曹鵬飛

摘要：青枯病病原菌已成為櫻桃番茄優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)的重要障礙。比較大蒜、銀杏、海金沙3種植物提取液對(duì)青枯病病原菌的抑制作用。結(jié)果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強(qiáng)。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農(nóng)藥對(duì)照的最低濃度分別為大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對(duì)青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為：9.23、8.30、8.12、9.19mm。當(dāng)濃度為100%時(shí)，3種提取物的抑菌效果均最好，但大蒜提取物對(duì)供試菌株的抑菌效果最強(qiáng)。因此，大蒜可作為櫻桃番茄植物保護(hù)劑的主要開(kāi)發(fā)原料。

關(guān)鍵詞：櫻桃番茄；青枯病菌；抑菌活性；植物提取液；大蒜；銀杏；海金沙

中圖分類號(hào)：S482.2+92文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002-1302（2014）11-0169-02

櫻桃番茄（LycopersivonesculentumMill.）別稱圣女果，為茄科一年生草本植物，含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素以及鉀、鈣等多種礦物質(zhì)及微量元素，具有降血壓、解毒、防治動(dòng)脈硬化、防癌抗癌之功效[1]。近年來(lái)，櫻桃番茄價(jià)位持續(xù)走高，比普通番茄增收22500～30000元/hm2，經(jīng)濟(jì)效益相當(dāng)可觀。櫻桃番茄青枯病的發(fā)生與危害呈逐年加重趨勢(shì)。據(jù)調(diào)查，輕病田一般減產(chǎn)10%，重病田減產(chǎn)50%以上，該病已成為櫻桃番茄優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的重要障礙[2]。青枯病是由青枯菌（Ralstoniasolanacearum）引起的毀滅性土傳病害。該菌菌系復(fù)雜，寄主廣泛，高溫高濕環(huán)境下生命力頑強(qiáng)，能侵染50多個(gè)科450多種植物，防治難度大[3]。近年來(lái)，對(duì)于茄科番茄屬植物青枯病，農(nóng)業(yè)上多用抗生素、激素來(lái)抵抗微生物的侵害，以免造成經(jīng)濟(jì)損失，但大量使用抗生素、激素對(duì)人體健康有害[4]。目前，國(guó)內(nèi)尚沒(méi)有理想的防治方法及農(nóng)藥來(lái)防治這種土傳性的細(xì)菌病害，因此開(kāi)發(fā)利用新型天然植物殺菌劑，不僅可以解決抗生素及其替代品不能解決的藥物殘留問(wèn)題，還可以提高我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)。施用生態(tài)有機(jī)肥，改善土壤生態(tài)環(huán)境，提高土壤微生物多樣性，有望從根本上控制櫻桃番茄青枯病的發(fā)生[5]。本研究以大蒜、銀杏外種皮、海金沙為材料，研究其對(duì)櫻桃番茄青枯病病原菌的殺菌活性，旨在為青枯病病原菌植物源殺菌劑的綜合開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1材料和方法

1.1材料

青枯菌B2.1.2.2、I1.2.1.1、K5.1.1.1、L5.3.1.2均分離自感染青枯病的櫻桃番茄植株。市售白皮大蒜、銀杏外種皮、海金沙葉片（含孢子）。

1.2植物提取液的制備

1.2.1大蒜提取液的制備[6]

選取足夠數(shù)量新鮮無(wú)芽、無(wú)蟲(chóng)變、無(wú)霉?fàn)€的大蒜鱗莖，剝皮后于研磨杯中榨汁，紗布過(guò)濾后，6000r/min離心2次，每次10min，取上清液，得到大蒜提取液，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2銀杏提取液的制備[7]

取剛采摘的銀杏外種皮，60℃烘干，粉碎，過(guò)60目篩備用。料液比為1g∶10mL，將銀杏外種皮粉末用80%工業(yè)乙醇浸提，提取3次，每次4h，合并提取液后于6000r/min離心10min，取上清液，真空抽濾濃縮，銀杏外種皮提取液濃度為0.2g/mL，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3海金沙提取液的制備[8]

取新鮮海金沙葉片（含孢子），60℃烘干，粉碎，過(guò)60目篩備用。料液比為1g∶40mL，將海金沙粉末用80%工業(yè)乙醇浸提3h后6000r/min離心10min，取上清液真空抽濾濃縮，海金沙提取液濃度為0.2g/mL，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3提取液對(duì)青枯病菌的抑菌試驗(yàn)

采用濾紙片法[6]進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。將提取液用無(wú)菌水分別稀釋成20%、40%、60%、80%、100%，農(nóng)用硫酸鏈霉素5000倍液作為農(nóng)藥對(duì)照，共計(jì)6個(gè)處理。將滅菌后的濾紙片置于不同濃度提取液、農(nóng)用硫酸鏈霉素5000倍液、無(wú)菌水中浸泡。將50℃左右的NA培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，待培養(yǎng)基凝固后，取編號(hào)為B2.1.2.2、I1.2.1.1，K5.1.1.1、L5.3.1.2的櫻桃番茄青枯病菌菌懸液各0.2mL涂布于培養(yǎng)基表面，把經(jīng)不同濃度藥劑浸泡的濾紙片等距離放在培養(yǎng)基上，7張/皿，7張分別為不同濃度的提取液、農(nóng)用硫酸鏈霉素5000倍液、無(wú)菌水浸泡的濾紙片，平行3組。于30℃恒溫箱中暗培養(yǎng)48h后，用電子數(shù)顯卡尺測(cè)量抑菌圈直徑。

