護(hù)臨界值（24.0）。

2.2 川藏黑豬仔豬與長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體兩個(gè)品種仔豬的豬瘟母源抗體水平和合格率見(jiàn)表3，其母源抗體變化見(jiàn)圖1。川藏黑豬仔豬和長(zhǎng)白豬仔豬出生后哺母乳前的豬瘟母源抗體均為0，哺母乳后d1的豬瘟母源抗體分別為＞210和28.2，合格率分別為100%和87%。4日齡和7日齡川藏黑豬仔豬的豬瘟母源抗體仍≥210，合格率100%，而長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體為28.4和27.4，合格率100%和83%?？梢?jiàn)，兩個(gè)不同品種仔豬雖然血緣差異較大，但通過(guò)吸食具有豬瘟高免疫抗體水平的母豬初乳，均可獲得較高水平的母源抗體水平，這在初生仔豬抵抗豬瘟病毒感染中具有重要作用。隨后，川藏黑豬仔豬的豬瘟母源抗體呈下降趨勢(shì)即，合格率也呈下降趨勢(shì)，35日齡達(dá)到保護(hù)臨界值（24.0）；長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體下降更迅速，25日齡時(shí)其母源抗體水平已達(dá)臨界值（24.0），保護(hù)率也為47%。

2.3豬瘟抗體效價(jià)在24以上時(shí)才能抵抗豬瘟強(qiáng)毒侵害，因此在仔豬母源抗體降低到保護(hù)的最低臨界值（抗體水平在24時(shí)）時(shí)進(jìn)行首免是合理的，仔豬通過(guò)吸食初乳獲得的母源抗體水平，無(wú)論是抗體水平還是持續(xù)時(shí)間，川藏黑豬和長(zhǎng)白豬之間差異明顯較大。川藏黑豬仔豬的豬瘟母源抗體水平較高并且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，35日齡時(shí)達(dá)保護(hù)臨界值，即豬瘟疫苗首免時(shí)間為35日齡；長(zhǎng)白豬仔豬的豬瘟母源抗體水平相對(duì)川藏黑豬仔豬水平較低，25日齡時(shí)其母源抗體水平達(dá)保護(hù)臨界值，即豬瘟疫苗首免時(shí)間為25日齡，這與其他研究結(jié)果基本一致[9]。兩個(gè)品種仔豬的母源抗體水平的差異可能與川藏黑豬帶有地方血源抵抗疫病能力較強(qiáng)有關(guān)，這一推測(cè)還需進(jìn)一步研究證實(shí)。

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DYNATICS OF MATERNAL ANTIBODIES AGAINST CLASSICAL SWINE FEVER IN NATIVE SICHUAN-TIBET BLACK PIGS AND LANDRACE PIGS

YU Ji-feng, LI Jiang-ling, WANG Wen-gui, LIAO Dang-jin, WEI Yong, LI Xing-yu, LIN Yi, YE Jian-qiang
(Sichuan Academy of Animal Husbandry Sciences, Chengdu 610066, China)

In order to better understand immunization protocol of classical swine fever in native Sichuan-Tibet black pigs and imported Landrace pigs, maternal antibodies of piglets were monitored at day 0, 1, 4, 7, 10, 20, 25, 30 and 35 by the blocking ELISA. There were no maternal antibodies detected in piglets born to Sichuan-Tibet black sows and Landrace sows before suckling. However, the maternal antibodies were titrated to be ＞210or 28.2in one-day old piglets born to Sichuan-Tibet black sows or Landrace sows, respectively. At day 4 and 7, the maternal antibody titers were ＞210in Sichuan-Tibet black piglets while the titers were 28.4and 27.4in Landrace piglets. Afterwards, the titers declined to 24.2in 35 days-old Sichuan-Tibet black piglets and to 24.0in Landrace piglets. Obviously, the maternal antibodies dropped faster in Landrace piglets than Sichuan-Tibet black piglets. In conclusion, signif cant differences in titers and duration of maternal antibodies were detected between Sichuan-Tibet black piglets and Landrace piglets. These results suggested that the f rst immunization could be administered to 35 days-old Sichuan-Tibet black piglets but to 25 days-old Landrace piglets.

Classical swine fever; maternal antibody; dynamics; Sichuan-Tibet black pigs; Landrace

S852.651

B

1674-6422（2015）03-0061-04

2015-01-26

國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系四川創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)（SCCXTD-004）；四川省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目（2013NC0016）；四川省公益性科研院所基本科研項(xiàng)目（SASA2012A02、SASA2013A04、SASA2013B04）

于吉鋒，男，碩士，助理研究員，主要從事動(dòng)物傳染病研究

廖黨金，E-mail: Liaodjm@126.com