易 曄 盧遠(yuǎn)航 冀倩倩

湖北省中山醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合腎病科，湖北武漢 430030

金水寶對(duì)糖尿病腎病血液透析患者氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)的影響

易 曄 盧遠(yuǎn)航 冀倩倩

湖北省中山醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合腎病科，湖北武漢 430030

目的 觀察金水寶對(duì)糖尿病腎病維持性血液透析患者氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)的改善作用。 方法 選擇2013年2～5月湖北省中山醫(yī)院血液凈化中心透析時(shí)間超過(guò)6個(gè)月的36例糖尿病腎病血液透析患者，隨機(jī)分為對(duì)照組（18例）和治療組（18例）。對(duì)照組給予常規(guī)碳酸氫鹽血液透析治療，每周3次，每次治療4 h；治療組為常規(guī)碳酸氫鹽血液透析基礎(chǔ)上加用金水寶膠囊口服，0.33 g/粒，每次5粒，每日3次。兩組均治療3個(gè)月。兩組研究對(duì)象均于研究開始前及治療3個(gè)月后檢測(cè)血清超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、過(guò)氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的變化。 結(jié)果 與治療前比較，對(duì)照組患者治療后IL-6[（19.70±1.11）ng/mL比（23.17±1.76）ng/mL]、TNF-α[（50.94±1.52）ng/L比（55.39±1.87）ng/L]、hs-CRP[（8.58±0.67）mg/L比（10.17±0.42）mg/L]、MDA[（5.51±0.33）nmol/L比6.59±0.25）nmol/L]水平均顯著升高（P＜0.01），SOD[（55.19±2.82）nU/mL比（46.51±1.89）nU/mL]、GSH-Px[（197.05±8.88）U/L比（171.39±7.83）U/L]顯著降低（P＜0.01）；治療組治療后與治療前比較，IL-6[（19.36±1.71）ng/mL比（14.79±2.95）ng/mL]、TNF-α[（51.13±1.42）ng/L比（45.66±1.74）ng/L]、hs-CRP[（8.72±0.85）mg/L比（6.44±0.95）mg/L]、MDA[（5.68±0.58）nmol/L比（4.81±0.58）nmol/L]水平均顯著降低 （P＜0.01），SOD[（54.00±2.42）nU/mL比 （63.90±3.53）nU/mL]、GSH-Px[（197.47±8.48）U/L比（237.77±9.44）U/L]均顯著升高（P＜0.01）；兩組治療后IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA、SOD、GSH-Px組間差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 結(jié)論 糖尿病腎病維持性血液透析患者體內(nèi)普遍存在氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)，金水寶膠囊可改善糖尿病腎病維持性血液透析患者體內(nèi)的氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)。

金水寶；糖尿病腎??；維持性血液透析；氧化應(yīng)激；微炎癥

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)水平的不斷提高，2型糖尿病患者的發(fā)病率逐年增高，而終末期糖尿病腎病患者近年來(lái)也呈現(xiàn)明顯增長(zhǎng)趨勢(shì)。隨著血液透析技術(shù)的不斷完善成熟，行維持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）的糖尿病患者生活質(zhì)量明顯提高。但是在臨床工作中發(fā)現(xiàn)其心血管疾病發(fā)生率及病死率明顯高于其他類型血液透析人群[1]。研究證明與糖尿病腎病MHD患者普遍存在氧化應(yīng)激與微炎癥狀態(tài)，導(dǎo)致多種透析相關(guān)并發(fā)癥發(fā)病[2]。因此積極控制炎性反應(yīng)和改善氧化應(yīng)激，可能是降低糖尿病腎病血液透析患者心血管疾病發(fā)生率的有效途徑。金水寶膠囊為人工蟲草制劑，可以減輕腎臟損傷，保護(hù)腎功能[3]，在臨床中用于治療多種腎臟疾病。本研究采用隨機(jī)對(duì)照方法，探討金水寶對(duì)糖尿病腎病MHD患者氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)的作用，找尋安全、高效的方案以提高患者的生存率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2013年2～5月湖北省中山醫(yī)院血液凈化中心透析時(shí)間超過(guò)6個(gè)月的36例糖尿病腎病血液透析患者為研究對(duì)象，其中男23例，女13例；年齡48～65歲，平均（56.2±8.2）歲；透析時(shí)間6～15個(gè)月，平均（10.5± 2.6）個(gè)月；在入選前2周排除已知的任何炎癥事件（感染、創(chuàng)傷、手術(shù)、心肌梗死、應(yīng)激及活動(dòng)性風(fēng)濕疾病、自身免疫性疾病等急性事件及慢性消耗性疾病如腫瘤、結(jié)核等；無(wú)糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑等使用史；所有患者透析均達(dá)干體重，尿素清除指數(shù)（Kt/V）為1.2～1.5者；排除透析期間應(yīng)用維生素C、維生素E等抗氧化藥物。將所有患者隨機(jī)分為兩組，各18例。對(duì)照組和治療組在性別、年齡、營(yíng)養(yǎng)、體重、平均透析時(shí)間、透析充分性、透析膜及透析用水等構(gòu)成方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 兩組一般資料比較（±s）

