王茂玲 林海容 賀國鳳 楊 眉△ 安邦權(quán) 鄧 波

（1.貴州省人民醫(yī)院輸血科，貴州 貴陽550002：2.遵義醫(yī)學院，貴州 遵義563003）

“新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn，HDN）”這一病名特指因胎兒從父親方面獲得的一些母親體內(nèi)沒有的紅細胞抗原，導致母嬰血型不合引起的一種胎兒或新生兒溶血的免疫性溶血性疾?。?］，可引起胎兒或新生兒水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、膽紅素腦病甚至死亡等嚴重后果。其中以ABO血型系統(tǒng)的發(fā)病率最高，約占HDN的85.3%［2］?，F(xiàn)就貴州省人民醫(yī)院行產(chǎn)前效價檢測及生產(chǎn)的326名O型孕婦的IgG ABO血型抗體效價結(jié)果及其新生兒的HDN發(fā)病情況進行分析。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2013年2月28日至2013年11月30日于貴州省人民醫(yī)院產(chǎn)科進行產(chǎn)檢及生產(chǎn)的0型孕婦及其新生兒的血標本。

1.2 儀器與試劑 強生全自動血型分析儀、水浴箱（上海梅香儀器有限公司）、巰基乙醇、凝聚胺試劑（中山市生科試劑儀器有限公司）、ABO紅細胞懸液（長春博德生物技術(shù)有限責任公司）。

1.3 方法 （1）IgG ABO血型抗體效價測定，嚴格按全國臨床檢驗操作規(guī)程（第三版）和凝聚胺試劑盒說明書操作：分別吸取待檢患者200μL血清和200μL，巰基乙醇加入試管中，混勻，然后放入37℃的水浴箱中孵育2h。取10支試管，分別編號為1～10號，并在每支試管中加入200μL 0.9%的生理鹽水，吸取孵育好的血清200μL加入1號試管中，然后倍比稀釋直到第10管。從第10管到第1管依次吸150μL棄用，每管留待檢血清50μL，再分別加入4%的相應(yīng)紅細胞懸液50μL、低離子介質(zhì)3滴，混勻，靜置30s后加凝聚胺1滴，混勻，3 500R／min離心15s，離心結(jié)束取出扣搖，肉眼可見明顯的凝集（若無凝集重做）；加假凝集清除液1滴于管底，輕搖，凝集1min內(nèi)消失呈均勻混懸液，為陰性，凝集1min內(nèi)不能被消除，即為陽性。出現(xiàn)陽性的最高稀釋度即為該患者IgG ABO血型抗體效價。（2）血型鑒定，用強生全自動血型分析儀檢測孕婦和新生兒血型。（3）統(tǒng)計學方法，實驗結(jié)果采用統(tǒng)計學軟件SPSS 11.5進行統(tǒng)計學分析，分別采用χ2檢驗、χ2分割法對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。

2 結(jié) 果

2.1 發(fā)病率 326名0型孕婦分娩的新生兒中，HDN患兒23例，總HDN發(fā)病率為7.1%。

2.2 母嬰ABO血型相合性與新生兒溶血病發(fā)生的關(guān)系 326例0型孕婦中，183例分娩的新生兒為母嬰ABO血型不合，23例HDN患兒全部分布在母嬰血型不合組，其HDN發(fā)病率為12.6%，遠高于母嬰血型相合組（0%），有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。

2.3 母嬰血型不合組孕期效價與新生兒溶血病發(fā)生的關(guān)系 183例母嬰ABO型不合的孕婦按孕期所檢測的抗體效價分組，其新生兒溶血病發(fā)病率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），且隨著效價增高，新生兒溶血病發(fā)病率呈增高趨勢。其中除效價32～64組與效價≥64組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余兩兩比較均有統(tǒng)計學差異（P＜0.01）。見表1。

表1 孕期效價與新生兒溶血病的發(fā)生

2.4 孕期效價動態(tài)檢測結(jié)果與新生兒溶血病發(fā)生的關(guān)系 183例母嬰ABO血型不合的孕婦中，僅有46例于孕期進行了IgG ABO血型抗體效價的動態(tài)監(jiān)測。此46例孕婦孕期效價動態(tài)監(jiān)測結(jié)果按變化趨勢分組，效價上升組的新生兒溶血病發(fā)病率明顯高于另外兩組，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 效價動態(tài)監(jiān)測與新生兒患有ABO溶血的關(guān)系

