白小軍+吳燕+牛艷+趙子丹+王曉菁

摘要：為準(zhǔn)確分析玉米中乙草胺、莠去津的殘留量，建立試樣用乙酸乙酯-石油醚（1∶1，V/V）提取、弗羅里硅土柱凈化、正己烷定容后，通過GC-MS/MS（EI源）測定，采用面積外標(biāo)法定量檢測。結(jié)果表明，乙草胺平均回收率為75.1%～87.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.7%～8.5%；莠去津平均回收率為73.5%～80.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9%～5.6%；方法快速準(zhǔn)確。

關(guān)鍵詞：玉米；乙草胺；莠去津；殘留量；氣質(zhì)聯(lián)用儀；優(yōu)化測定方法

中圖分類號：TQ450.2+63文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1002-1302（2014）11-0334-03

乙草胺是一種選擇性芽前處理除草劑，屬內(nèi)吸性農(nóng)藥，施藥后經(jīng)單子葉植物的胚芽鞘或雙子葉植物的下胚軸吸收后向上傳導(dǎo)，通過阻礙蛋白質(zhì)合成而抑制細(xì)胞生長，使雜草幼芽、幼根生長停止，進(jìn)而死亡，用于防治一年生禾本科雜草和部分小粒種子的闊葉雜草。莠去津是一種選擇性苗前、苗后封閉性除草劑，屬內(nèi)吸性農(nóng)藥，施藥后被植物根部吸收，然后在植物體內(nèi)傳導(dǎo)，抑制雜草的光合作用，導(dǎo)致枯死，用于防治一年生禾本科雜草和闊葉雜草。乙草胺和莠去津均為我國運(yùn)用較廣泛的除草劑，為了全面評價(jià)乙草胺、莠去津2種農(nóng)藥的環(huán)境效應(yīng)，指導(dǎo)其科學(xué)合理使用，開發(fā)乙草胺、莠去津的殘留分析方法顯得十分重要[1-2]。目前，國內(nèi)外分析方法主要有GC-NPD、GC-ECD、GC/MS、HPLC、LC/MS測定莠去津殘留量[3-8]，GC-ECD、GC/MS測定乙草胺殘留量[9-13]，然而對于玉米中乙草胺、莠去津殘留量用GC-MS/MS同時(shí)測定還未見報(bào)道。本研究建立了以乙酸乙酯/石油醚為提取劑，經(jīng)硅鎂型固相柱凈化，采用GC-MS/MS（EI源）測定玉米中乙草胺和莠去津殘留量的分析方法，與現(xiàn)有方法相比，操作簡單快速、測定準(zhǔn)確、精密度高。

1材料與方法

1.1試劑與材料

乙酸乙酯、石油醚（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），丙酮、正己烷（色譜純，美國Fisher公司），F(xiàn)lorisil固相柱（6cc/1g，美國Agilent公司），乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品（純度為98.5%，德國Dr.），莠去津標(biāo)準(zhǔn)品（100mg/L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）。

1.2儀器設(shè)備

ThermoTSQQuantumGC氣質(zhì)聯(lián)用儀（EI源，美國Thermo公司），電子天平（精度0.01g，PL202-L型，瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司），勻漿機(jī)（T18basic型，德國IKA公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（R-215型，瑞士步琪有限公司），離心機(jī)（TD-40L，上海安亭科學(xué)儀器有限公司）。

1.3樣品制備

玉米籽粒用高速粉碎機(jī)粉碎，于-20℃低溫保存。

1.4樣品分析

稱取試樣10.00g于100mL離心管，加入15.0mL水，浸泡30min，加入乙酸乙酯/石油醚（1∶1，V/V）40mL，在勻漿機(jī)中高速勻漿2min，蓋上蓋子，放入離心機(jī)，4000r/min離心5min，吸取乙腈液10.0mL，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮干，加入2.0mL丙酮-石油醚（5∶95，V/V）溶解殘?jiān)Ｓ?.0mL丙酮-石油醚（5∶95，V/V）預(yù)淋洗Florisil小柱，待液面近干時(shí)，將溶解液加入Florisil小柱，并用10.0mL丙酮-石油醚（5∶95，V/V）洗脫，洗脫液濃縮干，5.0mL正己烷定容，待測。

1.5色譜條件

采用DB-5MSUI色譜柱（0.25mm×30mm，0.25μm，Agilent公司）；掃描方式SRM；燈絲電流30μA；進(jìn)樣口溫度250℃；輔助傳輸線溫度280℃；柱溫：初始溫度60℃，保持1min，以25℃/min速率升到160℃，再以10℃/min的速率升到280℃，保持6min。載氣：氦氣1.2mL/min，不分流進(jìn)樣。掃描離子對見表1。

按照上述色譜條件，對標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品等體積進(jìn)樣，用外標(biāo)法定量。標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖1。

