■陳艷君 田 豐 閆素梅 史彬林 趙艷麗 吳鐵梅

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018；2.河套大學(xué)，內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000）

油菜是一種適應(yīng)性強(qiáng)、用途較廣、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高、極具發(fā)展?jié)摿Φ挠土献魑?。菜粕是菜籽榨油后的副產(chǎn)品，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高于菜籽餅。普通菜粕由于其高含量的硫代葡糖苷及其衍生產(chǎn)物（異硫氰酸酯和噁唑烷硫酮）影響適口性，在奶牛日糧中常被限制使用。雙低油菜籽的出現(xiàn)為在奶牛日糧中使用雙低菜粕或雙低菜餅提供了可能。雙低油菜籽是采用傳統(tǒng)植物育種技術(shù)培育出來的普通油菜籽(阿根廷油菜籽和波蘭油菜籽/波蘭蕓苔)的后代，最初是由加拿大植物育種專家們開發(fā)出來的。加拿大、澳大利亞、歐洲各國(guó)在80年代中后期就普及了雙低油菜品種[1]。加拿大雙低油菜粕保留了油菜粕高蛋白的特點(diǎn)，干物質(zhì)基礎(chǔ)粗蛋白質(zhì)含量40%左右[2]，且蛋白質(zhì)中氨基酸的平衡性較好，有毒成分含量大大降低，是一種不可多得的優(yōu)質(zhì)蛋白飼料來源。國(guó)外一些研究指出，在不同生產(chǎn)水平下，用雙低菜粕飼喂奶?？稍黾幽膛．a(chǎn)奶量[3]，課題組的前期研究也表明，在蛋白含量為14.5%的雙低菜粕組可以提高產(chǎn)奶量，與對(duì)照組相比，雙低菜粕組的平均乳脂量、乳蛋白量顯著增加(P＜0.05)[4]。

然而，目前國(guó)內(nèi)關(guān)于奶牛日糧中應(yīng)用雙低油菜粕的研究報(bào)道相對(duì)較少，而對(duì)加拿大雙低油菜粕的研究資料則更少。鑒此，本論文主要研究在產(chǎn)奶牛日糧中用加拿大雙低菜粕完全替代豆粕與棉粕后對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響，從而評(píng)價(jià)雙低菜粕在奶牛飼料中的應(yīng)用價(jià)值和降低生產(chǎn)成本的可能性，為加拿大雙低菜粕在奶牛生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

于內(nèi)蒙古巴彥淖爾市臨河區(qū)云海秋林牧場(chǎng)選擇3頭健康、體重相近、安裝有永久性瘤胃瘺管的荷斯坦奶牛，每天7：00和19：00兩次飼喂。自由運(yùn)動(dòng)，自由飲水。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧組成

試驗(yàn)分兩部分進(jìn)行。第一部分研究高蛋白日糧條件下雙低菜粕替代棉粕與豆粕后對(duì)奶牛瘤胃代謝的影響，試驗(yàn)分為對(duì)照組與雙低菜粕組，兩組日糧的蛋白質(zhì)含量均為10.5%，對(duì)照組日糧不飼喂雙低菜粕，試驗(yàn)組日糧飼喂5%雙低菜粕(精補(bǔ)料中占16.67%)。試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平詳見表1。

表1 高蛋白試驗(yàn)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平

第二部分研究低蛋白日糧條件下雙低菜粕對(duì)奶牛瘤胃代謝的影響，試驗(yàn)也分為對(duì)照組與雙低菜粕組，兩組日糧的蛋白質(zhì)含量為8.5%，對(duì)照組不飼喂雙低菜粕，試驗(yàn)組飼喂2.5%雙低菜粕（精補(bǔ)料中占8.33%），試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平詳見表2。試驗(yàn)日糧均參照中國(guó)奶牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（2004）配制，日糧的精粗比均為3∶7。

1.3 試驗(yàn)方法及測(cè)試指標(biāo)

1.3.1 測(cè)定指標(biāo)

