夏新萌 李 海

隨著寵物行業(yè)的不斷發(fā)展，寵物用藥的安全性也越來越受到臨床醫(yī)生的高度重視。藥物對靶動物的安全性試驗是新型寵物藥研發(fā)過程中的重要環(huán)節(jié)。某公司生產(chǎn)的10%非潑羅尼滴劑適用于驅(qū)殺犬、貓等寵物的體外寄生蟲。試驗以《寵物用藥物對靶動物安全性試驗指導原則》為依據(jù)，對該藥的臨床使用安全性作出評價。

試驗從聊城幾家寵物醫(yī)院選取40頭雜種犬，隨機分為4組，每組10頭，以推薦劑量為基礎(chǔ)，分別給予推薦劑量的生理鹽水，1倍量、3倍量和5倍量用藥。每日1次滴于皮膚，連續(xù)用藥3天。分別于給藥前后，3次采集靜脈血和尿液，分別用于血常規(guī)檢查、血液生化檢查和尿檢。根據(jù)3次試驗樣本數(shù)據(jù)間的差異性比較及不同劑量組間試驗數(shù)據(jù)的差異性，評價該藥對犬的臨床安全性。結(jié)果表明，4組實驗動物用藥前后的血常規(guī)指標和生化指標無顯著性差異，不同劑量組間也無顯著性差異。非潑羅尼滴劑以臨床推薦劑量用于犬時，對其血液細胞學、血清生化及尿檢指標無顯著影響。

非潑羅尼（氟蟲腈），其商品名為銳勁特， 1987年由法國Rhone-Poulenc公司研發(fā)成功，是一種新型苯吡唑類殺蟲劑，也是第一例用于有害生物防治的苯吡唑類殺蟲劑。和傳統(tǒng)殺蟲劑（有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類）相比，具有廣譜、高效的優(yōu)點，已被廣泛用于農(nóng)業(yè)多個領(lǐng)域，成為一種重要的殺蟲劑。

一、作用機理

非潑羅尼通過阻斷由γ-氨基丁酸受體控制的神經(jīng)膜Cl-通道誘導Cl-流，使昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)極度興奮，從而導致蟲體死亡，達到對多種經(jīng)濟害蟲的防治效果。 研究人員用培養(yǎng)的大鼠背神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)進行單通道電壓箱試驗，發(fā)現(xiàn)非潑羅尼的使用導致γ-氨基丁酸受體開放時間減少，關(guān)閉時間增加，即降低了γ-氨基丁酸受體通道的開放頻率來抑制γ-氨基丁酸受體，繼而闡明了非潑羅尼對γ-氨基丁酸受體單通道的作用機理。

二、試驗材料和方法

（一）試驗藥品

10%非潑羅尼滴劑，某生物科技公司提供。

生理鹽水，商品用。

（二）儀器設備

Sysmex pocH 100 dif 全自動動物血液分析儀。

愛得仕全自動生化分析儀、尿液分析儀。

臨床常用檢查器械等。

（三）試驗動物及給藥方案

40頭本地雜種犬，公母各半，選自寵物醫(yī)院，在試驗前經(jīng)臨床觀察為健康動物。試驗動物隨機分成4組，每組10頭，即對照組、1倍量組、3倍量組和5倍量組，按照劑量分別給藥，對照組給予同等劑量的生理鹽水。每天1次，連續(xù)用藥3天。試驗犬由寵物主人在家按日常方式飼養(yǎng)，試驗期間禁止洗澡。

將寵物用藥部位的被毛扒開，露出皮膚，將藥劑直接滴于皮膚上，自然風干。不要在被毛干前觸摸動物，在用藥后用肥皂和清水洗手。

（四）樣品采集和處理

在給藥前1天、第1次給藥后1天和最后1次給藥后1天，通過前肢橈側(cè)靜脈采集試驗犬的全血，分別加入抗凝管（0.5ml），用全自動動物血液分析儀進行血常規(guī)檢查）和促凝管（1.5～2ml），用全自動生化分析儀進行血液生化檢查，在采血前動物禁食，不限制飲水。導尿采集尿液，全自動尿液分析儀進行尿液分析。

（五）觀察指標

1.血液學檢查 檢測參數(shù)有：血紅蛋白（HGB）、紅細胞計數(shù)(RBC)、白細胞計數(shù)(WBC)、紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞容積(MCV)、血小板計數(shù)(PLT)、淋巴細胞百分(LYM%)等。

2.血液生化檢查 檢測參數(shù)有：血清鉀、鈉、鈣、無機磷及氯化物等無機離子濃度；肝功能指標：總膽固醇(CHOL)、血糖(GLU)、肌酐(CREA)、總膽紅素(TBIL)、ALT(谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)、AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)；血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血清尿素氮(BUN)等。

3.尿液檢查 檢測參數(shù)有：pH、比重、尿蛋白、尿糖、尿膽紅素和尿酮等。

（六）數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)以X±SD表示（X為平均值），用 Excel對試驗數(shù)據(jù)進行處理和分析，主要采取可重復雙因素分析法。比較每次采集的樣本中試驗組與對照組間血液學、血液生化和尿液等各項指標的顯著性差異，及同劑量組內(nèi)第1次采樣樣本與第2次和第3次采樣樣本間的各項指標的顯著性差異。P<0.05為差異顯著，P<0.01為極顯著差異。

三、結(jié)果與分析

（一）血液學檢查結(jié)果

試驗犬血常規(guī)檢查結(jié)果見分析，比較每次的樣本數(shù)據(jù)，與對照組相比，各試驗組的血紅蛋白、紅細胞、白細胞、紅細胞、血小板等血液學指標均無顯著性差異(P>0.05)。各試驗組內(nèi)3次采集的樣本之間的血液學指標也無顯著性差異(P>0.05)。說明以正常推薦劑量的5倍連續(xù)用藥不會影響犬的血液學指標。

（二）血液生化檢查結(jié)果

血液生化結(jié)果分析，結(jié)果表明：在試驗過程中，不同劑量組的試驗犬血清鉀、血清鈉、血清鈣、無機磷及氯化物等無機離子的濃度，AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)、ALT(谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)、總膽固醇(CHOL)、血清尿素氮(BUN) 、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)等指標與對照組相比無顯著性差異(P>0.05)，3次檢測的血液生化指標也無顯著性差異(P>0.05)。說明該非潑羅尼滴劑對犬的肝腎功能和離子代謝等均無顯著的影響。

（三）尿液檢查結(jié)果

在每次采集的樣本中5倍劑量組的犬尿檢結(jié)果與對照組相比無明顯改變，不同劑量組的試驗犬尿液的pH和比重值與對照組相比無顯著性差異(P>0.05)，尿蛋白、尿糖、尿膽紅素和尿酮呈陰性，未出現(xiàn)異常。同一試驗組的尿檢指標在第1次、第2次和第3次無顯著性差異(P>0.05)。說明該藥對犬腎臟及其代謝無顯著影響。

四、結(jié)論

非潑羅尼是一種對多種體外寄生蟲具有良好驅(qū)殺效果的廣譜殺蟲劑，主要是通過胃毒和觸殺起作用，也具有一定的內(nèi)吸傳導作用。通過阻斷γ-氨基丁酸受體支配的氯化物代謝，從而干擾中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸前后膜間的正常傳遞，使中樞神經(jīng)異常興奮而導致昆蟲死亡。非潑羅尼也可對哺乳動物產(chǎn)生毒副作用，但其毒副作用較小，因此比較安全。