崔 波， 郭夫江， 李醫(yī)明

（上海中醫(yī)藥大學中藥學院，上海201203）

毛白前根莖化學成分的研究

崔 波， 郭夫江*， 李醫(yī)明*

（上海中醫(yī)藥大學中藥學院，上海201203）

目的 研究毛白前Cynanchum mooreanum Hemsl.根莖的化學成分。方法 采用硅膠、ODS、Sephadex LH-20以及RP-HPLC等柱色譜方法對毛白前根莖乙醇提取物進行分離純化，并利用MS、NMR等波譜方法鑒定所得化合物的結構。結果 從中分離得到10個化合物，分別鑒定為cynapanoside A（1）、cynatratoside C（2）、hirundoside A（3）、松脂素（4）、（3S，6S）-6，7-二羥基-6，7-二氫芳樟醇（5）、（3S，6R）-6，7-二羥基-6，7-二氫芳樟醇（6）、α-L-夾竹桃吡喃糖基-（1→4）-α-L-夾竹桃糖（7）、（9S，10E，12S，13S）-9，12，13-三羥基-10-烯-十八碳烯酸甲酯（8）、β-谷甾醇（9）、對羥基苯乙酮（10）。結論 所有化合物均為首次從該植物中分離得到。

毛白前；根莖；乙醇提取物；化學成分

毛白前為蘿藦科鵝絨藤植物毛白前Cynanchum mooreanum Hemsl.的根莖，又名龍膽白前（江蘇）、老君須 （廣東），生長于海拔200～700 m的山坡、灌木叢及溪邊，浙江、江蘇、江西、湖南、湖北、安徽、福建、河南、廣東等地區(qū)均有分布。該植物全株外用可洗疥瘡，根莖能清熱解表、行氣健脾、活血通經，治療感冒、中暑、疳積及月經不調等［1］。近年來，從柳葉白前、徐長卿、白首烏、青陽參等同屬植物中分離得到C21甾體苷、生物堿、黃酮、萜類、苯衍生物等成分［2-3］，藥理研究表明C21甾體苷、生物堿具有抗腫瘤、免疫調節(jié)、抗癲癇等活性［4-7］。然而，國內外對毛白前根莖化學成分的研究尚屬空白，該植物根系發(fā)達，產量頗豐，為進一步明確其藥效物質基礎，合理開發(fā)利用這一藥材資源，本實驗對毛白前根莖醇提物的化學成分進行研究，結果從中分離鑒定出10個化合物，均為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker Avance 400、600型核磁共振儀，TMS內標（德國Bruker公司）；Finnigan LCQ DECA XP型離子阱液質聯(lián)用儀（美國Thermo公司）；Agilent1200色譜柱（美國Agilent公司）；月旭ultimate XB-C18分析柱（4.6 mm×250 mm，5μm）、半制備柱 （10 mm×250 mm，5μm）（月旭科技上海股份有限公司）；Sephadex LH-20凝膠柱（美國GE Healthcare公司）。GF 254薄層色譜硅膠（煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）；柱層析硅膠 （100～200、200～300、300～400目，青島海洋化工有限公司）；ODS-A反相硅膠（50μm，日本YMC公司）。柱色譜用試劑均為分析純 （國藥集團化學試劑有限公司）；HPLC用試劑均為色譜純（德國默克公司）。

毛白前于2011年4～5月采自浙江江山，經上海中醫(yī)藥大學生藥教研室孟千萬博士鑒定為蘿藦科植物毛白前Cynanchum mooreanum Hemsl.，標本保存于上海中醫(yī)藥大學生藥教研室。

