■羅 霄 方 俊 劉 剛Myrlene Carine B.Tossou李鐵軍鄧近平

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院動物營養(yǎng)研究所，湖南長沙 410128；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長沙 410128；3.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，湖南長沙 410125）

1973年，WHO和國際營養(yǎng)組織確認(rèn)硒為人和動物體內(nèi)必需的微量元素。硒的營養(yǎng)主要是通過蛋白質(zhì)（特別是酶蛋白）結(jié)合發(fā)揮抗氧化作用，所以硒與人類和動物生長、發(fā)育、疾病的發(fā)生和調(diào)控緊密相關(guān)[1]。由于斷奶仔豬的基礎(chǔ)日糧中含硒量很低，硒缺乏癥在斷奶仔豬生長發(fā)育中很常見，病豬多會出現(xiàn)白肌病、食欲不振、營養(yǎng)不良、生長緩慢等癥狀[2]。因此，在全國范圍內(nèi)，向日糧中添加硒已經(jīng)是一種很普遍的為仔豬補(bǔ)硒的常規(guī)措施，目前國內(nèi)補(bǔ)硒主要靠無機(jī)化合物亞硒酸鈉等，但是仔豬對無機(jī)硒源的吸收率低、產(chǎn)生毒副作用大，添加無機(jī)硒源不僅不能達(dá)到補(bǔ)硒的理想效果，還會對仔豬產(chǎn)生潛在危害，而且污染環(huán)境，所以研究向斷奶仔豬日糧中添加酵母硒正成為熱門研究方向。已有研究表明，酵母硒比無機(jī)硒易吸收、安全、穩(wěn)定、污染少，并且具有多方面的保健功能，但對于酵母硒在斷奶仔豬日糧中的最佳添加量仍說法不一。本試驗(yàn)研究添加不同劑量的酵母硒，分析他們對仔豬日增重、飼料利用率、抗氧化指標(biāo)等方面的影響，最后確定出最佳添加量。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 欄舍消毒

試驗(yàn)前徹底清理欄舍，首先用2%NaOH溶液沖洗圈舍，然后用1∶300的殺菌靈稀釋液噴灑豬欄，開門窗通風(fēng)，最后用福爾馬林和高錳酸鉀密封熏蒸消毒12 h，用藥濃度為每立方米空間用甲醛溶液28 ml、高錳酸鉀14 g、水14 ml，繼續(xù)通風(fēng)凈化，放干凈余氣后，開始試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)動物及分組

從某豬場選取分娩日期相同、體質(zhì)健康、初生重相近的28 d杜洛克×長白×約克夏三元雜交斷奶仔豬192頭。挑選好的仔豬登記體重、耳標(biāo)，隨機(jī)分成A、B、C、D四組，即：一個(gè)對照組、三個(gè)試驗(yàn)組。A組作為對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，B、C、D作為試驗(yàn)組，在基礎(chǔ)日糧中添加酵母硒，添加量依次為0.15、0.30、0.60 mg/kg。

1.3 試驗(yàn)日糧及設(shè)計(jì)

參照《中華人民共和國豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（2004），結(jié)合飼養(yǎng)仔豬實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)日糧?；A(chǔ)日糧組成其營養(yǎng)水平見表1，試驗(yàn)分組及酵母硒添加情況見表2。

1.4 飼養(yǎng)管理及處理設(shè)計(jì)

在漏縫地板鐵籠內(nèi)飼養(yǎng)試驗(yàn)仔豬，試驗(yàn)前對豬舍進(jìn)行徹底地清理、消毒、通風(fēng)，對仔豬的免疫等其他管理照常規(guī)進(jìn)行。試驗(yàn)進(jìn)行中，保證豬舍清潔、干燥、空氣新鮮，舍內(nèi)相對濕度為45%～55%之間，溫度在25℃左右。

試驗(yàn)期28 d，仔豬斷奶前3 d用基礎(chǔ)日糧誘食，第4 d開始飼喂對應(yīng)的試驗(yàn)組日糧[3]。每日飼喂4次，飼喂時(shí)間為 8∶00、12∶00、16∶00 和 20∶00，自由采食和飲水。注意觀察仔豬健康狀況，出現(xiàn)重度腹瀉或其他疾病要及時(shí)治療。試驗(yàn)期間，每天早晨空腹稱重一次，準(zhǔn)確計(jì)量、記錄每日投料量、剩料量。試驗(yàn)結(jié)束后次日早晨，每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)抽取5頭仔豬空腹抽取前腔靜脈血5 ml，收集全血（肝素抗凝），部分分離血清，于-20℃保存；取血結(jié)束后，每組隨機(jī)選1頭仔豬屠宰、采集肝臟、腎臟、肌肉樣品，在-20℃保存。

表1 試驗(yàn)仔豬基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 試驗(yàn)分組及酵母硒添加量

1.5 測定指標(biāo)與測定方法

1.5.1 生長性能指標(biāo)測定

仔豬日采食量(g/d)=(投料量-剩料量)/試驗(yàn)天數(shù)；

日增重(g/d)=（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)；

料肉比=日采食量/日增重；

總耗料量(g/頭)=全期平均日采食量×28。

每日記錄各種仔豬健康情況，記錄腹瀉與喘氣的仔豬頭數(shù)。

1.5.2 血清指標(biāo)測定

測定仔豬血清中的免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgG）、補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4（C4），均采用棉衣透射比濁法，使用深圳市庫貝爾生物科技有限公司購買的自動生化分析儀iChem-340。

測定仔豬血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）3種酶的活性，使用長春光機(jī)醫(yī)療器械有限公司CA-2000全自動酶標(biāo)儀。

測定仔豬血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GPXPx）、超氧化物歧化酶（SOD）酶活及丙二醛（MAD）含量，使用酶標(biāo)儀同上。

