林 超，劉兆國(guó)，錢 星，姚 遠(yuǎn)，徐 斌，卞慧敏,2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，2.江蘇省中藥藥效與安全性評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇省優(yōu)勢(shì)學(xué)科,江蘇 南京 210023)

丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進(jìn)展

林 超1，劉兆國(guó)1，錢 星1，姚 遠(yuǎn)1，徐 斌1，卞慧敏1,2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，2.江蘇省中藥藥效與安全性評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇省優(yōu)勢(shì)學(xué)科,江蘇 南京 210023)

心血管疾病嚴(yán)重威脅人類的健康和生活質(zhì)量，目前已成為導(dǎo)致人類死亡的頭號(hào)殺手。因此，尋找有效的治療藥物以降低該病的致死率和致殘率成為亟待解決的問(wèn)題。丹參因其具有較好的活血化瘀功效，目前已被廣泛的用于心血管疾病的治療且取得較好的療效。丹酚酸B是丹參提取物中的主要水溶性成分之一，研究證實(shí)丹酚酸B具有多種藥理活性，不僅對(duì)心肌梗死(myocardial infarction, MI)具有很好的保護(hù)作用，同時(shí)也能夠明顯的改善心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia-reperfusion, MI/R)的損傷。該文就近年來(lái)丹酚酸B在心血管疾病中的藥理研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，闡述丹酚酸B調(diào)控心血管疾病的藥理作用機(jī)制及其與心血管疾病治療的關(guān)系，為丹酚酸B的臨床應(yīng)用及后續(xù)研究提供參考。

丹酚酸B；心肌梗塞；缺血/再灌注；心肌細(xì)胞肥大；分子機(jī)制；治療策略

心血管疾病是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病，該病具有“發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高”等特點(diǎn)[1]，目前已成為導(dǎo)致人類死亡的頭號(hào)病因。因此，尋找能夠有效治療心血管病的藥物成為了臨床面臨的首要問(wèn)題。傳統(tǒng)的活血化瘀中藥丹參，因其具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)的功效[2-3]，目前已被廣泛用于心血管疾病的治療。研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸(salvianolic acids)是丹參(拉丁學(xué)名：salviamiltiorrhizabunge)中含量最豐富的水溶性物質(zhì)，而丹酚酸B則是丹酚酸中含量最多、生物活性最強(qiáng)的化合物[4]。研究表明，丹酚酸不僅對(duì)心肌缺血/再灌注損傷具有保護(hù)作用[5-6]，同時(shí)對(duì)心肌梗死[7-8]及心肌細(xì)胞肥大[9]均有保護(hù)作用。本文就近年來(lái)丹酚酸B在心血管疾病中的藥理研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，重點(diǎn)探討丹酚酸B介導(dǎo)調(diào)控心血管疾病的藥理作用機(jī)制及其與心血管疾病治療的關(guān)系，為丹酚酸B的臨床應(yīng)用及后續(xù)研究提供參考。

1 丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進(jìn)展

1.1 丹酚酸B對(duì)心肌梗死的保護(hù)作用He等[10]采用冠狀動(dòng)脈結(jié)扎方法構(gòu)建大鼠心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型，考察丹酚酸B對(duì)MI的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，丹酚酸B能夠?qū)I發(fā)揮明顯的心臟保護(hù)作用。機(jī)制研究表明，丹酚酸B主要通過(guò)抑制瘦素和內(nèi)皮素-活性氧簇(endothelin-reactive oxygen species, ET-ROS)的上調(diào)以及恢復(fù)心肌中心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)鈣ATP酶2a(sarco/endoplasmic reticulum ATPase 2a, SERCA2a)和受磷蛋白的正常表達(dá)，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)心臟的作用。

1.2 丹酚酸B對(duì)MI/R損傷的保護(hù)作用MI/R時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量自由基，使得細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，膜流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致電生理活動(dòng)異常，誘發(fā)和促進(jìn)心律失常的產(chǎn)生。由于心肌細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，致使心肌缺血區(qū)的過(guò)氧化產(chǎn)物如丙二醛(malondialdehyde, MDA) 含量增多；冠脈流出液中乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase, LDH)和肌酸磷酸激酶(creatine phosphokinase, CPK) 升高以及心肌組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD) 減少[11]。研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠明顯提高M(jìn)I/R損傷大鼠心肌組織中的SOD活力，可有效對(duì)抗氧自由基引起的毒害作用，從而減輕心肌細(xì)胞的損傷。Xue等[12]通過(guò)構(gòu)建大鼠MI/R模型考察丹酚酸B對(duì)MI/R損傷的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，給予丹酚酸B能夠明顯增加血漿中肌鈣蛋白(troponins, CTn)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB, CK-MB)的含量，同時(shí)明顯降低血漿中一氧化氮(nitric oxide, NO)和總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)的水平，表明丹酚酸B對(duì)大鼠MI/R損傷有明顯的保護(hù)作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠緩解氧化應(yīng)激、減少鈣超載以及改善內(nèi)皮功能。Yang等[13]考察了兔MI/R過(guò)程中丹酚酸B對(duì)血小板活化和血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響，發(fā)現(xiàn)缺血/再灌注過(guò)程中，內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)，同時(shí)血小板被活化；給予丹酚酸B后可保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞免受MI/R損傷，同時(shí)丹酚酸B也能夠抑制MI/R引起的血小板活化。