2 提取與分離

取毛白前干燥根莖9.0 kg，90%乙醇滲漉提取，回收乙醇，濃縮，得稠浸膏960 g，混懸于適量水中，分別以石油醚、三氯甲烷、正丁醇依次萃取，回收溶劑，得石油醚萃取物90 g、三氯甲烷萃取物300 g、正丁醇萃取物40 g。對三氯甲烷萃取物進行硅膠柱色譜分離，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（10∶1→0∶1，V/V）以及乙酸乙酯-甲醇（1∶0→1∶1，V/V）梯度洗脫，得到8個流份（Fr.1～Fr.8）。其中，F(xiàn)r.3（30 g）以硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（100∶1→10∶1，V/V）梯度洗脫，得到化合物9（30 mg）、10（910 mg）；Fr.5（6.0 g）經硅膠柱反復層析，Sephadex LH-20凝膠柱純化后再以半制備RP-HPLC柱分離（乙腈-水58∶42，V/V），得到化合物1（16 mg）、2（12 mg）、3（4 mg）；Fr.7（45 g）以硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（100∶1→5∶1，V/V）梯度洗脫，得到5個流份（Fr.7.1～Fr.7.5）。其中，F(xiàn)r.7.2經HPLC柱分離（乙腈-水45∶55，V/V），得到化合物4（15 mg）；Fr.7.3經HPLC柱分離（乙腈-水35∶65，V/V），得到化合物8（8 mg）；Fr.7.5經ODS反相硅膠柱層析以及HPLC柱分離（乙腈-水8∶92，V/V），得到化合物5（7 mg）、6（7 mg）、7（15 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：白色無定形粉末，Libermann-Burchard反應呈陽性，ESI-MS m/z：543［M+Na］+，

519［M-H］-，分子式C28H40O9。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：0.89（3H，s，19-CH3），0.98（1H，td，J=13.5，4.0 Hz，Hα-1），1.52（3H，s，21-CH3），1.59（3H，d，J=6.0 Hz，6′-CH3），2.38（1H，t，J=12.0 Hz，Hα-4），2.50（1H，ddd，J=13.6，4.4，2.0 Hz，Hα-2′），2.82（1H，t，J=10.0 Hz，H-9），3.46（3H，s，3′-OCH3），3.86（1H，m，H-3），3.92（1H，t，J=8.0 Hz，Hα-15），4.12（1H，t，J=8.0 Hz，Hβ-15），4.88（1H，dd，J=9.6，1.6 Hz，H-1′），5.09（1H，brd，J=3.6 Hz，H-7），5.44（1H，q，J=7.6 Hz，H-16），5.81（1H，s，H-6），6.47（1H，s，H-18）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：36.3（C-1），30.1（C-2），77.3（C-3），38.8（C-4），141.4（C-5），127.4（C-6），67.9（C-7），51.3（C-8），50.7（C-9），38.8（C-10），23.7（C-11），30.2（C-12），114.4（C-13），174.9（C-14），67.8（C-15），75.8（C-16），56.3（C-17），144.0（C-18），17.8（C-19），118.6（C-20），24.8（C-21），98.3（C-1′），37.5（C-2′），81.6（C-3′），76.4（C-4′），72.9（C-5′），18.8（C-6′），56.3（3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［8］基本一致，鑒定該化合物為cynapanoside A。

化合物2：白色無定形粉末，Libermann-Burchard反應呈陽性，ESI-MS m/z：801［M+Na］+，分子式C41H62O14。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：0.92（3 H，s，19-CH3），1.26～1.29（9H，brd，J=6.0 Hz，6′，6″，6?-CH3），1.54（3H，s，21-CH3），3.41（6H，s，3′，3″-OCH3），3.69（1H，m，H-3），3.84（1H，d，J=9.6 Hz，Hβ-15），4.11（1 H，q，J=2.8 Hz，H-3″），4.16（1H，dd，J=9.6，7.2 Hz，Hα-15），4.54（1H，dd，J= 10.2 Hz，H-1′），5.03（2H，brd，J=4.4 Hz，H-1″，1?），5.30（1H，q，J=8.0 Hz，H-16），5.39（1H，d，J=5.4 Hz，H-6），6.25（1H，brs，H-18）。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：37.1（C-1），30.1（C-2），77.9（C-3），39.1（C-4），140.7（C-5），120.8（C-6），30.0（C-7），40.9（C-8），53.4（C-9），39.1（C-10），24.1（C-11），28.5（C-12），114.4（C-13），175.6（C-14），68.4（C-15），75.6（C-16），56.2（C-17），143.8（C-18），18.4（C-19），118.6（C-20），25.1（C-21），98.4（C-1′），38.0（C-2′），79.7（C-3′），83.2（C-4′），71.7（C-5′），18.9（C-6′），57.1（3′-OCH3），99.1（C-1″），39.1（C-2″），69.2（C-3″），81.6（C-4″），68.1（C-5″），18.5（C-6″），100.1（C-1?），34.6（C-2?），78.5（C-3?），76.3（C-4?），68.8（C-5?），18.7（C-6?），57.1（3?-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［9］基本一致，鑒定該化合物為cynatratoside C。

