□ 談永萍 魏智清

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)系茄科枸杞屬多年生植物，分布于我國西北各省區(qū)及內(nèi)蒙古、西藏等地區(qū)，是民族醫(yī)藥中的常用藥材。黑果枸杞所含化學成分包括多糖、花色苷、原花青素、甜菜堿、黃酮、類黃酮、多酚類、揮發(fā)油類、礦物質(zhì)、維生素類及多種氨基酸等多種營養(yǎng)成分。大量研究表明，黑果枸杞具有抗疲勞、降血糖、抗氧化、降血脂、延緩衰老、抗動脈硬化、增強非特異性免疫等生理藥理作用 。其中有研究表明黑果枸色素、甜菜堿對小鼠具有顯著的抗缺氧、抗疲勞作用。尚未見有關黑果枸杞對魚類抗缺氧影響的報道。為此，本實驗以中華鳑鲏、草金魚為實驗動物，探討黑果枸杞水浸液對魚類抗缺氧能力的影響，為進一步開發(fā)黑果枸杞提供科學依據(jù)。

一、材料與方法

(一)實驗材料。去氧水:將自來水煮沸后盛入一容器并加蓋密封，自然冷卻后即為去氧水。實驗時水溫為15℃～18℃。經(jīng)美國維賽YSI手持式多參數(shù)儀水質(zhì)檢測儀測定，此去氧水溶解氧為(0.97～1.29)mg/L，低于同溫度范圍經(jīng)靜置的自來水的溶解氧(2.69～2.88)mg/L。黑果枸杞:由寧夏農(nóng)林科學院提供的黑果枸杞成熟干燥果實。實驗魚均購于銀川市西夏區(qū)同心路魚市，購回的中華鳑鲏和草金魚將除去死、弱個體，在經(jīng)曝氣處理后的水中暫養(yǎng)24h，禁食，待適應水環(huán)境后，選擇游泳活潑的個體進行實驗。中華鳑鲏(Rhodeus sinensis Gunther)體質(zhì)量為(0.24 ±0.06)g，體長為(2.89 ±0.14)cm，草金魚(Carassius auratus)體質(zhì)量為(0.35 ±0.08)g，體長為(3.70 ±0.21)cm。

(二)實驗方法。

1.黑果枸杞水浸液的制備。稱取干品黑果枸杞1g，加200mL熱開水浸泡30min，然后用濾紙過濾得到黑果枸杞水浸液。

2.密閉缺氧實驗。

(1)黑果枸杞水浸液對中華鳑鲏缺氧存活時間的影響。把中華鳑鲏分成7組，每組10條，用300mL錐形瓶作為容器。對照組裝滿去氧水，放入10條中華鳑鲏;將實驗組中華鳑鲏分別放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5、10mL 的黑果枸杞水浸液的錐形瓶中并全部用去氧水稀釋至瓶口，用保鮮膜密封瓶口，瓶內(nèi)不留氣泡，觀察并記錄瓶中每條中華鳑鲏的死亡時間，以探討黑果枸杞水浸液對中華鳑鲏抗缺氧能力的影響。本實驗重復3次。

(2)黑果枸杞水浸液對草金魚缺氧存活時間的影響。把草金魚分成6組，每組5條，用300mL錐形瓶作為容器。對照組裝滿去氧水，放入5條草金魚;將實驗組草金魚分別放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5mL 的黑果枸杞水浸液的錐形瓶中并全部用去氧水稀釋至瓶口，用保鮮膜密封瓶口，瓶內(nèi)不留氣泡，觀察并記錄瓶中每條草金魚的死亡時間，以探討黑果枸杞水浸液對草金魚抗缺氧能力的影響。本實驗重復3次。

3.數(shù)據(jù)處理。實驗數(shù)據(jù)用Mean±SD，表示，采用SPSS.19軟件進行方差分析，P﹤0.05為差異顯著 ，P﹤0.01為差異極顯著。存活時間延長率(%)=(實驗組平均存活時間-對照組平均存活時間)/對照組平均存活時間×100%。