每個(gè)日糧組合預(yù)飼10 d后，試驗(yàn)的第11 d和12 d連續(xù)兩天,分別于每天7：00飼喂后2、4、8、12、24 h連續(xù)取瘤胃液,測(cè)定pH值、VFA（揮發(fā)性脂肪酸）、NH3-N（氨-氮）、BCP（微生物蛋白）。

1.3.2 樣品的采集及預(yù)處理

每個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集的瘤胃液立即測(cè)定其pH值，瘤胃液經(jīng)四層紗布過濾后在4 000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心15 min，收集上清液。用移液管移取上清液0.5 ml置于預(yù)先裝有4.5 ml 0.2 mol/l鹽酸溶液的采樣瓶中，搖勻備用以測(cè)定NH3-N濃度。再移取4 ml上清液加入預(yù)先裝有1 ml 25%的偏磷酸-甲酸（3∶1）溶液的采樣瓶中，用來測(cè)定VFA,其余上清液用來測(cè)定BCP。所有樣品均在-20℃以下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel處理后，利用SAS 9.0系統(tǒng)軟件程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 瘤胃液pH值（見表3）

由表3結(jié)果可以看出，不同日糧蛋白水平下的對(duì)照組與菜粕組的瘤胃液pH值間均無顯著差異（P＞0.05），各處理組瘤胃液pH值的變動(dòng)范圍基本在6.3～6.8之間。各組pH值在0～2 h間下降較快，在4 h時(shí)達(dá)到最低點(diǎn)，此后又逐漸上升。

表2 低蛋白試驗(yàn)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平

注：1.表中NEL、DCP為理論值，其余營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)為實(shí)際測(cè)定值；

2.復(fù)合預(yù)混料可為每千克日糧提供：VA 3 500 IU、VD 1 250 IU、VE 15 IU、Fe 30 mg、Mn 40 mg、Cu 10 mg、I 0.35 mg、Co 0.2 mg、Se 0.2 mg。

表3 加拿大雙低油菜粕對(duì)奶牛瘤胃液pH值的影響

2.2 瘤胃液NH3-N與BCP濃度（見表4）

表4結(jié)果得出，在低日糧蛋白水平下，除0、2 h時(shí)間點(diǎn)外，各時(shí)間點(diǎn)的氨氮濃度菜粕組均低于對(duì)照組，二者的差異顯著或趨于顯著(P＜0.05或P＜0.10)。在高的日糧蛋白水平下，菜粕組的氨氮濃度在2、8 h時(shí)間點(diǎn)均顯著低于對(duì)照組，在其他時(shí)間點(diǎn)也有降低的趨勢(shì)。不同日糧蛋白水平下，各組瘤胃氨氮濃度均在采食后2 h達(dá)到最高,采食后8 h降到最低，此后又有所回升。不同日糧蛋白水平下，菜粕組在各時(shí)間點(diǎn)的瘤胃氨氮濃度平均值均顯著或趨于顯著地低于對(duì)照組。不同日糧蛋白水平下，對(duì)照組與菜粕組瘤胃液BCP含量差異均不顯著（P＞0.05），且對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)的BCP含量都略高于菜粕組。各組BCP含量在采食后逐漸上升，在8 h達(dá)到最高。

表4 加拿大雙低油菜粕對(duì)瘤胃液氨氮與微生物蛋白濃度的影響（mg/dl）

2.3 加拿大雙低油菜粕對(duì)瘤胃液VFA含量的影響（見表5）

由表5的結(jié)果可知，除在10.5%蛋白水平條件下，飼喂2 h后菜粕組乙酸含量低于對(duì)照組，差異趨于顯著（P＜0.10）以外。在兩個(gè)蛋白水平條件下，各時(shí)間點(diǎn)菜粕組和對(duì)照組的乙酸、丙酸、丁酸、乙酸丙酸比、TV?FA含量差異均不顯著（P＞0.05）。乙酸含量隨飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，在4～8 h達(dá)到最高，此后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)又逐漸回落。丙酸與丁酸含量在飼喂后2 h達(dá)到最高，4、8 h也較高，此后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)又逐漸回落。各處理組的TVFA含量隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升后降的趨勢(shì)。

