基金項目：國家自然科學(xué)基金（81171653、81301960）；江蘇省自然科學(xué)基金（BK2011246、BK2011247)；江蘇省“333 工程”科研項目（BRA2013054、BRA2014064）；常州市社會發(fā)展計劃基金（CE20125017、CE20135048)

作者單位：213003 常州，蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院腫瘤生物診療中心

通信作者：蔣敬庭，Email：jiangjingting@suda.edu.cn

收稿日期：2015-06-08

DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.04.007

趨化因子在細胞向炎癥定向遷徙中發(fā)揮重要的作用，它的功能由相應(yīng)受體介導(dǎo)，兩者的相互作用控制各種免疫細胞在循環(huán)系統(tǒng)與組織器官之間的定向遷徙。最新研究顯示趨化因子及其受體與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，趨化因子通過自分泌或旁分泌方式刺激腫瘤細胞增殖和控制腫瘤細胞運動，其中趨化因子受體 CXCR5 與其配體 CXCL13 在多種腫瘤中異常表達且與腫瘤進展密切相關(guān)。本文就趨化因子受體CXCR5 與其配體 CXCL13 在惡性腫瘤中的最新進展進行綜述。

趨化因子是細胞因子超家族成員中一大類可特異性激活和募集白細胞的小分子蛋白多肽，其氨基酸組成具有特異的半胱氨酸（Cys）基序。根據(jù)特征性保守 Cys 基序的組成排列差異分為 CXC、CC、C、CX3C 四類 [1-5]。CXC 趨化因子，又被稱作 α 趨化因子，如 IL-8、生長調(diào)節(jié)致癌基因 α（growth related oncogene-α，GRO-α）、γ 干擾素誘導(dǎo)蛋白 10（interferon-γ-inducible protein 10，IP-10）。其又可按照有無 Glu-Leu-Arg（ELR）基序分為 ELR +CXC 趨化因子、ELR –CXC 趨化因子 [6]。CC 趨化因子，又稱為 β 趨化因子，如單核細胞趨化因子 1（monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）、巨噬細胞炎性蛋白 α/β（macrophage inflammatory protein-α/β，MIP-α/β）。目前發(fā)現(xiàn)的趨化因子絕大部分屬于 CC 類和 CXC 類，只有 2 個 C 分子和 1 個CX3C 分子。

趨化因子受體是一類介導(dǎo)趨化因子行使功能的 G 蛋白偶聯(lián)的跨膜受體，表達于不同類型細胞，具有廣泛的生物學(xué)作用，在免疫細胞和骨髓造血細胞生成、分化、發(fā)育調(diào)節(jié)以及免疫應(yīng)答的調(diào)控等過程發(fā)揮重要的作用。其參與多種感染性、變態(tài)反應(yīng)性疾病以及腫瘤等多種疾病的病理生理過

程[7-9]。

1　CXCR5 與其配體 CXCL13 的結(jié)構(gòu)與功能

CXCR5 是趨化因子 CXC 族受體家族的一員，分布在所有的外周成熟 B 細胞和少量的 T 細胞亞型上 [10]，也被稱為 CD185（分化簇 185）或伯基特淋巴瘤受體 1（Burkitt's lymphoma receptor 1，BLR-1）。CXCR5 有 7 個跨膜結(jié)構(gòu)域，與 GTP2 蛋白偶聯(lián)構(gòu)成跨膜受體。CXCR5 是使 B 淋巴細胞回到淋巴結(jié)的濾泡以及促進淋巴濾泡集結(jié)和淋巴結(jié)發(fā)育的重要因素 [11-12]。

CXCR5 的配體為 CXCL13，主要分布在胃、肝臟和淋巴結(jié)中，肝臟占近 50%，在唾液腺和乳腺中也有少量分布。由于它具有吸引 B 細胞的能力，又被稱作 B 細胞趨化因子（B-lymphocyte chemoattractant，BLC）?？梢灾苯诱{(diào)控 B細胞在體內(nèi)的成熟和發(fā)育 [13-15]。人 CXCL13 基因定位在4q21，編碼的蛋白質(zhì)序列為 MKIISTSLLLMLLVSSLSPVQG VLEVYYTSLRCRCVQESSVFIPRRFIDRQILPRGNGCPRK EIIVWKKNKSIVCVDPQAEWIQRMMEVLRKRSSSTLPVP VFKRKI，其中前 22 位為信號肽。

作為免疫家族的成員，CXCL13/CXCR5 不僅具有正常的生理作用，它還常與一些疾病的發(fā)生有著密切的關(guān)系。Singh等 [16]發(fā)現(xiàn)在前列腺癌細胞中，CXCR5 表達有助于腫瘤的生長和侵襲。El Haibi 等 [17]也證實了 CXCL13 可以通過 JNK 信號通路介導(dǎo)前列腺癌細胞增殖，并且通過 ERK活化途徑侵襲。Bürkle 等 [18]報道，在慢性 B 細胞性白血病患者受累淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn) CXCL13 mRNA 表達于巨噬細胞中，而 CXCR5 表達于腫瘤細胞中。這表明 CXCR5 和CXCL13 在腫瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在相互調(diào)控，同時，CXCR5/CXCL13 軸可能是腫瘤相關(guān)的巨噬細胞和腫瘤細胞之間相互作用的一個途徑。

