王萌嘉，李莉，張曉星，王麗哲，豐建宇黑龍江省醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，黑龍江哈爾濱 150000

聯(lián)合血清ASMA、ANA檢測于慢性丙型肝炎與自身免疫性肝炎鑒別診斷中的應(yīng)用價值分析

王萌嘉，李莉，張曉星，王麗哲，豐建宇
黑龍江省醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，黑龍江哈爾濱 150000

目的探討患者自身血清中抗體的特征、相關(guān)性于自身免疫性肝炎（AIH）及丙型肝炎（HCV）中的鑒別診斷價值。方法整群選取2014年2月—2015年3月于該院住院治療的AIH患者48例及丙型肝炎患者40例，檢測其ANA、ASMA等相關(guān)自身抗體，分析其與AIH、HCV間關(guān)系。結(jié)果與HCV患者血清ANA、ASMA陽性率（7.5%，20.0%）對比，AIH患者兩項指標(biāo)均較高（89.6%，75.0%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；AIH患者血清ANA多為高滴度（≥1: 160），HCV患者多為低滴度（≤1:80）；兩組患者ANA均質(zhì)型差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；AIH組患者血清ASMA肌動蛋白檢出率明顯高于HCV組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；兩組患者ASMA-AA、ANA-H聯(lián)合檢測對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論對AIH及HCV患者進(jìn)行ANA、ASMA聯(lián)合檢測，于兩種疾病的治療及鑒別診斷中意義重大。

AIH；HCV；鑒別診斷

自身免疫性肝炎主要為肝臟及肝外的自身免疫損傷，病毒性肝炎也同樣伴有肝外自身免疫損傷現(xiàn)象，其中HCV患者尤為明顯[1]。于臨床治療原則上，AIH及HCV患者完全不同，若盲目進(jìn)行干擾素治療極有可能致使AIH患者病情加重，或盲目使用免疫抑制劑可導(dǎo)致病毒繁殖能力增加。故HCV及AIH的鑒別診斷顯得極為重要[2]。為探討最為合適的HCV及AIH早期鑒別診斷方法，該研究整群選取2014年2月—2015年3月于該院治療的AIH及HCV患者共88例，進(jìn)行分組研究，為兩種疾病臨床早期鑒別診斷提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

整群選取的AIH患者48例及HCV患者40例中，AIH組：男26例，女22例，年齡32～72歲，平均（56.28± 9.23）歲；HCV組：男22例，女18例，年齡30～74歲，平均（57.36±10.92）歲。所有患者均經(jīng)臨床診斷證實。兩組患者在性別，年齡等方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），具有可比性。該研究得到該院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過，同意進(jìn)行研究。

1.2 方法

使用間接免疫熒光法對患者血清內(nèi)抗平滑肌抗體（ASMA）及抗核抗體（ANA）進(jìn)行檢測。選擇德國歐蒙公司生產(chǎn)的ASMA（2012-8-24）、ANA（2012-7-14）檢測試劑盒。選用Hep-2細(xì)胞作為ANA抗原，大鼠胃內(nèi)冰凍組織切片為ASMA抗原,將其分別制成生物薄片，置于4℃恒溫水浴中保存。具體操作按試劑說明進(jìn)行。將用來檢測的血清進(jìn)行不同比例（1:20/40/60/80/160/320）稀釋，稀釋后將其與不同組織細(xì)胞共同進(jìn)行培養(yǎng)（0.5 h），并于洗滌之后添加帶有異硫氰酸熒光素的抗體共同進(jìn)行孵育（0.5 h）。所有步驟完成后進(jìn)行洗片并觀察。若于細(xì)胞或組織中發(fā)現(xiàn)綠色熒光則為試驗結(jié)果陽性。

1.3 評價標(biāo)準(zhǔn)

將待測血清分別按照1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640稀釋，與不同組織細(xì)胞共育30 min，洗滌后加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的抗體孵育30 min后洗片，封片后熒光顯微鏡下觀察結(jié)果，若組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)特征性綠色熒光為陽性，反之為陰性。

1.4 統(tǒng)計方法

該研究中所有數(shù)據(jù)均由SPSS 16.0軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料采用n（%）表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

與HCV患者血清ANA、ASMA陽性率（7.5%，20.0%）對比，AIH患者兩項指標(biāo)均較高（89.6%，75.0%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.01）；AIH患者血清ANA多為高滴度（≥1:160），HCV患者多為低滴度（≤1:80）；比較兩組患者ANA均質(zhì)型，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；AIH組患者血清ASMA肌動蛋白檢出率明顯高于HCV組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；兩組患者ASMA-AA、ANAH聯(lián)合檢測對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 AIH及HCV患者ASMA、ANA熒光特點及檢出率對比

3 討論

AIH多發(fā)于中青年女性，為慢性免疫性肝病，其病理表現(xiàn)為肝小葉周圍存在壞死組織碎屑，常伴有橋樣壞死，中間單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤明顯，表現(xiàn)為肝內(nèi)小膽管無損傷及肝臟內(nèi)部及肝外的自身免疫損傷。其最主要的特點之一為自身抗體的產(chǎn)生[3]。

