石 紅，張金濤

（浙江九旭藥業(yè)有限公司， 浙江 金華 321016）

丙泊酚水溶性衍生物4-［（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲?；荼郊姿徕c制備

石 紅，張金濤

（浙江九旭藥業(yè)有限公司， 浙江 金華 321016）

為了制備丙泊酚水溶性衍生物，以丙泊酚為原料，與對(duì)腈基苯甲酰氯在縛酸劑存在的條件下作用成酯，再將腈基水解，最后將水解產(chǎn)物與氫氧化鈉成鈉鹽的到丙泊酚水溶性衍生物，4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲?；鵠苯甲酸鈉。制備出產(chǎn)品收率為46.1%，水溶性好，且原料易得，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

丙泊酚；丙泊酚衍生物；水解；腈基水解酶

丙泊酚（1）是一種新型靜脈麻醉藥物，用于全麻的誘導(dǎo)和維持[1]。由于其藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)，丙泊酚作用時(shí)間非常短，即使長(zhǎng)時(shí)間使用后在器官中仍無(wú)蓄積[2]。因此丙泊酚麻醉不僅容易控制，而且長(zhǎng)時(shí)間手術(shù)后清醒仍比其他麻醉藥快，不會(huì)引起逆行性遺忘[3]。此外，丙泊酚還被批準(zhǔn)作為加強(qiáng)監(jiān)護(hù)病人的長(zhǎng)期鎮(zhèn)靜藥[4]。

丙泊酚屬于脂溶性化合物，水溶性差，需加入賦形劑方可應(yīng)用于臨床。目前市售的丙泊酚注射劑是以由10%大豆油、1.2%卵磷酯和2.2%甘油作為賦形劑與注射用水形成的水包油型乳劑的形式應(yīng)用于臨床。該乳劑在靜脈給藥時(shí)有可能導(dǎo)致患者高脂血癥，尤其是對(duì)于長(zhǎng)期接受輸液的患者，患高脂血癥的概率增大[5]。另外，該乳劑保存期較短，并且對(duì)細(xì)菌和真菌污染敏感[6]。

此水溶性丙泊酚衍生物（4）由于引入了親水性基團(tuán)，所以水溶性增加，這種丙泊酚類似物具有相應(yīng)藥效基團(tuán)[7]，能夠以水為溶劑進(jìn)行制劑，從而降低臨床應(yīng)用時(shí)的副作用，并且能夠在水中穩(wěn)定存在，而不水解成丙泊酚。另外，該衍生物制備方法簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。合成路線見(jiàn)圖1。

圖1 丙泊酚衍生物合成路線Fig.1 The synthesis route of Propofol derivatives

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

儀器：2 L反應(yīng)瓶， R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海申勝生物技術(shù)有限公司)，TD20002電子天平（余姚市金諾天平儀器廠），AV-300核磁共振儀（德國(guó)Bruker公司），Vario MICRO元素分析儀（德國(guó)Elementar公司），1100LC/MS質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent 公司），島津制作所制高效液相色譜儀LC-2010A。

試劑：丙泊酚 (河北思爾可化學(xué)有限公司，含量＞95%，批號(hào)為20100610 )，對(duì)腈基苯甲酰氯（泰興市沃特爾化工有限公司，工業(yè)級(jí)，批號(hào)為20100311），腈水解酶（孝感深遠(yuǎn)化工有限公司，批號(hào)：20100502）甲苯、丙酮、三乙胺、甲醇、硫酸、乙酸乙酯、氫氧化鈉（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑廠，均為AR級(jí)）。