2　CXCR5/CXCL13 的表達和調(diào)控

CXCR5 是 B 淋巴細胞趨化因子（BCA-1）的受體，在 B 淋巴細胞高度表達。鄒春華等 [19]通過免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)，肺腺癌細胞可以表達 CXCR5，而肺鱗癌細胞不表達CXCR5。肺腺癌細胞 CXCR5 通過 CXCL13/CXCR5 生物軸與淋巴結(jié)中 CXCL13 結(jié)合，促使肺腺癌細胞更容易向淋巴組織趨化，從而使肺腺癌細胞較肺鱗癌細胞更易發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移。然而，CXCR5 在肺腺癌中選擇性表達的機制尚不清楚，CXCR5 在肺腺癌轉(zhuǎn)移發(fā)生的作用仍需進一步研究。

曹寶森等 [20]報道在非小細胞肺癌組織中，CXCR5 主要表達在腫瘤組織外周和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中高內(nèi)皮微靜脈的內(nèi)皮細胞中，而在未發(fā)生轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中，主要表達于淋巴結(jié)濾泡間區(qū)的高內(nèi)皮微靜脈內(nèi)皮細胞，在正常組織中主要表達于淋巴結(jié)濾泡間區(qū)的高內(nèi)皮微靜脈內(nèi)皮細胞。

CXCL13 是由次級淋巴組織、淋巴結(jié)和血清濾泡中的濾泡樹突狀細胞（follicular dendritic cell，F(xiàn)DC）分泌。皮膚中的 DC 細胞可以分泌 CXCL13，Saeki 等 [21]認為皮膚中的 DC 在 B 細胞帶直接與 B 細胞作用，調(diào)控 CXCL13促進其分化成熟。CXCR5/CXCL13 軸在腫瘤相關(guān)巨噬細胞和腫瘤細胞之間起到關(guān)鍵作用，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到調(diào)控作用。

3　CXCR5/CXCL13 與惡性腫瘤

3.1 CXCR5/CXCL13 與腸癌

Qi 等 [10]用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測 25 對結(jié)直腸癌及 13 例結(jié)直腸腺瘤冰凍新鮮標(biāo)本中 CXCR5 及CXCLl3 mRNA 的表達，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測 153 例結(jié)直腸癌及相對應(yīng)的癌旁組織、62 例結(jié)直腸腺瘤標(biāo)本中CXCR5 及 CXCLl3 蛋白的表達，并分析其與臨床病理特征、術(shù)后生存率的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)在結(jié)直腸癌組織中，mRNA和蛋白的表達明顯高于結(jié)直腸癌癌旁組織和結(jié)直腸癌腺瘤組織，同時也證實了 CXCR5/CXCLl3 蛋白表達與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、腫瘤分期及復(fù)發(fā)相關(guān)。Meijer 等 [22]報道巨噬細胞在體內(nèi)或體外都可以誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸癌細胞株CT26 表達 CXCR5，人的 CXCLl3 主要分布在肝臟、淋巴結(jié)等組織中，而結(jié)直腸癌主要的轉(zhuǎn)移靶器官就是淋巴結(jié)和肝臟。這表明 CXCR5/CXCLl3 生物軸在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移過程中扮演著極其重要的角色。

3.2 CXCR5/CXCL13 與乳腺癌

Razis 等 [23]檢測了早期乳腺癌中 CXCR5/CXCL13 的表達，發(fā)現(xiàn)在雌激素水平較低的、分級較差以及有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者組織中，CXCR5 和 CXCL13表達較高，說明 CXCR5/CXCL13 在腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲中具有重要作用。Müller 等 [24]利用 Western blot、ELISA 和免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中存在 CXCL13 的表達，且與其轉(zhuǎn)移相關(guān)；另一項研究提示，CXCL13 過表達與乳腺癌的不良預(yù)后因素（組織學(xué)分類級別的增高、激素受體陰性以及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）相關(guān)。在乳腺癌的原發(fā)灶及腋窩淋巴結(jié)、肺和肝臟轉(zhuǎn)移灶的 CXCR5 表達比正常乳腺組織高得多，在乳腺癌最常見的轉(zhuǎn)移部位淋巴結(jié)、肺、肝臟和骨骼也高水平地表達 CXCL13，而在不常轉(zhuǎn)移的小腸、皮膚、骨骼肌和腦等組織則是明顯的低表達，體內(nèi)注射抗 CXCR5 或抗 CXCLl3抗體能有效地阻斷其對癌細胞的趨化 [25]。也有相關(guān)學(xué)者報道，在乳腺癌中 p53 的水平與趨化因子受體 CXCR5 在人乳腺癌細胞系 MCF-7 中的表達呈負相關(guān)，在 MCF-7 細胞系中轉(zhuǎn)導(dǎo) p53shRNA 的慢病毒可以上調(diào) mRNA 和蛋白質(zhì)中 CXCR5 的表達。通過對機制研究表明，缺乏功能性 p53的乳腺癌中。CXCR5 的高表達能夠引起異常細胞的存活和遷徙 [26]。