2結(jié)果與分析

2.1大蒜提取液對(duì)櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果

由表1可知，4種青枯病菌均在不同濃度的提取液濾紙片周圍產(chǎn)生直徑大小不等的抑菌圈，提取液濃度越大，抑菌圈直徑越大。當(dāng)大蒜提取液濃度為20%～100%時(shí)，隨著濃度的升高，抑菌圈直徑逐漸增大。當(dāng)大蒜提取液濃度為20%時(shí)，抑菌圈直徑與對(duì)照相比差異極顯著。當(dāng)大蒜提取液濃度達(dá)100%時(shí)，4種供試菌株的抑菌圈直徑均達(dá)到最大，依次為10.54、11.61、10.71、17.12mm。

2.2銀杏提取液對(duì)櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果

銀杏提取液同樣對(duì)青枯病菌具有抑制作用，當(dāng)銀杏提取液濃度為20%～100%時(shí)，抑菌圈直徑隨著濃度的增加不斷增大。當(dāng)銀杏提取液濃度小于40%時(shí)，抑菌圈直徑與對(duì)照差異不顯著；當(dāng)濃度大于40%時(shí)，抑菌圈直徑均極顯著高于對(duì)照；當(dāng)濃度達(dá)100%時(shí)，各處理抑菌圈直徑均最大（表2）。

2.3海金沙提取液對(duì)櫻桃番茄青枯病菌抑菌效果

由表3可知，隨著提取液濃度的升高，抑菌圈直徑不斷增大。當(dāng)海金沙提取液濃度小于60%時(shí)，抑菌效果較差；當(dāng)海金沙提取液濃度大于60%時(shí)，抑菌效果與對(duì)照相比差異極顯著；當(dāng)海金沙提取液濃度為100%時(shí)，對(duì)櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果最好。

3結(jié)論與討論

青枯病是由青枯菌引起的毀滅性土傳病害，是世界上危害最大、分布最廣、造成損失最嚴(yán)重的植物病害之一[3]，以茄科作物發(fā)病最為嚴(yán)重，番茄受害尤甚，被稱為植物“癌癥”。本研究比較了大蒜、銀杏外種皮、海金沙3種植物提取液對(duì)櫻桃番茄青枯病病原菌的抑制作用。結(jié)果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強(qiáng)。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農(nóng)藥對(duì)照的最低濃度，分別為：大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對(duì)青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為9.23、8.30、8.12、9.19mm。這可能與提取物的有效成分有關(guān)，不同植物有效成分不同，同一植物對(duì)不同類型的青枯病菌的抑菌活性大小也存在一定差異，某些活性遇光分解或者不耐高溫，從而影響抑菌效果。大蒜提取物中的主要有效成分大蒜素能與微生物生長(zhǎng)繁殖所必需的巰基相結(jié)合，使巰基酶失活，從而抑制微生物生長(zhǎng)。因此，可嘗試以大蒜為主要原料開(kāi)發(fā)櫻桃番茄植物保護(hù)劑，通過(guò)灌根方式來(lái)防治櫻桃番茄青枯病。

參考文獻(xiàn)：

[1]許永禎，薛寒青，陳斌，等.番茄新品種——美味櫻桃番茄[J].青海農(nóng)林科技，1999（1）：54.

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青枯病是由青枯菌引起的毀滅性土傳病害，是世界上危害最大、分布最廣、造成損失最嚴(yán)重的植物病害之一[3]，以茄科作物發(fā)病最為嚴(yán)重，番茄受害尤甚，被稱為植物“癌癥”。本研究比較了大蒜、銀杏外種皮、海金沙3種植物提取液對(duì)櫻桃番茄青枯病病原菌的抑制作用。結(jié)果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強(qiáng)。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農(nóng)藥對(duì)照的最低濃度，分別為：大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對(duì)青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為9.23、8.30、8.12、9.19mm。這可能與提取物的有效成分有關(guān)，不同植物有效成分不同，同一植物對(duì)不同類型的青枯病菌的抑菌活性大小也存在一定差異，某些活性遇光分解或者不耐高溫，從而影響抑菌效果。大蒜提取物中的主要有效成分大蒜素能與微生物生長(zhǎng)繁殖所必需的巰基相結(jié)合，使巰基酶失活，從而抑制微生物生長(zhǎng)。因此，可嘗試以大蒜為主要原料開(kāi)發(fā)櫻桃番茄植物保護(hù)劑，通過(guò)灌根方式來(lái)防治櫻桃番茄青枯病。

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