張根葆，季　娜，周淑艷，桑金鳳，吳　娟(皖南醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，安徽蕪湖241002)

AHV-PI抑制家兔實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈血栓形成的機(jī)制研究*

張根葆△，季娜，周淑艷，桑金鳳，吳娟
(皖南醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，安徽蕪湖241002)

目的:探討皖南蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)對(duì)動(dòng)脈血栓形成的影響及其可能作用機(jī)制。方法:新西蘭兔32只，隨機(jī)分為空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、血栓模型和AHV-PI實(shí)驗(yàn)組;以70%FeCl3化學(xué)損傷法制備家兔頸總動(dòng)脈血栓模型，AHV-PI實(shí)驗(yàn)組經(jīng)耳緣靜脈注入AHV-PI(0. 1 mg/kg)，模型組給予等量生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照組以PI3K阻斷劑LY294002; 1 h后經(jīng)另側(cè)頸動(dòng)脈采血，測(cè)定凝血功能; ELISA法測(cè)定血漿纖溶酶、5-核苷酸酶(5-NT)和血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)的含量;流式細(xì)胞術(shù)觀測(cè)熒光標(biāo)識(shí)的單克隆抗體CD61(FITC-CD61)與血小板膜糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)結(jié)合率的變化; Western bloting測(cè)定血小板內(nèi)Akt蛋白激酶磷酸化程度。結(jié)果:與模型組相比，AHV-PI實(shí)驗(yàn)組和陽(yáng)性對(duì)照組頸動(dòng)脈內(nèi)膜比較平滑，管腔內(nèi)未見(jiàn)血栓形成，血小板數(shù)目和蛋白激酶Akt磷酸化水平均明顯下降(P＜0. 05)，部分凝血活酶時(shí)間(APTT)和凝血酶時(shí)間(TT)延長(zhǎng)(P＜0. 05)，血漿FIB、纖溶酶和GPIb含量下降(P＜0. 05)，5-NT含量升高(P＜0. 05) ; FITC-CD61與血小板GPIIb/IIIa的結(jié)合率沒(méi)有顯著改變。結(jié)論: AHV-PI可通過(guò)降低蛋白激酶Akt磷酸化水平，阻礙Akt通路下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，抑制血小板聚集和動(dòng)脈血栓形成。

安徽省教育廳自然科學(xué)研究基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No.KJ2011A266)

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