二、結(jié)果

表1 黑果枸杞水浸液對中華鳑鲏缺氧存活時間的影響(Mean±SD，n=30)

(一)黑果枸杞水浸液對中華鳑鲏抗缺氧能力的影響。中華鳑鲏在密閉缺氧條件下不同濃度的黑果枸杞水浸液中的存活時間見表1。從表1中的結(jié)果可以看出，實驗組3、4與對照組相比均有顯著差異(P＜0.05)，實驗組5存活時間最長，達到了125min，與對照組相比有極顯著差異(P＜0.01)，即中華鳑鲏在相同劑量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時間顯著延長。實驗組1、2、6與對照組相比無顯著性差異(P＞0.05)。即中華鳑鲏在相同劑量的缺氧水加入 7.5、8.0、10.0mL 黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時間無明顯延長。

(二)黑果枸杞水浸液對草金魚抗缺氧能力的影響。草金魚在密閉缺氧條件下不同濃度的黑果枸杞水浸液中的存活時間見表2。

表2 黑果枸杞水浸液對草金魚缺氧存活時間的影響(Mean±SD ，n=15)

從表2中的結(jié)果可以看出，實驗組3、4與對照組相比均有顯著差異(P ＜0.05)，實驗組3存活時間最長，達到了156min。即草金魚在相同劑量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時間顯著延長。實驗組1、2、5與對照組相比無顯著性差異(P＞0.05)，草金魚在相同劑量的缺氧水加入 7.5、8.0、9.5mL 黑果枸杞水浸液無明顯變化。

以上實驗結(jié)果顯示，不同劑量的黑果枸杞水浸液均可延長中華鳑鲏、草金魚的存活時間，有的劑量達到顯著差異(P＜0.05)或極顯著差異(P＜0.01)。表明一定劑量的黑果枸杞水浸液可顯著提高魚類的抗缺氧能力。

三、分析與討論

近年來的研究證實黑果枸杞含有多糖、花色苷色素、甜菜堿、原青花素、黃酮等多種營養(yǎng)成分，具有抗疲勞、耐缺氧、抗氧化、降血糖等作用。黑果枸杞中多糖能夠減輕小白鼠自由基的生成，促進體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的清除。維持高含量的肝糖原和肌糖原，它們是大強度耐力運動的主要來源之一。能夠減少運動后血乳酸的堆積，延緩疲勞發(fā)生。閆亞美等對黑果枸杞與5種果蔬(葡萄、樹莓、紫甘藍、藍莓和紫薯)中花色苷組成及體外抗氧化活性的比較研究，證實黑果枸杞總花色苷含量最高，其抗氧化活性的能力最強，增加延緩運動性疲勞和體能恢復的效果。吳秀香等就葡萄籽原花青素的耐缺氧作用、寶麗等就歐洲越桔花青素的耐缺氧作用進行了實驗研究，認為原花青素的耐缺氧作用機制可能與增加大腦供血、降低心腦耗氧量、清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化等作用有關。鹽酸甜菜堿，其化學結(jié)構(gòu)與膽堿相似，作為甲基供體，在機體代謝中有著重要作用，具有減緩腫瘤的形成、降低應激反應、改善食欲等作用。朱玉云等的研究結(jié)果顯示，能明顯延長異丙腎上腺素所致急性心肌缺氧小鼠的存活時間，甜菜堿對心肌缺血缺氧具有改善和保護作用。

本實驗結(jié)果表明，添加一定濃度的黑果枸杞水浸液能明顯延長中華鳑鲏和草金魚在常壓密閉缺氧條件下的存活時間，提高其抗缺氧能力，因黑果枸杞中含有豐富的活性物質(zhì)，具有抗缺氧、耐疲勞等作用。

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