有學(xué)者[4]研究指出，HCV亦存在自身免疫現(xiàn)象，臨床中可檢測出血清中含有自身抗體。該研究中，HCV患者陽性率為7.5%，與文獻(xiàn)報道相符[5]，且AIH最主要的特點之一為自身抗體的產(chǎn)生，其中ASMA及ANA出現(xiàn)最早，其最常見的靶抗原為DNA、RNA及組蛋白。該疾病最為常見的ANA間接免疫熒光與系統(tǒng)性紅斑狼瘡相同，著色為“均質(zhì)型”，其它還有“核膜型、核仁型、斑點型”等[6]。該研究中AIH組ANA滴度≥1:160，與文獻(xiàn)報道吻合[7]。SMA無種屬及器官特異性，其靶抗原由3組細(xì)胞骨架蛋白組成：微纖維（F型肌動蛋白、G型肌動蛋白）、中級纖維（波型蛋白）及微管。其中F型激動蛋白診斷價值最高。

由于HCV及AIH臨床表現(xiàn)及病理特征極為相似，故其鑒別診斷也極為困難。于臨床治療原則上，AIH及HCV患者完全不同，若盲目進(jìn)行干擾素治療極有可能致使AIH患者病情加重，或盲目使用免疫抑制劑可導(dǎo)致病毒繁殖能力增加。由此可以看出，如何鑒別診斷兩種疾病，已愈發(fā)成為一個不可忽視的問題。以往有人曾做過試驗，單獨使用ANA或ASMA對兩種疾病進(jìn)行鑒別診斷，但效果均不理想。該研究進(jìn)行兩種自身抗原聯(lián)合檢測，AIH檢出率為52.1%，而HCV組無檢出情況（0），該結(jié)果提示，聯(lián)合檢測患者血清中兩種物質(zhì)成分可有效對HCV與AIH進(jìn)行鑒別診斷，效果優(yōu)于任何一項指標(biāo)單獨檢測，這與鄧紀(jì)望等[8]研究所得結(jié)果吻合，證明聯(lián)合檢測二者可有效提高鑒別診斷的準(zhǔn)確率。

綜上所述，聯(lián)合ANA、ASMA等血清內(nèi)自身抗體進(jìn)行檢測，可有效鑒別診斷AIH、HCV疾病，值得于臨床中進(jìn)一步推廣使用。

[1]郭英君,李京濤,常占杰.淺析自身免疫性肝炎中西醫(yī)診治特點[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥，2012,14(1):98-99

[2]蔡中起,高鳳金.自身免疫性肝炎[J].臨床肝膽病雜志,2013, 13(5):65-67.

[3]趙鳳娥,王炳元.自身免疫性肝炎的治療[J].中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2012,8(4):98-101.

[4]劉艷麗.自身免疫性肝炎誤診2例分析[J].中國實用醫(yī)藥, 2013,8(34):214-216.

[5]管繼如.自身免疫性肝炎1例臨床分析[J].中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2013,6(3):72-75.

[6]戚應(yīng)杰,刁聯(lián)碩.身免疫性肝炎的實驗室診斷及其研究進(jìn)展[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(3):24-27.

[7]孫建華,趙耀亭,吳濤.自身免疫性肝炎66例分析[J].中國誤診學(xué)雜志,2010,9(21):104-106.

[8]鄧紀(jì)望,蔡燕玲,何以雅.不同熒光模式ANA、ASMA在自身免疫性肝炎與慢性丙型肝炎中的診斷價值[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2012,28(2):147-149.

Application Value Analysis of Differential Diagnosis of Chronic Hepatitis C and Autoimmune Hepatitis by Combined Serum ASMA and ANA

WANG Meng-jia,LI Li,ZHANG Xiao-xing,WANG Li-zhe,FENG Jian-yu
Integrated Chinese and Western Medicine Hospital,Heilongjiang Provincial Hospital,Harbin,Heilongjiang Province,150000 China

ObjectiveTo discuss the differential diagnostic value of antibody in the serum of the patient's own characteristics,the correlation in autoimmune hepatitis(AIH)and hepatitis c(HCV).Methods40 patients with AIH and 48 patients with hepatitis C treated from February 2014 to March2015 in the hospital were selected,and their ANA,ASMA and other related autoantibodies were detected,and their relationship with AIH and HCV was analyzed.ResultsThe positive rate of serum ANA and ASMA in AIH patients（89.6%，75.0%）were higher than those in HCV patients（7.5%，20.0%）and the difference was statistically significant(P＜0.01);serum ANA in AIH patients were mostly high titer（≥1:160）and serum ANA in HCV patients were mostly low titer（≤1:80）,ANA homogeneous type difference between two groups of patients had no statistically significance（P＞0.05）;The detection rate of ASMA in serum of AIH group was significantly higher than that in HCV group,and the difference was statistically significant(P＜0.01);Combined detection of ASMA-AA and ANA-H of two groups of patients was compared,the difference was statistically significant(P＜0.01).ConclusionCombined detection of ASMA and ANA in patients with AIH and HCV has an significant impact on the diagnosis and differential diagnosis of the two diseases.

AIH;HCV;differential diagnosis

R917

A

1674-0742（2015）11（c）－0194-02

10.16662/j.cnki.1674-0742.2015.33.194

2015-08-26）

王萌嘉(1982.3-)，女，黑龍江哈爾濱人，本科，主治醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合臨床工作。