1.2 試驗(yàn)方法

（1）4-腈基苯甲酸（2,6-二異丙基）苯酚酯的制備

將2,6-二異丙基苯酚53.4 g加入到900 mL甲苯中，在冰浴冷卻下進(jìn)行攪拌，加入34.9 g三乙胺，當(dāng)溫度達(dá)到10 ℃以下時(shí)開(kāi)始滴加對(duì)腈基苯甲酰氯的甲苯溶液（將51 g對(duì)腈基苯甲酰氯溶解到150 mL甲苯中后于冰箱中冷藏至10 ℃以下），控制滴加速度使反應(yīng)體系的溫度不超過(guò)30 ℃，滴加結(jié)束后于室溫下攪拌2～4 h。然后用水洗滌2次，每次500 mL，分離出油層，并將油層減壓濃縮。向濃縮物中加入甲醇∶丙酮=3∶1（體積比）的混合溶劑450 mL，加熱溶解后，邊冷卻邊進(jìn)行攪拌，析出結(jié)晶，得61.8 g固體b，即產(chǎn)物2。1H-NMR (300 MHz, CD3CN): δ (ppm) 1.28(d, J=6.9 Hz,12H), 3.10(q, J=7.1 Hz , 2H), 7.05-7.29 (m , 3H), 7.65-8.02(m , 4H) M/e=292.17；元素分析：C=82.44%,H=7.26%,N=4.81%,O=5.49%

（2）4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲酰基]苯甲酸的制備

方法一（用硫酸水解）：

取30.7 g固體b，加入到300 mL乙醇中，加熱至回流，向其中滴加30%的硫酸水溶液65 mL，滴加結(jié)束后繼續(xù)回流8～12 h。對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行減壓濃縮至無(wú)醇味，然后加入200 mL水和200 mL乙酸乙酯，攪拌30 min，分離出有機(jī)相。用乙酸乙酯（50 mL/次）萃取水相2次，合并有機(jī)相。減壓濃縮有機(jī)相至干燥，然后加入10%氫氧化鈉水溶液40 mL，攪拌30 min后，取其上清液，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH=3～4，過(guò)濾，濾餅抽干后得11.2 g固體c，即產(chǎn)物3。1H-NMR (300 MHz, CD3CN): δ(ppm) 1.28(d, J=6.9 Hz,12H), 3.10(q, J=7.1 Hz , 2H), 7.06～7.29 (m , 3H), 7.89～8.25(m, 4H) M/e=311.16; 元素分析：C=77.39%,H=7.14%，O=15.46%。

方法二（用腈基水解酶水解）

取30.7 g固體b、0.5 g腈基水解酶，加入到250 mL水中攪拌，控制反應(yīng)溫度為45～55 ℃，并在反應(yīng)過(guò)程中用飽和碳酸氫鈉水溶液維持體系pH值為9左右。反應(yīng)體系澄清后停止加熱，用稀鹽酸調(diào)節(jié)反應(yīng)液的pH=3～4，析出固體，過(guò)濾，濾餅抽干后得31.5 g固體d，即產(chǎn)物3。1H-NMR (300 MHz, CD3CN): δ(ppm) 1.26(d, J=6.9 Hz,12H), 3.05(q, J=7.1 Hz , 2H), 7.05-7.24 (m , 3H), 7.98-8.22(m , 4H) 11.0(s，1H，-OH);M/e=311.16。

（3）4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲?；鵠苯甲酸鈉的制備

將16.3 g固體c或固體d加入到150 mL丙酮中，加熱到50～55 ℃，緩慢滴加氫氧化鈉水溶液（將20 g氫氧化鈉溶解到40 mL水中），攪拌30～60 min，然后，邊冷卻邊攪拌，析出固體后于冰箱冷藏過(guò)夜。然后過(guò)濾，用丙酮∶甲醇=3∶1（體積比）的混合溶劑對(duì)濾餅進(jìn)行重結(jié)晶，真空干燥，得白色固體、即4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲?；鵠苯甲酸鈉10.3 g。1H-NMR (300 MHz, D2O): δ(ppm) 1.24(d, J=6.9 Hz,12H), 2.90(q, J=7.1 Hz , 2H), 6.89～7.04 (m , 3H), 8.19～8.22(m , 4H) 元素分析：C=72.27%, H=6.37%, Na=6.92%, O=14.44%; M/e=333.14。