3 討論

3.1 加拿大雙低油菜粕對(duì)瘤胃液pH值的影響

瘤胃液pH值是反映瘤胃發(fā)酵水平的一項(xiàng)綜合指標(biāo)，決定著瘤胃微生物對(duì)底物的發(fā)酵利用效率。一般情況下瘤胃pH值變化范圍在5.0～7.5之間[5]。Van Houtert（1993）[6]認(rèn)為，瘤胃微生物最大生長(zhǎng)速度的適宜pH值在5.7以上。本次試驗(yàn)測(cè)得的瘤胃pH值變動(dòng)范圍基本在6.3～6.8之間，不同蛋白水平下的對(duì)照組和菜粕組對(duì)瘤胃液pH值的影響均不顯著（P＞0.05），與類似試驗(yàn)[5]結(jié)果基本一致。

3.2 加拿大雙低油菜粕對(duì)瘤胃液NH3-N濃度和BCP含量的影響

NH3-N濃度反映了瘤胃微生物分解含氮物產(chǎn)NH3的速度及其對(duì)NH3的利用情況及蛋白質(zhì)合成與降解之間的平衡[7]。BCP含量可以直接反映瘤胃中細(xì)菌的數(shù)量，反映微生物蛋白合成的效率。瘤胃微生物合成自身的蛋白質(zhì)主要依靠飼料蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)降解所產(chǎn)生的肽、氨基酸和氨。由于雙低菜粕和豆粕、棉粕的蛋白質(zhì)組分在瘤胃內(nèi)降解的產(chǎn)物不一樣,且不同種類的微生物對(duì)氮源底物的要求也不盡相同,所以不同蛋白質(zhì)來源的日糧會(huì)在一定程度上影響瘤胃微生物的發(fā)酵和生長(zhǎng)。

由本試驗(yàn)的結(jié)果可知，用雙低菜粕替代豆粕、棉粕后，菜粕組的瘤胃氨氮濃度不同程度地低于對(duì)照組，尤其是在低蛋白日糧水平下，菜粕組瘤胃氨氮濃度呈顯著(P＜0.05)或趨于顯著(P＜0.10)的降低，這可能與蛋白質(zhì)降解率不同有關(guān)。趙天章等[8]測(cè)定了我國(guó)北方地區(qū)奶牛常用飼料的蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)的降解速度，結(jié)果表明，豆粕、棉粕在瘤胃內(nèi)降解的速度明顯高于菜粕。

對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)的BCP含量與菜粕組間差異都不顯著，與孫宏選[9]的試驗(yàn)結(jié)果基本一致，說明用加拿大雙低菜粕替代豆粕、棉粕對(duì)瘤胃液BCP濃度的影響較小。

3.3 加拿大雙低油菜粕對(duì)瘤胃液VFA含量的影響

VFA是日糧中碳水化合物在瘤胃中發(fā)酵的主要產(chǎn)物，其中乙酸丙酸比對(duì)揮發(fā)性脂肪酸模式、細(xì)菌或原蟲的群體多樣性都存在影響。Garrent等(1980)[10]的研究表明，VFA約占反芻動(dòng)物攝入可消化能的70%～80%，是反芻動(dòng)物主要的能量來源及合成乳脂和體脂的原料。在本試驗(yàn)中，在10.5%和8.5%蛋白水平條件下，菜粕組奶牛瘤胃液乙酸、丙酸和TVFA含量與對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05），但在各時(shí)間點(diǎn)兩個(gè)蛋白水平條件下，對(duì)照組比菜粕組的VFA含量均略有升高的趨勢(shì)，可能的原因尚不清楚，有待于進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

①兩個(gè)蛋白水平下的對(duì)照組和菜粕組對(duì)瘤胃液pH值、BCP含量和VFA含量的影響均不顯著(P＞0.05)。

②低蛋白日糧水平下，用加拿大雙低菜粕替代豆粕、棉粕，對(duì)奶牛瘤胃氨氮濃度的變化有顯著（P＜0.05）或趨于顯著（P＜0.1）的影響，菜粕組均低于對(duì)照組。