化合物3：白色無定形粉末，Libermann-Burchard反應呈陽性，ESI-MS m/z：511［M+Na］+，分子式為C28H40O7。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：0.78（3H，s，H-19），1.14（1 H，td，J=13.6，3.6 Hz，Hα-1），1.43（1H，td，J=12.8，3.2 Hz，H-12a），1.56（3H，s，H-21），1.59（3H，d，J=6.0 Hz，H-6′），1.94（1H，dt，J=12.8，3.2 Hz，H-12b），2.34（1H，td，J=12.8，2.0 Hz，H-4a），2.50（1H，ddd，J=12.8，4.4，2.0 Hz，H-2′），2.65（1H，ddd，J=12.8，4.4，2.0 Hz，H-4b），2.73（1H，brd，J=20.8 Hz，H-7a），2.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-17），3.17（1H，dt，J=20.8，4.0 Hz，H-7b），3.46（3H，s，3′-OCH3），3.51（2H，m，H-4′），3.61（1H，m，H-5′），3.78（1H，dd，J=10.8，4.0 Hz，Hβ-15），3.85（1H，m，H-3），4.02（1H，d，J=8.4 Hz，H-18a），4.09（1H，brd，J=8.4 Hz，H-18b），4.25（1H，d，J=10.8 Hz，Hα-15），4.76（1H，dd，J=8.0，4.0 Hz，H-16），4.87（1H，dd，J=10.0，2.0 Hz，H-1′），5.40（1H，brs，H-6）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：36.4（C-1），30.4（C-2），76.8（C-3），39.0（C-4），141.2（C-5），120.4（C-6），25.9（C-7），104.4（C-8），45.0（C-9），38.0（C-10），20.2（C-11），31.9（C-12），53.8（C-13），152.8（C-14），72.4（C-15），84.3（C-16），63.6（C-17），76.7（C-18），18.8（C-19），118.3（C-20），22.6（C-21），98.1（C-1′），37.5（C-2′），81.7（C-3′），76.4（C-4′），72.9（C-5′），18.8（C-6′），57.0（3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［10］基本一致，鑒定該化合物為hirundoside A。

化合物4：白色無定形粉末，10%硫酸乙醇顯棕色，ESI-MS m/z：359［M+H］+，717［2M+ H］+，分子式為C20H22O6。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：2.35（2H，m，H-9，9′），3.63，3.72（4H，dd，J=11.2，4.0 Hz，H-8，8′），3.90（6H，s，10，10′-OCH3），4.95（2H，d，J=8.4 Hz，H-7，7′），6.81（2H，d，J=8.0 Hz，3，3′-

CH），6.90（2H，dd，J=8.0，1.6 Hz，4，4′-CH），7.05（1H，d，J=1.6 Hz，H-6，6′）。13CNMR（100 MHz，CD3OD）δ：55.4（C-9，9′），56.4（C-10，10′），61.8（C-8，8′），84.4（C-7，7′），111.2（C-6，6′），116.0（C-3，3′），120.5（C-4，4′），134.9（C-5，5′），147.4（C-2，2′），149.1（C-1，1′）。以上數(shù)據(jù)與與文獻 ［11］基本一致，鑒定該化合物為松脂素。

