劉定喜，鄒征歐

(1 衡陽縣農產品質量安全檢驗檢測站，湖南衡陽 421200；2 衡陽市糧油生產技術站，湖南衡陽 421001)

蔬菜農藥殘留速測結果異常的原因及對策

劉定喜1，鄒征歐2

(1 衡陽縣農產品質量安全檢驗檢測站，湖南衡陽 421200；2 衡陽市糧油生產技術站，湖南衡陽 421001)

介紹了蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留快速檢測技術的原理，分析了檢測中出現(xiàn)結果異常的各種原因，并提出了減少檢測結果誤差，提高檢測結果準確性的對策。

蔬菜；農藥殘留速測；結果異常；對策

農藥是現(xiàn)代農業(yè)生產必不可少的生產資料，安全合理適量施用農藥，對保障農業(yè)生產安全、提高農產品產量、促進農民增收都具有積極意義。農藥的過度使用對農產品的質量安全造成威脅[1～4]。農產品質量安全已經引起了政府和廣大消費者的重視，在保障供給的同時如何保障質量安全，加強農產品質量安全的監(jiān)管已經成為各級政府的一項重要工作，農藥殘留檢測的重要性不言而喻。

目前，我國常用的蔬菜農藥殘留快速檢測方法是酶抑制法。該方法應用方便，操作簡單，成本較低，且檢測結果準確，適合在蔬菜基地的市場準入監(jiān)測及農貿市場和超市等領域例行監(jiān)測工作，特別適合縣級以下基層農產品質檢機構在面廣、點多、量大、農藥殘留風險高的區(qū)域進行農藥殘留監(jiān)測[5]。蔬菜農藥殘留快速檢測方法可對上市前的蔬菜進行速測，將農藥殘留超標的蔬菜控制在市場之外，以保障廣大消費者的安全，杜絕因農藥殘留超標發(fā)生的中毒事件。但在實際檢測過程中，該方法還存在一些問題。筆者結合多年工作實踐，分析了問題出現(xiàn)的原因并提出解決對策，以期為保證檢測數(shù)據(jù)結果的準確性，解決檢測數(shù)據(jù)結果異常的問題提供參考。

1 蔬菜農藥殘留快速檢測技術的原理

有機磷和氨基甲酸酯類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統(tǒng)中乙酰膽堿酶活性，造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累，影響正常傳導。根據(jù)這一昆蟲毒理學原理，推測如果蔬菜中農藥殘留量越多，酶的抑制率就越高，反之則越低。蔬菜農藥殘留快速檢測實踐中，通過檢測酶被抑制程度，可以判斷蔬菜中農藥殘留的情況[6]。

蔬菜農藥殘留速測實踐中，樣品檢測結果異常問題主要集中在兩個方面：一是檢測結果出現(xiàn)負數(shù)；二是檢測結果出現(xiàn)假陽性。

2 檢測結果出現(xiàn)負數(shù)的原因及對策

(1)操作中儀器的校準平衡，比色皿的清潔，試劑配置的一致性，試劑的平衡等因素都會導致較大負數(shù)出現(xiàn)。

解決此類問題的關鍵在于經常校準調試農藥殘留速測儀，以確保儀器的測試準確度。此外，在實驗室將農藥殘留速測儀開機預熱半小時以上能保證儀器平衡穩(wěn)定。

針對試劑配置不一致的問題，用蒸餾水、純凈水或去離子水配置磷酸鹽緩沖液可以杜絕測量過程的干擾。在冬季氣溫較低時，可以使用玻璃棒邊攪邊超聲，讓其完全溶解，以保證磷酸鹽緩沖液的濃渡一致。

在配置顯色劑與底物時，為保證磷酸鹽緩沖液的整體一致性，應選擇同批次蔬菜樣的磷酸鹽緩沖液進行配置；當酶從冰箱中拿出時，應放在裝有冰塊的器皿中與顯色劑及底物在常溫下平衡幾分鐘后再開始測試。

(2)不規(guī)范操作是檢測結果出現(xiàn)負數(shù)的另一誘因。操作員未按正確的操作規(guī)程使用移液槍，或操作手法不熟練，都會導致樣品中加入酶的量比空白組多，致使樣品3 min前后的吸光值之差比空白組3 min前后的吸光值之差大，從而出現(xiàn)較大的負數(shù)。

操作不規(guī)范的關鍵在于移液槍的不當使用與維護。測試前檢查移液槍是否調準，上槍嘴時要按正確的方法上緊，防止槍嘴底部在移取過程中出現(xiàn)松動，測試結束后將移液槍的量程調至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。此外，還要定時校準驗證、清洗移液槍。測試中第一次移取酶液時可將移液槍嘴反復在酶液中進行潤洗，確保移液槍在移取酶液時的準確度。

