低氧上調(diào)大鼠PASMCs鈣激活性氯離子通道表達(dá)的ERK1/2通路機(jī)制*
2015-01-26 04:36:31黃林靜趙美平張聰聰鄭夢(mèng)曉王萬(wàn)鐵溫州醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室浙江溫州325035
中國(guó)病理生理雜志 2015年10期
黃林靜， 趙美平，張聰聰，鄭夢(mèng)曉，應(yīng) 磊，王萬(wàn)鐵(溫州醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室，浙江溫州325035)
低氧上調(diào)大鼠PASMCs鈣激活性氯離子通道表達(dá)的ERK1/2通路機(jī)制*
黃林靜，趙美平，張聰聰，鄭夢(mèng)曉，應(yīng)磊，王萬(wàn)鐵△
(溫州醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室，浙江溫州325035)
目的:探討鈣激活性氯離子通道2(calcium-activated chloride channel 2，CLCA2)在大鼠低氧性肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs)中mRNA和蛋白表達(dá)的變化及其與ERK1/2信號(hào)通路的關(guān)系。方法:取14只雄性SD大鼠，使用酶消化法進(jìn)行PASMCs原代培養(yǎng)，應(yīng)用小鼠抗大鼠SM α-actin免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法進(jìn)行細(xì)胞鑒定;經(jīng)培養(yǎng)鑒定PASMCs隨機(jī)分為常氧組(N組，n =6)、低氧組(H組，n =6)、DMSO對(duì)照組(D組，n =6)、U0126干預(yù)組(U組，n =6)和staurosporine aglycone干預(yù)組(SA組，n =6) ;采用免疫印跡法檢測(cè)CLCA2蛋白的表達(dá)，選用RT-PCR技術(shù)測(cè)定CLCA2 mRNA水平的表達(dá)。結(jié)果:與N組比較，H組PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達(dá)量均顯著上調(diào)(均P＜0. 01) ;與D組比較，U組CLCA2 mRNA和蛋白的表達(dá)均明顯上調(diào)(均P＜0. 01)，SA組mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)(P＜0. 01)，蛋白的表達(dá)輕微下調(diào)(但P＞0. 05)。結(jié)論:低氧可上調(diào)大鼠PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達(dá); ERK1/2通路抑制劑U0126能上調(diào)PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達(dá); ERK1/2通路激活劑staurosporine aglycone可下調(diào)PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表達(dá)。
浙江省溫州市對(duì)外科技合作項(xiàng)目(No.HZ0090066)
△Tel: 0577-86689817; E-mail: wwt@wmu.edu.cn
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