化合物5和6：兩者為同分異構體，白色無定形粉末，10%硫酸乙醇顯灰綠色，ESI-MS m/z：211［M+Na］+，187［M-H］-。其中，化合物5的1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：1.45～1.48（9H，s，8，9，10-CH3），3.75（1H，dd，J= 9.0，2.0 Hz，H-6），5.12（1H，dd，J=11.0，2.0 Hz，Hα-1），5.56（1H，dd，J=17.2，2.0 Hz，Hβ-1），6.18（1H，dd，J=17.2，10.8 Hz，H-2）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：111.3（C-1），147.6（C-2），72.7（C-3），41.3（C-4），27.0（C-5），79.9（C-6），72.9（C-7），26.0（C-8），26.2（C-9），28.8（C-10）。以上數(shù)據(jù)與文獻［12］基本一致，鑒定該化合物為 （3S，6S）-6，7-二羥基-6，7-二氫芳樟醇?；衔?的氫譜及碳譜數(shù)據(jù)與5相比，僅在化學位移上有細微差異，1HNMR（400 MHz，C5D5N）δ：1.45～1.48（9H，s，8，9，10-CH3），3.73（1H，dd，J=9.0，2.0 Hz，H-6），5.09（1 H，dd，J=2.0，11.0 Hz，Hα-1），5.53（1H，dd，J=17.2，2.0 Hz，Hβ-1），6.18（1H，dd，J=17.2，10.8 Hz，H-2）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：111.2（C-1），147.5（C-2），72.7（C-3），41.3（C-4），27.1（C-5），79.7（C-6），72.9（C-7），26.0（C-8），26.2（C-9），28.9（C-10）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［12］基本一致，鑒定該化合物為（3S，6R）-6，7-二羥基-6，7-二氫芳樟醇。

化合物7：白色無定形粉末，10%硫酸乙醇顯藍黑色，ESI-MS m/z：329［M+Na］+，365［M+ Ac］-，分子式為C14H26O7。1H-NMR（400 MHz，C5D5N）δ：1.36（3H，d，J=6.4 Hz，H-6），1.55（3H，d，J=6.0 Hz，H-6′），1.73（1H，td，J=12.8，4.0 Hz，H-2a），1.91（1H，dt，J= 14.4，3.6 Hz，H-2′a），2.16（1H，ddd，J= 14.4，3.6，1.2 Hz，H-2′b），2.47（1 H，dd，J= 12.8，4.8 Hz，H-2 b），3.26（3H，s，3-OCH3），3.39（3H，s，3′-OCH3），3.42（1H，dd，J= 9.2，3.0 Hz，H-4′），3.55（1H，t，J=9.2 Hz，H-4），3.93（1H，m，H-3），4.31（1H，m，H-5），4.40（1H，q，J=3.2 Hz，H-3′），4.54（1H，m，H-5′），4.73（1H，brd，J=3.2 Hz，H-1），5.20（1H，d，J=3.2 Hz，H-1′）。13C-NMR（100 MHz，C5D5N）δ：19.4（C-6′），19.8（C-6），37.3（C-2），37.8（C-2′），56.1（3-OCH3），58.4（3′-OCH3），64.0（C-5），68.6（C-5′），70.6（C-3），78.4（C-3′），80.4（C-4′），83.4（C-4），99.8（C-1），101.5（C-1′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［13］基本一致，鑒定該化合物為α-L-夾竹桃吡喃糖基-（1→4）-α-L-夾竹桃糖。