(3)加入底物時速度過慢，或因底物試劑已被污染也會導致檢測結果出現(xiàn)負數(shù)。底物加入速度太慢，先加入底物的比色皿中的酶在放入測定儀之前已開始水解底物，水解物再與顯色劑結合，致使樣品3 min前后的吸光值之差比空白3 min前后的吸光值之差還要大，從而產生了較大的負數(shù)。

快速加入底物能在很大程度上解決檢測結果出現(xiàn)負數(shù)的問題。將底物迅速、均勻地加入待測樣品中，其后搖勻并放入農藥殘留速測儀進行測定。

3 檢測結果出現(xiàn)假陽性的原因及對策

(1)酶的活性降低或失去活性。因為酶不能水解底物，因此無法與顯色劑結合生成黃色，其結果與提取液中存在農藥時酶的活性被農藥抑制一樣，造成了假陽性的產生。

貯藏過程中要保證酶試劑在0～5℃溫度條件下保存，開封啟用后應盡量在一周內使用完。新開封的酶液為10 mL，理論上可以做200個樣品。如果當次檢測樣品數(shù)量在100個以內，可以將新開封的酶分成兩份，不用的一份酶繼續(xù)放在冰箱內保存。為了保證酶的活性，在樣品檢測過程中到把酶放置在裝有冰塊的器皿中，夏天冰塊溶化快，要及時倒出溶化的水并添加新的冰塊。在加酶液時，為了避免人體溫度影響酶的活性，盡量用手握住酶液試劑瓶的上端而不是底部，且酶液試劑瓶不宜長時間拿在手中。加好試樣液及顯色劑后，將比色皿放在37～38℃的恒溫箱內培養(yǎng)半個小時左右，提高酶的整體活性(檢測中空白樣3 min后與3 min前吸光值差要求在0.4～0.8)。

(2)某些本身含有辛辣物質的蔬菜，如辣椒、蔥蒜類等可抑制酶的活性；某些有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子、番茄等，可影響吸光值，直接使樣本3 min后與3 min前吸光值的差變小，從而出現(xiàn)假陽性。

對于本身含有辛辣物質的蔬菜，如辣椒，檢測時可以將辣椒切成長段，以降低辛辣物質滲入提取液中造成不必要的干擾，盡量避免假陽性的產生；蔥蒜類蔬菜可以采用整株浸取法以降低假陽性的產生。對于本身有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子，可以通過在樣品制備時減少表皮成分增加肉質成分的方法來降低色素的干擾，盡量避免假陽性的產生；番茄則可以采取在樣品制備時增加表皮成分減少肉質成分來降低色素的干擾。對于含有辛辣物質或者色素含量很高的蔬菜樣品，在振蕩提取時不能時間過長、轉速過多，振蕩時間在2 min以內、振蕩轉速在200 r/min左右為宜，從而避免提取液中辛辣物質或者蔬菜色素過多的干擾，防止假陽性的產生。

(3)當蔬菜切得太碎，蔬菜碎沫混進比色皿中后，碎沫的沉降影響吸光值，使樣本3 min后與3 min前吸光值的差變小，導致計算出的抑制率提高，產生假陽性。

解決這類問題的關鍵在于在樣品制備的尺寸，要求大小均勻合理，對于像花菜、白苦瓜等易碎蔬菜樣應該切得大塊一點。在樣品振蕩提取時轉速不能過快、時間不宜過長，避免將樣品震碎，振蕩之后應當將試樣液中的碎沫沉淀3 min左右。在移取試樣時要把樣品瓶斜著慢吸為準，防止碎沫吸進比色皿影響吸光值的變化。

[1] NY/T 448-2001.蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測方法[S].

[2] 朱國念.農藥殘留快速檢測技術[M].北京：化學工業(yè)出版社，2008.

[3] 趙 研，趙洪江.談沈陽市蔬菜農藥殘留檢測現(xiàn)狀[J].現(xiàn)代農業(yè)科技，2009(24)：330.

[4] 楊 慧，王富華.我國蔬菜農藥殘留速測技術的應用與發(fā)展[J]. 農業(yè)環(huán)境與發(fā)展，2008(5)：67-72.

[5] 趙艷華.農產品農藥殘留速測中常見影響因素的探討[J].吉林農業(yè)，2012(3)：14-15.

[6] 趙亞玲.蔬菜農藥殘留快速檢測的影響因素及解決措施[J].現(xiàn)代農業(yè)科技，2010(12)：329.

2015-05-13

劉定喜(1980-)，男，湖南衡陽縣人，助理農藝師，主要從事農產品質量檢測工作。

S481+.8

C

1001-5280(2015)04-0441-02

10.3969/j.issn.1001-5280.2015.04.29