表1 兩組一般資料比較（±s）

注：“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 例數(shù) 性別（例，女/男）年齡（歲）體重（kg）透析時(shí)間（個(gè)月）尿素清除指數(shù)血紅蛋白（g/L）血清白蛋白（g/L） 透析膜 透析用水對(duì)照組治療組χ2/t值P值18 18 10/8 11/7 0.986＞0.05 56.60±7.42 56.80±7.21 0.672＞0.05 58±9 60±7 1.217＞0.05 10.4±3.3 11.0±2.3 1.037＞0.05 1.41±0.83 1.39±0.73 0.671＞0.05 92±6 90±7 0.782＞0.05 37.2±6.05 36.1±4.72 0.932＞0.05聚砜膜聚砜膜--二級(jí)反滲水二級(jí)反滲水--

1.2 方法

所有病例行常規(guī)碳酸氫鹽血液透析治療，使用瑞典金寶公司AK96血液透析機(jī)，透析液流量500 mL/min，血流量200～300 mL/min，透析頻率為每周3次，每次4 h；所有患者血液透析同時(shí)給予同種類藥物降壓、糾正貧血、補(bǔ)鈣、控制血糖等常規(guī)支持對(duì)癥治療，病情穩(wěn)定達(dá)1個(gè)月以上。治療組在基礎(chǔ)治療上加用金水寶膠囊（江西濟(jì)民可信金水寶制藥有限公司；0.33 g/粒；國(guó)藥準(zhǔn)字Z10890003）口服，每次5粒，每日3次，服用3個(gè)月。兩組均治療3個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

36例研究對(duì)象均于研究開始和治療3個(gè)月后采晨起空腹靜脈血，檢測(cè)血清超敏C反應(yīng)蛋白（high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、白介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、過(guò)氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA），30 min內(nèi)分離血清，-80℃冰凍保存?zhèn)錂z。hs-CRP采用免疫透射比濁法，試劑由北京北方生物科技研究所提供。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清IL-6、TNF-α、SOD、GSH-Px、MDA，試劑由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間比較采用成組t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與治療前比較，對(duì)照組患者治療后血IL-6、TNF-α、 hs-CRP、MDA水平均顯著升高 （P＜0.01），SOD、GSH-Px顯著降低（P＜0.01）；治療組治療后與治療前比較，IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA水平均顯著降低（P＜0.01），SOD、GSH-Px顯著升高（P＜0.01）；兩組治療前各指標(biāo)比較差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）；兩組治療后各指標(biāo)比較差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表2、3。

3 討論

免疫炎性反應(yīng)在糖尿病腎病發(fā)展過(guò)程中有著重要的作用[4]，而糖尿病腎病維持性血液透析患者需要長(zhǎng)期進(jìn)行血透治療，由于免疫功能紊亂、感染、透析膜的生物不相容及對(duì)炎癥遞質(zhì)的清除不充分等，使他們更加容易處于微炎癥狀態(tài)[5]。微炎癥狀態(tài)是指患者沒(méi)有全身或局部急性臨床感染征象，但存在低水平持續(xù)的炎癥狀態(tài)，主要表現(xiàn)為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的變化和細(xì)胞因子的活化。長(zhǎng)期微炎癥狀態(tài)會(huì)導(dǎo)致多種并發(fā)癥的產(chǎn)生，嚴(yán)重影響透析患者的生存質(zhì)量。微炎性反應(yīng)在慢性腎衰竭進(jìn)展惡化中起著重要作用[6]，被認(rèn)為是預(yù)示ESRD預(yù)后的可靠指標(biāo)[5]。hs-CRP是一種正性急性時(shí)相蛋白，是慢性炎癥狀態(tài)下細(xì)胞因子產(chǎn)生的標(biāo)志，也是系統(tǒng)性低水平炎性反應(yīng)綜合征的特異性標(biāo)志物，可較好地反映目前的微炎癥狀態(tài)。hs-CRP水平連續(xù)超過(guò)正常（＞5～10 mg/L）即可診斷微炎癥狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)hs-CRP水平在血液透析患者中均較正常人高[7]，與透析患者增加的心血管事件和病死率相關(guān)。IL-6、TNF-α是細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中重要的促炎癥細(xì)胞因子，除直接作用于組織細(xì)胞外，也可激活其他炎癥介質(zhì)發(fā)揮作用，致腎小球系膜細(xì)胞增殖、硬化及腎臟疾病惡化，且接受透析治療后上述炎癥因子升高更顯著[7]。本研究以hs-CRP、IL-6、TNF-α為微炎癥檢測(cè)指標(biāo)，檢測(cè)結(jié)果顯示透析前兩組患者微炎癥指標(biāo)均升高，提示處于微炎癥狀態(tài)，透析3個(gè)月后對(duì)照組上述指標(biāo)較透析前明顯升高，差異有顯著性意義 （P＜0.01），提示血液透析加劇了微炎癥狀態(tài)，與文獻(xiàn)一致[7]。