化合物8：白色粉末，ESI-MS m/z：362［M+ NH4］+，403［M+Ac］-，分子式為C19H36O5。1HNMR（600 MHz，CDCl3）δ：0.89（3H，t，J=6.6 Hz，H-18），1.26～1.56（18H，m，H-4～8，14，15，16，17），1.58～1.64（2 H，m，H-3），2.30（2H，t，J=7.8 Hz，H-2），3.46（1H，m，Hα-13），3.66（3H，s，-OCH3），3.93（1H，t，J= 6.0 Hz，Hα-12），4.11（1H，q，J=6.0 Hz，Hβ-9），5.66（1H，dd，J=6.0，15.6 Hz，H-11），5.78（1 H，dd，J=6.0，15.6 Hz，H-10）。13CNMR（150 MHz，CDCl3）δ：14.2（C-18），22.8（C-17），25.1（C-3），25.4（C-7），25.5（C-15），29.2（C-4），29.3（C-5），29.4（C-6），32.1（C-16），33.2（C-14），34.3（C-2），37.4（C-8），51.7（-OCH3），72.3（C-9），74.9（C-13），75.5（C-12），130.0（C-11），136.4（C-10），174.6（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［14］基本一致，鑒定該化合物為 （9S，10E，12S，13S）-9，12，13-三羥基-10-烯-十八碳烯酸甲酯。

化合物9：白色針晶，mp 140～143℃，不溶于甲醇，易溶于三氯甲烷，10%硫酸-乙醇顯粉紅色，Libermann-Burchard反應呈陽性。13C-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：37.2（C-1），26.1（C-2），71.8（C-3），42.3（C-4），140.8（C-5），121.7（C-6），33.9（C-7），31.9（C-8），50.1（C-9），36.5（C-10），21.1（C-11），39.8（C-12），42.3（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），29.1（C-16），56.0（C-17），19.4（C-18），11.8（C-19），36.2（C-20），18.8（C-21），31.9（C-22），28.3（C-23），45.8（C-24），31.7（C-25），12.0（C-26），19.8（C-27），23.1（C-28），19.0（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［15］基本一致，而且Rf值與β-

谷甾醇對照品相當，混合后熔點不下降，因此鑒定該化合物為β-谷甾醇。

化合物10：無色針晶，mp 108～110℃，ESIMS m/z：137［M+H］+，135［M-H］-。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.72（3H，s，-CH3），7.06（2H，d，J=8.7 Hz，H-2，6），8.03（2H，d，J=8.7 Hz，H-3，5），8.34（1H，brs，-OH），Rf值與對羥基苯乙酮對照品相當，混合后熔點不下降，因此鑒定該化合物為對羥基苯乙酮。

致謝：感謝上海中醫(yī)大學學科建設E-研究院項目支持。

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Chem ical constituents from the rhizom es of Cynanchum mooreanum Hemsl.

CUIBo， GUO Fu-jiang*， LIYi-ming*

（School of Pharmacy，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai2O12O3，China）

AIM To study the chemical constituents from the rhizomes of Cynanchum mooreanum Hemsl. M ETHODS Silica gel，ODS，Sephadex LH-20 and RP-HPLC columns were used in the separation and purification of the rhizomesof C.mooreanum ethanol extract，and the structures of isolated compoundswere then identified by MS and NMR.RESULTS Ten compounds were isolated and identified as cynapanoside A（1），cynatratoside C（2），hirundoside A（3），pinoresinol（4），（3S，6S）-6，7-dihydroxy-6，7-dihydrolinalool（5），（3S，6R）-6，7-dihydroxy-6，7-dihydrolinalool（6），α-L-oleandropyranosyl-（1→4）-α-L-oleandropyranose（7），methyl（9S，10E，12S，13S）-9，12，13-trihydroxy-10-octadecenoate（8），β-sitosterol（9），p-hydroxyacetophenone（10）.CONCLUSION All compounds are isolated from this plant for the first time.

Cynanchum mooreanum Hemsl.；rhizomes；ethanol extract；chemical constituents

R284.1

A

1001-1528（2015）12-2677-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.023

2014-10-10

崔 波（1981—），男，講師，研究方向為中藥化學。Tel：（021）51322184，E-mail：cuibo-81@163.com

*通信作者：郭夫江 （1972—），男，副教授，碩士生導師，研究方向為中藥化學。Tel：（021）51322181，E-mail：guofj1972@hotmail.com李醫(yī)明（1966—），男，教授，博士生導師，研究方向為中藥化學。Tel：（021）51322191，E-mail：ymlius@163.com