1.3 丹酚酸B具有抑制心肌細(xì)胞肥大的作用Liu等[9]考察丹酚酸B對(duì)血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AngⅡ)誘導(dǎo)的新生大鼠心肌細(xì)胞肥大的影響，結(jié)果表明，丹酚酸B能夠抑制AngⅡ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞的肥大，同時(shí)發(fā)現(xiàn)心鈉素和腦鈉素mRNA表達(dá)下降及細(xì)胞表面積減少。機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase-1, PARP-1]的活性；同時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)PARP-1能夠減弱丹酚酸B抗心肌細(xì)胞肥大的效應(yīng)，這些研究表明丹酚酸B具有很好的抑制心肌細(xì)胞肥大的作用。

1.4 丹酚酸B能夠抑制動(dòng)脈粥樣硬化的形成Lee等[14]通過(guò)實(shí)驗(yàn)考察了丹酚酸B對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的作用，結(jié)果表明用丹酚酸B處理血管平滑肌細(xì)胞可有效抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子(platelet-derived growth factor, PDGF)誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖和遷移，同時(shí)可明顯增加血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表達(dá)；與此同時(shí)，丹酚酸可明顯減少活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的產(chǎn)生及降低煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸/還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP/NADPH)的比率。用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠明顯誘導(dǎo)HO-1的產(chǎn)生，同時(shí)有效的抑制腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor, TNF-α)誘導(dǎo)的nuclear factor-κB (NF-κB)的激活；而采用siRNA抑制HO-1的表達(dá)可消除丹酚酸對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，同時(shí)阻斷了HO-1缺失細(xì)胞的增殖、遷移和炎癥。進(jìn)一步的機(jī)制研究表明，丹酚酸B是通過(guò)活化核因子E2相關(guān)因子(nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2)，進(jìn)而誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)，從而抑制血管細(xì)胞的增殖、遷移和炎癥，進(jìn)而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。

1.5 丹酚酸B能夠有效降低門靜脈高壓Tian等[15]采用內(nèi)皮素1(endothelin-1, ET-1)誘導(dǎo)小鼠門靜脈高血壓，考察丹酚酸B對(duì)門脈高壓小鼠肝臟內(nèi)血液微循環(huán)的影響，結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，丹酚酸B能夠明顯降低門脈高壓小鼠肝臟內(nèi)的平均血流和微循環(huán)流速，進(jìn)而發(fā)揮降低門脈高壓的作用。Zhao等[16]研究表明，丹酚酸B能夠降低大鼠的門靜脈高壓，并且研究發(fā)現(xiàn)丹酚酸B主要是借助大鼠肝臟內(nèi)的巨噬細(xì)胞而發(fā)揮作用。

2 丹酚酸B調(diào)控心血管效應(yīng)的機(jī)制

2.1 Akt-eNOS信號(hào)介導(dǎo)丹酚酸B對(duì)MI/R損傷的保護(hù)作用研究發(fā)現(xiàn)，Akt-eNOS是再灌注損傷補(bǔ)救酶(reperfusion injury salvage kinase, RISK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的組成之一，通過(guò)影響下游相關(guān)蛋白的表達(dá)，進(jìn)而對(duì)心臟產(chǎn)生保護(hù)作用。在這一通路中，Akt處在中心環(huán)節(jié)，也是最主要的靶酶，只有磷酸化的Akt才能發(fā)揮一系列的生物 活性[17]。周丹等[18]通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈制備大鼠MI/R損傷模型，考察丹酚酸B對(duì)MI/R損傷大鼠的保護(hù)作用，研究表明，丹酚酸B可增加Akt的磷酸化水平進(jìn)而導(dǎo)致其活化，活化的Akt進(jìn)一步激活其下游靶標(biāo)eNOS使其磷酸化，進(jìn)而通過(guò)下游一系列的生物效應(yīng)發(fā)揮對(duì)MI/R損傷的保護(hù)作用。