2結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

準(zhǔn)確稱取乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品0.0508g于50mL容量瓶中，用正己烷定容，得1000mg/L乙草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液母液。用上述乙草胺標(biāo)準(zhǔn)母液和100mg/L莠去津標(biāo)準(zhǔn)液稀釋配制成10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將上述混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用正己烷稀釋成

0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，在色譜條件下測定。乙草胺、莠去津標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度與相對應(yīng)的峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，乙草胺的回歸曲線為y=326.661x+1451.15，r=0.9998（n=6）；莠去津的回歸曲線為y=3899.65x+17808.6，r=0.9998（n=6）（圖2、圖3）。

2.2回收率和精確度

向空白的玉米試樣中添加乙草胺、莠去津農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液，添加質(zhì)量濃度為0.02、0.05、0.20mg/L3個(gè)水平，靜置30min后進(jìn)行測定，同時(shí)測定玉米空白試樣，每個(gè)添加質(zhì)量濃度水平做5個(gè)重復(fù)。結(jié)果表明，乙草胺添加回收率為75.1%～87.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.7%～8.5%；莠去津添加回收率為73.5%～80.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9%～5.6%，回收率、精密度符合檢測要求。具體數(shù)據(jù)見表2、圖4、圖5。

3小結(jié)與討論

本研究建立了玉米中乙草胺、莠去津殘留量的前處理方法和GC-MS/MS同時(shí)檢測2種農(nóng)藥的方法，并對方法的回收率、精密度進(jìn)行了探討，比現(xiàn)有的氣相色譜分析方法及氣相色譜-質(zhì)譜方法測定單一農(nóng)藥更加高效、快速。玉米中3個(gè)添加濃度水平的乙草胺回收率為75.1%～87.3%，測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～10.6%；莠去津回收率為73.5%～80.5%，測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9%～5.6%，表明方法的精密度和準(zhǔn)確性較好，符合農(nóng)藥殘留分析的要求[14]。endprint

參考文獻(xiàn)：

[1]聶果，吳春先，高立明，等.莠去津的生態(tài)毒理學(xué)及其環(huán)境行為學(xué)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2007，6（4）：32-37，54.

[2]蘇少泉.莠去津特性與使用中的問題[J].農(nóng)藥研究與應(yīng)用，2010，14（3）：1-5.

[3]朱莉萍，董靜，孫軍，等.分散型固相萃取-氣相色譜法測定蔬菜及其制品中滅線磷、嘧酶胺、莠去津、氟硅唑、噻嗪酮、異丙威殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2008，27（8）：79-82.

[4]李衛(wèi)建，聶志強(qiáng)，蔡彥明，等.氣相色譜法同時(shí)測定土壤中13種三嗪類除草劑殘留量的方法研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（1）：211-215.

[5]劉健明，莫婉湫，陳明.柱后衍生-高效液相色譜法測定水中呋喃丹和甲萘威[J].理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊，2011，47（5）：580-582.

[6]賀小敏，葛洪波，李愛民，等.固相萃取-高效液相色譜法測定水中呋喃丹、甲萘威和阿特拉津[J].環(huán)境監(jiān)測管理與技術(shù)，2011，23（4）：46-48.

[7]馬婧瑋，李萌，馬歡，等.SPE凈化-GC（NPD）測定土壤及玉米中莠去津殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2011，30（7）：75-78.

[8]欒燕，湯先偉，王璟，等.環(huán)境樣品中乙草胺和莠去津的氣相色譜-質(zhì)譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志，2005，22（4）：294-295.

[9]孫愛玲，劉雪，趙汝松，等.固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定水中的除草劑乙草胺[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2003，20（6）：842-844.

[10]馮慧敏，武葉葉，何紅波，等.內(nèi)標(biāo)法測定土壤中乙草胺殘留的氣相色譜法研究[J].環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2007，30（12）：32-34.

[11]藏小丹，牟光慶.氣相色譜法同時(shí)測定大豆中多種除草劑的殘留[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（3）：132-134.

[12]蘇明明，張旭東，那晗，等.凝膠滲透色譜-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用快速測定大豆中克百威、乙草胺、甲草胺、異丙甲草胺、氟樂靈的殘留量[J].質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（1）：37-41.

[13]吳長付，王冬蘭，沈燕，等.小麥和土壤中2甲4氯異辛酯殘留的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40（3）：275-277.

[14]李本昌，乞永艷，全國農(nóng)藥殘留試驗(yàn)研究協(xié)作組.農(nóng)藥殘留量實(shí)用檢測方法手冊：第二卷[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2001：28-31.endprint

參考文獻(xiàn)：

[1]聶果，吳春先，高立明，等.莠去津的生態(tài)毒理學(xué)及其環(huán)境行為學(xué)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2007，6（4）：32-37，54.

[2]蘇少泉.莠去津特性與使用中的問題[J].農(nóng)藥研究與應(yīng)用，2010，14（3）：1-5.