表2 兩組治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)的比較（±s）

表2 兩組治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)的比較（±s）

注：MDA：丙二醛；SOD：過(guò)氧化物歧化酶；GSH-Px：谷胱甘肽過(guò)氧化物酶

t

表3 兩組治療前后微炎癥指標(biāo)的比較（±s）

表3 兩組治療前后微炎癥指標(biāo)的比較（±s）

注：hs-CRP：超敏C反應(yīng)蛋白；IL-6：白介素6；TNF-α：腫瘤壞死因子-α

氧化應(yīng)激（oxidativcstrcss，OS）狀態(tài)是指機(jī)體活性氧的生成增加和（或）機(jī)體清除活性氧的能力降低，導(dǎo)致活性氧的生成和清除失衡，過(guò)量的活性氧引起機(jī)體分子、細(xì)胞的損害。國(guó)內(nèi)外大量研究結(jié)果顯示，MHD患者體內(nèi)氧化應(yīng)激水平明顯增高，血液透析治療后升高更加顯著[8]，近年來(lái)的研究表明體內(nèi)氧化應(yīng)激水平的增加導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能損傷和動(dòng)脈硬化加重，是增加終末期腎病及尿毒癥透析患者病死率的重要原因[9]，在慢性腎功能衰竭發(fā)展演變過(guò)程中具有非常重要的意義。氧化應(yīng)激主要后果是脂質(zhì)過(guò)氧化，脂質(zhì)過(guò)氧化是自由基引起細(xì)胞損傷的主要途徑，MDA是其主要終末產(chǎn)物。GSH-Px、SOD是體內(nèi)重要的氧自由基清除劑，SOD、GSH-Px水平下降提示抗氧化能力的減低[10]。本研究以MDA、SOD、GSH-Px為氧化性應(yīng)激狀態(tài)檢測(cè)指標(biāo)，結(jié)果顯示透析前兩組患者M(jìn)DA均升高，SOD、GSH-Px均降低，提示處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，對(duì)照組透析3個(gè)月后MDA較透析前明顯升高，SOD、GSH-Px明顯降低，差異有顯著性意義（P＜0.01），提示血液透析加劇了氧化應(yīng)激狀態(tài)，與文獻(xiàn)一致[10]。

目前認(rèn)為，原發(fā)及各種繼發(fā)性腎臟疾病均存在機(jī)體免疫功能異常，自始至終都伴隨著炎癥因子的異常表達(dá)，而長(zhǎng)期血液透析治療則加劇了炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激[11]。炎癥及氧化應(yīng)激在MHD患者血管硬化的進(jìn)程中各自扮著重要的角色，并且其相互之間能夠起到協(xié)同作用，呈現(xiàn)螺旋上升式的惡性循環(huán)，是促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化、營(yíng)養(yǎng)不良、心腦血管疾病等并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[12]，導(dǎo)致患者的高病死率。目前對(duì)于如何改善糖尿病腎病MHD患者炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激狀態(tài)還缺乏有效的治療手段。

冬蟲夏草是一種傳統(tǒng)名貴的強(qiáng)壯滋補(bǔ)藥材，具有滋陰壯陽(yáng)之功效，其功能為補(bǔ)腎保肺、秘精益氣，且對(duì)肝脾無(wú)明顯毒副作用，在我國(guó)用于慢性腎臟病治療已經(jīng)有上千年歷史[3]。金水寶膠囊是從冬蟲夏草中分離的蟲草菌一蝙蝠蛾擬青霉Cs-4菌株，并經(jīng)純化、人工發(fā)酵培養(yǎng)加工而成的蟲草菌粉，含有多種氨基酸、核苷、微量元素、維生素等，具有與天然冬蟲夏草同樣的成分。研究顯示冬蟲夏草制劑能改善血液透析患者氧化應(yīng)激及炎癥狀態(tài)[13-14]，且無(wú)明顯毒副作用。但關(guān)于冬蟲夏草制劑對(duì)于是否能夠改善糖尿病腎病血液透析患者的氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)目前臨床研究不多。本研究結(jié)果表明，口服金水寶膠囊3個(gè)月后血漿IL-6、TNF-α、hs-CRP、MDA水平均顯著降低 （P＜0.01），SOD、GSH-Px顯著升高（P＜0.01），說(shuō)明冬蟲夏草制劑可以改善糖尿病腎病MHD患者的氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)。其改善氧化應(yīng)激的機(jī)制可能為冬蟲夏草制劑具有穩(wěn)定溶酶體膜，減少脂質(zhì)過(guò)氧化損傷等作用，通過(guò)抑制低密度脂蛋白膽固醇的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)發(fā)揮強(qiáng)大的抗氧化及抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[13]；改善微炎癥狀態(tài)的機(jī)制可能為蟲草制劑通過(guò)改善氧化應(yīng)激狀態(tài)，減少了促炎因子IL-6、IL-1、TNF-α等的釋放，降低CRP的合成；同時(shí)蟲草制劑可通過(guò)上調(diào)Th1相關(guān)因子，下調(diào)Th2相關(guān)因子來(lái)減少巨噬細(xì)胞激活而改善微炎癥狀態(tài)[15]。