2.2 TLR4-NFκB-TNF-α炎癥通路介導(dǎo)丹酚酸B保護(hù)心肌細(xì)胞損傷Wang等通過(guò)用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞炎癥損傷，并探討丹酚酸B對(duì)心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給予LPS后該組的乳酸脫氫酶和腫瘤壞死因子-α的濃度明顯高于其他組，表明造模成功；而給予丹酚酸B處理后，LDH和TNF-α的濃度明顯下降。與此同時(shí)，免疫組化結(jié)果顯示，給予LPS后，Toll樣受體4(toll-like receptors,TLR4)和NF-κB的表達(dá)明顯升高；而給予丹酚酸B后，TLR4和NF-κB的表達(dá)明顯下降[19]。說(shuō)明在用LPS誘導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞損傷的早期階段，TLR4-NF-κB-TNF-α通路被迅速激活，而丹酚酸B發(fā)揮保護(hù)心肌細(xì)胞損傷的作用，很可能是通過(guò)抑制該通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

2.3 自噬介導(dǎo)丹酚酸B保護(hù)心肌細(xì)胞損傷Han等[20]通過(guò)實(shí)驗(yàn)考察自噬對(duì)饑餓心肌細(xì)胞的影響，同時(shí)觀察丹酚酸B對(duì)饑餓心肌細(xì)胞中自噬的效應(yīng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，心肌細(xì)胞饑餓3 h后會(huì)誘發(fā)自噬，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞損傷，并且發(fā)現(xiàn)饑餓細(xì)胞中的LC3-Ⅱ的表達(dá)呈現(xiàn)時(shí)間依賴性的增加；而給予丹酚酸B后，能夠明顯抑制 LC3-Ⅱ的增加，同時(shí)細(xì)胞活力及心肌細(xì)胞中ATP的水平也明顯增加。該研究表明丹酚酸B能夠通過(guò)阻斷過(guò)度自噬，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)作用。

2.4 線粒體凋亡途徑介導(dǎo)丹酚酸B抑制心肌梗死后心肌細(xì)胞的凋亡張萌等[21]通過(guò)結(jié)扎冠脈左前降支構(gòu)建大鼠心肌梗死模型，進(jìn)而考察丹酚酸B對(duì)心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明，丹酚酸B可以明顯降低心肌細(xì)胞的凋亡率。作者進(jìn)一步考察丹酚酸B對(duì)凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹酚酸B可以明顯降低Bax的表達(dá)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)丹酚酸B也明顯降低了STAT-3及IL-6的表達(dá)。這表明線粒體凋亡途徑參與調(diào)控了丹酚酸B 抑制心肌梗死后心肌細(xì)胞的凋亡。

3 針對(duì)現(xiàn)有研究臨床開(kāi)展丹酚酸B治療心血管疾病的策略

大量研究已表明，丹酚酸B能夠?qū)Πㄐ募」Ｋ?、心肌缺?再灌注在內(nèi)的多種心血管疾病發(fā)揮保護(hù)作用，但我們不難發(fā)現(xiàn)這些研究主要限于動(dòng)物體內(nèi)研究，其在臨床的研究非常少，究其原因，一是因?yàn)榈し铀酈治療心血管疾病的作用機(jī)制仍然沒(méi)有闡釋清楚；二是因?yàn)樾难鼙旧硪彩且粋€(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，丹酚酸B在這一調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中究竟扮演怎樣的角色仍需努力探索。那么，臨床該如何開(kāi)展丹酚酸B治療心血管疾病的研究呢？我認(rèn)為應(yīng)該從以下三點(diǎn)入手：(1) 首先對(duì)市面上含丹酚酸B為的制劑進(jìn)行臨床效應(yīng)篩選，找到對(duì)大部分心血管疾病患者有效的制劑類型。目前臨床上應(yīng)用的含丹酚酸B的制劑類型主要包括丹參凍干粉、丹酚酸膠囊及含丹酚酸B 的注射液。丹參凍干粉的優(yōu)點(diǎn)主要是外部環(huán)境如光照、溫度及臨床稀釋液對(duì)其所含丹酚酸B的穩(wěn)定性無(wú)明顯影響，有效期相對(duì)其他劑型明顯延長(zhǎng)；缺點(diǎn)是臨床應(yīng)用中無(wú)法準(zhǔn)確的對(duì)丹酚酸B進(jìn)行定量。丹酚酸膠囊的優(yōu)點(diǎn)主要是便于吞服及掩蓋藥物的不適味道；缺點(diǎn)是生物利用度低，遇高溫、熱容易分解。丹酚酸B的注射液的優(yōu)點(diǎn)主要是藥物直接進(jìn)入血液，可使血液藥物濃度迅速到達(dá)峰值，發(fā)揮作用迅速；缺點(diǎn)是臨床使用中其安全性及機(jī)體適應(yīng)性差，易給患者帶來(lái)危害。(2) 在確保含丹酚酸B制劑的劑型得到正確應(yīng)用的同時(shí)，對(duì)使用含丹酚酸B制劑治療心血管疾病的患者進(jìn)行后續(xù)跟蹤，對(duì)其治療效果進(jìn)行跟蹤記錄，并構(gòu)建相關(guān)評(píng)價(jià)體系，如患者使用該藥物后疾病是否得到有效緩解以及患者長(zhǎng)期用藥后有無(wú)明顯不良反應(yīng)等，從而對(duì)其效果進(jìn)行客觀評(píng)價(jià)；(3) 優(yōu)化上述得到的效果評(píng)價(jià)，如發(fā)現(xiàn)患者有不良反應(yīng)后及時(shí)調(diào)整藥物的用量及用藥次數(shù)，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步開(kāi)展丹酚酸B在臨床心血管疾病治療中的應(yīng)用，以期獲得最佳治療效果。