2 結(jié)果討論

此化合物合成方法簡(jiǎn)單，且原料易得，在化合物d的制備過(guò)程中，選用腈基水解酶催化有機(jī)腈實(shí)現(xiàn)有機(jī)羧酸的合成不僅反應(yīng)條件溫和，污染少，后處理簡(jiǎn)單，且收率高[8,9]。試驗(yàn)將兩種方法進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)，酶催化水解比傳統(tǒng)的用硫酸水解在收率上由34.2%提高到96.3%

2.1 水中溶解度

根據(jù)2010版《藥典》凡例第十五條方法對(duì)制備的化合物進(jìn)行溶解度試驗(yàn)。精確稱取4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲酰基]苯甲酸鈉1 g左右，每次加入純化水后，每隔5 min強(qiáng)力振搖30 s，并進(jìn)行觀察，如果30 min內(nèi)無(wú)肉眼可見(jiàn)的溶質(zhì)顆粒即視為完全溶解。結(jié)果0.998 g溶解在不大于1 mL水中，屬于極易溶解。

2.2 水溶液穩(wěn)定性

將制備得到的丙泊酚衍生物制成濃度為25 mg/mL的水溶液，并將該水溶液分別裝入10 mL西林瓶（基本不滲透氧）和10 mL聚乙烯瓶（易滲透氧）中，存放在室溫下。分別于第1、2、4、6天進(jìn)行取樣，參照丙泊酚原料的檢測(cè)方法，利用高效液相色譜檢測(cè)是否有游離的丙泊酚，結(jié)果見(jiàn)表1。

高效液相色譜檢測(cè)條件如下：

儀器：島津制作所制高效液相色譜儀LC-2010A；

檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器；

色譜柱：VP-ODS（4.6×250 mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇∶乙腈∶水=60∶15∶25，并含有0.01%三乙胺；

流速：1.0 mL/min；

檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm。

表1 樣品水溶液在不同包材中的分解情況Table 1 Decomposition of sample aqueous solution in different packages

結(jié)果未能檢測(cè)出游離的丙泊酚，則該化合物在水溶液中穩(wěn)定性好。

3 結(jié) 論

本丙泊酚衍生物水溶性好，具有一定的溶液穩(wěn)定性，便于制備成水針劑或凍干粉針劑使用，但是作為藥物運(yùn)用于臨床，還需要大量的試驗(yàn)。同時(shí)其制備工藝簡(jiǎn)單，反應(yīng)條件溫和，不需要特殊的設(shè)備，易于工業(yè)化生產(chǎn)?；诃h(huán)保要求，中間體4-[（2,6-二異丙基）苯基-氧基甲酰基]苯甲酸的制備過(guò)程宜選用腈基水解酶催化法來(lái)制備，但在操作中需根據(jù)水解酶的具體品種來(lái)選擇適宜的反應(yīng)溫度，和反應(yīng)pH值，來(lái)保證其最佳活性，雖然增加了一定的生產(chǎn)成本，但收率有顯著的提高，這是綠色化學(xué)合成所推崇的，也是以后研究的重點(diǎn)。

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Preparation of Propofol Water-soluble Derivative 4-［（2, 6 -diisopropyl） Phenyl-oxygen Radicals Formyl］Sodium Benzoate

SHI Hong，ZHANG Jin-tao
（Zhejiang Jiuxu Pharmaceutical Co.,Ltd.,Zhejiang Jinhua 321016，China)

In the presence of acid binding agent, propofol reacted with 4-cyanobenzoyl chloride to prepare the ester, then its hydrolysate reacted with NaOH to obtain propofol water-soluble derivative 4-［（2, 6-diisopropyl）phenyl-oxygen radicals formyl］sodium benzoate. The product yield was 46.1%, water-solubility of the product was good.

Propofol; Propofol derivative; Hydrolysis; Nitrile hydrolase

TQ 028

： A

： 1671-0460（2015）10-2332-03

2015-05-08

石紅（1982-），女，安徽滁州人，助理工程師，2003年畢業(yè)于安徽中醫(yī)學(xué)院藥物制劑專業(yè)。E-mail：shi_0022@sina.com。