本研究結(jié)果提示在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合金水寶膠囊治療可以改善糖尿病腎病MHD患者氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)，從而為提高糖尿病腎病MHD患者這一特殊患者群體的治療效果和生存質(zhì)量的治療用藥提供一定的臨床依據(jù)。但是本研究例數(shù)偏少，需進(jìn)行較大規(guī)模隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)觀察；同時(shí)，其具體機(jī)制也有待進(jìn)一步探討，并且需要隨訪觀察患者心血管疾病發(fā)病率及病死率等一些長(zhǎng)期目標(biāo)。

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Effects of Jinshuibao on oxidative stress and micro-inflammation state in patients with diabetic nephropathy maintenance hemodialysis

YI Ye LU Yuanhang JI Qianqian
Department of Nephrology of Integrated Chinese and Western Medicine,Zhongshan Hospital,Hubei Province,Wuhan 430030,China

ObjectiveTo investigate the effects of Jinshuibao on oxidative stress and micro-inflammation state in patients with diabetic nephropathy maintenance hemodialysis.Methods Thirty six diabetic nephropathy patients who had

CHD for over half year in Blood Purification Center of Zhongshan Hospital in Hubei Province were assigned into the control group(18 cases)and the treated group(18 cases).Control group were given conventional hemodialysis for 4 hours,3 times a week;treatment group were given conventional hemodialysis combined with Jinshuibao Capsules, orally,0.33 g/grain,once 5 grains,3 times a day.Both groups were treated for 3 months.Blood was collected before and after treatment for detection of hs-CRP,IL-6,TNF-α,MDA,SOD,GSH-Px levels.Results Compared with the indexes before treatment,in control group,IL-6[(19.70±1.11)ng/mL vs(23.17±1.76)ng/mL],TNF-α[(50.94±1.52)ng/L vs (55.39±1.87)ng/L],hs-CRP[(8.58±0.67)mg/L vs(10.17±0.42)mg/L],MDA[(5.51±0.33)nmol/L vs(6.59±0.25)nmol/L] were significantly increased(P＜0.01)and SOD[(55.19±2.82)nU/mL vs(46.51±1.89)nU/mL],GSH-Px[(197.05±8.88)U/L vs(171.39±7.83)U/L]were significantly declined after treatment(P＜0.01);in treatment group,IL-6[(19.36±1.71)ng/mL vs(14.79±2.95)ng/mL],TNF-α[(51.13±1.42)ng/L vs(45.66±1.74)ng/L],hs-CRP[(8.72±0.85)mg/L vs(6.44±0.95) mg/L],MDA[(5.68±0.58)nmol/L vs(4.81±0.58)nmol/L]were significantly declined(P＜0.01),SOD[(54.00±2.42)nU/mL vs(63.90±3.53)nU/mL],GSH-Px[(197.47±8.48)U/L vs (237.77±9.44)U/L]were significantly increased after treatment(P＜0.01).There were statistically significantdifferences between the control group and the treatment group of IL-6,TNF-α,hs-CRP,MDA,SOD,GSH-Px after treatment (all P＜0.01).Conclusion Micro-inflammation state and oxidative stress exists popularly in diabetic nephropathy maintenance hemodialysis patients.Jinshuibao can aggravate oxidative stress and micro-inflammation state in diabetic nephropathy maintenance hemodialysis patients.

Jinshuibao;Diabetic nephropathy;Hemodialysis;Oxidative stress;Micro-inflammation

R587；R692.3

A

1673-7210（2015）03（a）-0093-04

易曄（1978.8-），男，漢族，湖北武漢人，碩士；研究方向：腎病及血液凈化。

2014-10-28本文編輯：張瑜杰）