4 小結(jié)

大量研究已證實(shí)丹酚酸B對(duì)多種心血管疾病如心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化及心肌缺血/再灌注損傷具有保護(hù)作用。近些年來(lái)關(guān)于丹酚酸B調(diào)控心血管疾病的相關(guān)作用機(jī)制也不斷被揭示，這為丹酚酸B在臨床的推廣應(yīng)用提供了很多理論依據(jù)。但我們同時(shí)也看到有關(guān)丹酚酸B作用機(jī)制的研究并不深入，機(jī)理仍然不清，如Akt-eNOS信號(hào)通路是通過(guò)何種機(jī)制被激活，以及該通路活化后如何發(fā)揮心肌保護(hù)作用還有待進(jìn)一步研究等等。相信隨著臨床研究的全面開(kāi)展，有關(guān)丹酚酸B在心血管疾病中應(yīng)用的研究必將產(chǎn)生更多、更深入的研究成果。

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Research progress of salvianolic acid B in cardiovascular diseases

LIN Chao1, LIU Zhao-guo1, QIAN Xing1, YAO Yuan1,XU Bin1,BIAN Hui-min1,2

(1.CollegeofPharmacy,NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210046,China; 2.JiangsuKeyLaboratoryforPharmacologyandSafetyEvaluationofChineseMateriaMedicine,Nanjing210023,China)

Cardiovascular disease is a serious threat to human health and quality of life, and it has become the leading cause of death in human. Thus, looking for effective drugs to reduce the mortality and morbidity of such a disease has become a problem to be solved. Due to its good efficacy of activating blood circulation and dissipating blood stasis, salvia miltiorrhiza has been widely used in the treatment of cardiovascular disease and obtained a good curative effect. Salvianolic acid B is one of the main water-soluble components of salvia miltiorrhiza extract and studies have shown that salvianolic acid B possesses many biological activities, which not only has a good protective effect on myocardial infarction, but could significantly alleviate myocardial ischemia-reperfusion injury. This article reviews the research progress of salvianolic acid B in cardiovascular diseases, and also includes discussion about the mechanisms of salvianolic acid B in the regulation of cardiovascular diseases, which may provide references for follow-up research and clinical treatment.

salvianolic acid B; myocardial infarction; ischemia-reperfusion; cardiomyocyte hypertrophy; molecular mechanisms; therapeutic strategies

時(shí)間：2015-3-16 15:41 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20150316.1541.006.html

2014-09-17,

2015-01-17

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81173190)；江蘇省中管局項(xiàng)目(No LZ11191)；國(guó)家科技部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(No 2011ZX09102-002-07);江蘇省高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(No ysxk-2010)；南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)一級(jí)學(xué)科開(kāi)放課題資助(No 2011zyx4-004)

林 超(1989-)，男，博士生，研究方向:心血管藥理學(xué)，E-mail:331476864@qq.com； 卞慧敏(1958-)，女，研究員，博士生導(dǎo)師，研究方向:心血管藥理學(xué)，通訊作者,E-mail:hmbian@sina.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2015.04.002

A

1001-1978(2015)04-0449-04

R-05；R284.1；R322.11；R329.25；R542.22；R543.5；R972