3.3 CXCR5/CXCL13 與肺癌

Singh 等 [27]在非小細胞肺癌中發(fā)現(xiàn)，CXCR5 在肺腺癌和肺鱗癌中的表達高于肺活檢的正常組織。采用流式細胞術(shù)檢測，CXCR5 在非小細胞肺癌細胞株（NCI-H1915）的表達明顯高于小細胞肺癌細胞株（SW-1271）。

曹寶森等 [20]通過對肺癌組織（腺癌 20 例、鱗癌24 例、腺鱗癌 10 例、大細胞未分化癌 6 例、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 30 例、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 30 例）和正常肺組織進行比較，結(jié)果顯示，隨著臨床分期的增加，腫瘤體積的增大，CXCR5 和 CXCL13 的表達有增高的趨勢，肺癌周圍出現(xiàn)大量由毛細血管后微靜脈演變而來的高內(nèi)皮微靜脈，其內(nèi)皮高大，胞質(zhì)突起增多，細胞核大，細胞器豐富，有淋巴細胞穿越管壁。可能是由于類高內(nèi)皮微靜脈的內(nèi)皮細胞功能活躍，致使淋巴細胞歸巢能力增強，相應(yīng)介導(dǎo)的腫瘤細胞轉(zhuǎn)移也相應(yīng)增加。鄒春華等 [19]認為 CXCR5 在肺腺癌的轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用，因此肺腺癌較肺鱗癌更易發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，肺腺癌細胞 CXCR5 通過 CXCR5/CXCL13 生物軸與淋巴組織中的 CXCL13 結(jié)合，可能使肺腺癌細胞更易趨化遷移至淋巴組織。CXCR5 的表達可以作為檢測肺腺癌早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的新手段。

3.4 CXCR5/CXCL13 與前列腺癌

趨化因子 CXCL13 和趨化因子受體 CXCR5 已被證明與前列腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)，Singh 等 [27-28]研究表明，早期前列腺腫瘤組織和前列腺腫瘤細胞系 LNCaP 和 PC3 均表達CXCR5。CXCR5 在前列腺癌組織中的表達明顯高于相匹配的癌旁組織，CXCR5 的表達強度與 Gleason 分級相關(guān)，當(dāng)Gleason 評分 ≥ 7 時，CXCR5 主要表達在細胞核上，當(dāng)Gleason 評分 ≤ 6 時，CXCR5 主要表達在細胞膜和細胞質(zhì)中間。類似于組織表達，CXCR5 在前列腺腫瘤細胞的表達顯著高于前列腺上皮細胞。體外功能學(xué)實驗表明，CXCR5與其配體 CXCL13 表現(xiàn)除了較高的遷移和侵襲潛能，在兩種細胞系中，抑制 CXCL13 均增強了膠原酶 1 或金屬基質(zhì)蛋白酶 1（MMP-1）、膠原酶 3（MMP-13）、溶基質(zhì)蛋白酶 1（MMP-3）和溶基質(zhì)蛋白酶 3（MMP-11）的表達。這些數(shù)據(jù)證明了 CXCR5/CXCL13 通路的臨床和生物學(xué)意義，并闡明了其在前列腺癌中轉(zhuǎn)移和侵襲的作用。

3.5 CXCR5/CXCL13 與其他腫瘤

研究表明，CXCR5 與其配體 CXCL13 結(jié)合介導(dǎo)基質(zhì)并激活成骨細胞中 C-myc 原癌基因，參與骨溶解過程并且與腫瘤進展相關(guān) [9]。Widney 等 [29]和 Hussain 等 [30]在非霍奇金淋巴瘤的實驗研究中證明，血清中趨化因子 CXCL13 的表達與非霍奇金淋巴瘤顯著相關(guān)，并在非霍奇金淋巴瘤的細胞系中證實趨化因子受體與其配體 CXCL13 均有表達，這表明 CXCR5/CXCL13 在非霍奇金淋巴瘤中有潛在的生物學(xué)意義，CXCL13 可以作為診斷非霍奇金淋巴瘤的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。

4　總結(jié)與展望

CXCR5 在惡性腫瘤中和其他免疫疾病中的作用不斷受到人們的重視，盡管 CXCR5 介導(dǎo)腫瘤細胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機制目前尚未清楚。相信隨著未來不斷深入的研究，CXCR5 可作為腫瘤診斷的分子標(biāo)記物和生物治療的靶點，為腫瘤的診斷、治療與預(yù)后判斷帶來新的希望。除此之外，CXCR5/CXCL13 生物軸的研究同樣顯示出在腫瘤免疫靶向治療中的廣闊前景，隨著基礎(chǔ)研究的深入和臨床進一步驗證，CXCR5/CXCL13 在多種免疫性疾病以及惡性腫瘤中的作用和機制將得到進一步闡明，有望為臨床診療提供新的手段。