[3]朱莉萍，董靜，孫軍，等.分散型固相萃取-氣相色譜法測定蔬菜及其制品中滅線磷、嘧酶胺、莠去津、氟硅唑、噻嗪酮、異丙威殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2008，27（8）：79-82.

[4]李衛(wèi)建，聶志強(qiáng)，蔡彥明，等.氣相色譜法同時(shí)測定土壤中13種三嗪類除草劑殘留量的方法研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（1）：211-215.

[5]劉健明，莫婉湫，陳明.柱后衍生-高效液相色譜法測定水中呋喃丹和甲萘威[J].理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊，2011，47（5）：580-582.

[6]賀小敏，葛洪波，李愛民，等.固相萃取-高效液相色譜法測定水中呋喃丹、甲萘威和阿特拉津[J].環(huán)境監(jiān)測管理與技術(shù)，2011，23（4）：46-48.

[7]馬婧瑋，李萌，馬歡，等.SPE凈化-GC（NPD）測定土壤及玉米中莠去津殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2011，30（7）：75-78.

[8]欒燕，湯先偉，王璟，等.環(huán)境樣品中乙草胺和莠去津的氣相色譜-質(zhì)譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志，2005，22（4）：294-295.

[9]孫愛玲，劉雪，趙汝松，等.固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定水中的除草劑乙草胺[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2003，20（6）：842-844.

[10]馮慧敏，武葉葉，何紅波，等.內(nèi)標(biāo)法測定土壤中乙草胺殘留的氣相色譜法研究[J].環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2007，30（12）：32-34.

[11]藏小丹，牟光慶.氣相色譜法同時(shí)測定大豆中多種除草劑的殘留[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（3）：132-134.

[12]蘇明明，張旭東，那晗，等.凝膠滲透色譜-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用快速測定大豆中克百威、乙草胺、甲草胺、異丙甲草胺、氟樂靈的殘留量[J].質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（1）：37-41.

[13]吳長付，王冬蘭，沈燕，等.小麥和土壤中2甲4氯異辛酯殘留的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40（3）：275-277.

[14]李本昌，乞永艷，全國農(nóng)藥殘留試驗(yàn)研究協(xié)作組.農(nóng)藥殘留量實(shí)用檢測方法手冊：第二卷[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2001：28-31.endprint

參考文獻(xiàn)：

[1]聶果，吳春先，高立明，等.莠去津的生態(tài)毒理學(xué)及其環(huán)境行為學(xué)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2007，6（4）：32-37，54.

[2]蘇少泉.莠去津特性與使用中的問題[J].農(nóng)藥研究與應(yīng)用，2010，14（3）：1-5.

[3]朱莉萍，董靜，孫軍，等.分散型固相萃取-氣相色譜法測定蔬菜及其制品中滅線磷、嘧酶胺、莠去津、氟硅唑、噻嗪酮、異丙威殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2008，27（8）：79-82.

[4]李衛(wèi)建，聶志強(qiáng)，蔡彥明，等.氣相色譜法同時(shí)測定土壤中13種三嗪類除草劑殘留量的方法研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（1）：211-215.

[5]劉健明，莫婉湫，陳明.柱后衍生-高效液相色譜法測定水中呋喃丹和甲萘威[J].理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊，2011，47（5）：580-582.

[6]賀小敏，葛洪波，李愛民，等.固相萃取-高效液相色譜法測定水中呋喃丹、甲萘威和阿特拉津[J].環(huán)境監(jiān)測管理與技術(shù)，2011，23（4）：46-48.

[7]馬婧瑋，李萌，馬歡，等.SPE凈化-GC（NPD）測定土壤及玉米中莠去津殘留量[J].分析試驗(yàn)室，2011，30（7）：75-78.

[8]欒燕，湯先偉，王璟，等.環(huán)境樣品中乙草胺和莠去津的氣相色譜-質(zhì)譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志，2005，22（4）：294-295.

[9]孫愛玲，劉雪，趙汝松，等.固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定水中的除草劑乙草胺[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2003，20（6）：842-844.

[10]馮慧敏，武葉葉，何紅波，等.內(nèi)標(biāo)法測定土壤中乙草胺殘留的氣相色譜法研究[J].環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2007，30（12）：32-34.

[11]藏小丹，牟光慶.氣相色譜法同時(shí)測定大豆中多種除草劑的殘留[J].食品研究與開發(fā)，2010，31（3）：132-134.

[12]蘇明明，張旭東，那晗，等.凝膠滲透色譜-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用快速測定大豆中克百威、乙草胺、甲草胺、異丙甲草胺、氟樂靈的殘留量[J].質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2012，33（1）：37-41.

[13]吳長付，王冬蘭，沈燕，等.小麥和土壤中2甲4氯異辛酯殘留的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40（3）：275-277.

[14]李本昌，乞永艷，全國農(nóng)藥殘留試驗(yàn)研究協(xié)作組.農(nóng)藥殘留量實(shí)用檢測方法手冊：第二卷[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2001：28-31.endprint