1.5.3 全血和組織含硒量測定

測定仔豬全血、肝臟、腎臟、肌肉中的含硒量，使用氫化物發(fā)生—原子熒光光譜法測定，購買北京晶品賽思科技有限公司的PF6系列多道全自動原子熒光光度計(jì)。

1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用EXCEL2003初步整理，采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析（見表3～表10）

表3 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬采食量的影響

從表3可以看出，從飼喂的第1周開始到第4周結(jié)束，添加不同劑量的酵母硒的各個(gè)試驗(yàn)組仔豬平均日采食量均高于對照組。其中C組仔豬采食量為4組中平均日采食量最高，和對照組相比差異極顯著（P＜0.01），B組與D組仔豬日采食量低于C組、高于對照組，與對照組相比差異顯著。

表4 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬健康狀況的影響

從表4可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬腹瀉、喘氣有一定影響。對照組仔豬腹瀉頭數(shù)最多，C、D組仔豬腹瀉頭數(shù)數(shù)量相同，同為最少，B組仔豬腹瀉頭數(shù)高于C、D兩組，低于對照組；仔豬喘氣頭數(shù)對照組和B組數(shù)量最多，C組仔豬喘氣頭數(shù)最少，D組仔豬喘氣頭數(shù)低于對照組和B組，高于C組。

表5 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬增重的影響

從表5可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬增重有一定影響。B、C、D三組仔豬的周平均日增重、全期平均日增重、總增重均高于對照組，1～4周均為C組仔豬個(gè)體增重最多，日增重C組最多，A、C兩組差異顯著，二者日增重大于對照組、小于C組，總增重C組最大。

從表6可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬日糧轉(zhuǎn)化率有一定影響。1～4周中B、C、D組仔豬料肉比均低于對照組A組，其中C組料肉比為最低。

表6 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬料肉比的影響

表7 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬免疫的影響（g/l）

從表7可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬免疫有一定影響。試驗(yàn)結(jié)束后，B、C、D組仔豬IgG、IgA、IgM、C3、C4均高于對照組A組，其中C組始終為最高。其中C組與對照組仔豬相比，IgM、C3差異極顯著，IgG、IgA、C4差異顯著。

從表8可以看出，A、B兩組仔豬谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)的含量無顯著差異，所以0.15 mg/kg劑量的酵母硒日糧對谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)無影響。不同劑量的酵母硒日糧對谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)無顯著影響。C、D兩組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)高于A組，差異極顯著(P＜0.01)，C、D兩組間無顯著差異。C的堿性磷酸酶(ALP)高于A組，差異極顯著(P＜0.01)，D組高于A組，低于C組。

表8 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬血清酶活的影響(U/l)

從表9可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬血清抗氧化指標(biāo)有一定影響。在試驗(yàn)的28 d結(jié)束后，B組、C組、D組仔豬的GPX-Px與對照組相比分別提高了12.06%、37.04%、29.91%，差異極顯著(P＜0.01)；B組、C組、D組仔豬的SOD與對照組相比分別提高了5.42%、22.88%、16.75%，差異極顯著(P＜0.01)；B組、C組、D組仔豬的MDA含量與對照組相比分別降低了8.66%、15.10%、24.06%，差異極顯著(P＜0.01)；B組、C組、D組仔豬的T-AOC與對照組相比分別提高了22.39%、55.06%、41.06%，差異顯著(P＜0.05)。

表9 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

從表10可以看出，不同的酵母硒添加量對仔豬全血及組織中Se含量有一定影響，均高于對照組。在試驗(yàn)的28 d結(jié)束后，B組、C組、D組仔豬全血中Se含量與對照組相比分別提高了61.54%、292.31%、376.92%；B組、C組、D組仔豬肝臟中Se含量與對照組相比分別提高了129.01%、209.84%、252.85%；B組、C組、D組仔豬腎臟中Se含量與對照組相比分別提高了45.95%、81.22%、88.66%；B組、C組、D組仔豬肌肉中Se含量與對照組相比分別提高了15.73%、204.49%、232.58%。

表10 日糧添加不同劑量的酵母硒對斷奶仔豬全血及組織中Se含量的影響（mg/kg）

3 討論

在斷奶仔豬生長性能的研究上，曾有外國學(xué)者（Manhan等，1999）研究后表示，有機(jī)硒或無機(jī)硒對仔豬生長性能沒有顯著影響，其中包括硒源對仔豬增重、日糧轉(zhuǎn)化率都無顯著影響的結(jié)論[4]。也曾有國內(nèi)學(xué)者（張乙山等，2008）有過類似的研究結(jié)論，他們認(rèn)為有機(jī)硒和無機(jī)硒對仔豬生長性能方面有一定影響，小劑量的硒源對仔豬生長性能影響不大，只有大劑量硒源可以大幅度提高日增重和日糧轉(zhuǎn)化率[5]。但是本試驗(yàn)研究表明：日糧添加不同劑量的酵母硒對仔豬的采食量、日增重、料肉比及健康狀況有著不同程度的影響，具有促進(jìn)作用，其中C組(0.30 mg/kg)與對照組相比，在仔豬生長性能上具有顯著差異，而且明顯優(yōu)于其他試驗(yàn)組。這雖然與之前個(gè)別學(xué)者結(jié)論不同，但是國內(nèi)也有很多學(xué)者（王秀娜等，2010；陳桂英等，2008）得出與本試驗(yàn)類似結(jié)論[2-6]。

在斷奶仔豬的抗氧化指標(biāo)的研究上，本試驗(yàn)研究結(jié)果表明：添加不同劑量的酵母硒日糧對仔豬的抗氧化指標(biāo)有不同程度的影響，添加劑量為3%時(shí)，作用效果較為穩(wěn)定。