3 討 論

本資料結(jié)果進一步印證了ABO血型不合是HDN的主要致病因素，遠高于其他血型系統(tǒng)。HDN的發(fā)病與其母親孕期體內(nèi)的血型抗體效價高低明顯相關(guān)，且隨著母體孕期血型抗體效價增高，HDN的發(fā)生率也相應(yīng)增高，與以往相關(guān)文獻報道相符［3］?？贵w效價＜32與≥32相比較，其HDN發(fā)病率差異有顯著統(tǒng)計學意義，這也進一步確定HDN的發(fā)病與其母親體內(nèi)的血型抗體效價高低明顯相關(guān)，且母體孕期血型抗體效價＜32是一個相對安全的閾值。當然，影響HDN發(fā)病率及其嚴重程度的因素，除了母體孕期體內(nèi)的血型抗體濃度外，還有新生兒抗原的強弱、IgG血型抗體的亞類、胎盤的作用及胎兒體內(nèi)血型物質(zhì)的含量等因素。ABO抗原雖然在5～6周的胎兒身上已經(jīng)可以檢測出來，但直至出生其抗原發(fā)育仍不完全，無論在數(shù)量還是在質(zhì)量上都與成人紅細胞有著較大差距。每個新生兒紅細胞上只能結(jié)合很少IgG類ABO抗體（相對于每個紅細胞上幾十萬ABO抗原而言），并且存在個體差異，而紅細胞上結(jié)合IgG抗體數(shù)量的差異與溶血發(fā)生與否關(guān)系密切。其次新生兒溶血病嚴重程度強弱還與結(jié)合在胎兒紅細胞上的IgG血型抗體亞類相關(guān)。此外，IgG類抗體是通過胎盤絨毛膜上的IgG受體，主動吸收到胎兒血液循環(huán)中來的，吸收IgG抗體的速度以及亞類與IgG受體的數(shù)量和種類有關(guān)，因此胎盤對HDN的發(fā)病率及其嚴重程度也有影響。在某些胎兒（分泌型）的體液中還含有可溶性A或B物質(zhì)，這種物質(zhì)能中和抗A或抗B的抗體，從而保護胎兒紅細胞，起到阻止ABO新生兒溶血病的發(fā)生或緩解其臨床表現(xiàn)的作用［4］。這就解釋了為什么有些母體孕期血型抗體效價高，但其胎兒或新生兒卻并未患HDN。母體孕期抗體效價＜32時，也有少數(shù)HDN的發(fā)生，可能是因為孕婦在前期檢查時，還沒有受到過多的類紅細胞膜抗原的刺激，沒有形成大量的IgG抗體，而到后期時則受到此類抗原的刺激而母體產(chǎn)生抗體［5］。

理論上，單次孕期抗體效價的檢測因上述種種因素影響，對HDN發(fā)病的預測有一定的局限性，應(yīng)對孕期抗體效價進行動態(tài)監(jiān)測，以觀察母體抗體濃度的變化。但本文結(jié)果顯示雖然抗體效價上升組HDN發(fā)病率明顯高于抗體效價下降組和平穩(wěn)組，差異無統(tǒng)計學意義。這可能與完成動態(tài)監(jiān)測的孕婦例數(shù)過少有關(guān)。

［1］ 高峰，主編.臨床輸血與檢驗［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：109－111.

［2］ 李惠玲，廖小鳳，郭礦玲，等.孕婦產(chǎn)前免疫型IgG抗體效價檢測意義探討［J］.中國醫(yī)藥導報，2011，20（8）：142－143.

［3］ 陸莉，趙麗，李娟，等.485例0型血孕婦ABO血型抗體效價的檢測結(jié)果分析與新生兒溶血病的防治［J］.中國婦幼保健，2006，23（19）：2703－2707.

［4］ Mohamed H.Turner JN.Caggana M.Biochip for separating fetal cells from materal circulation［J］.J Chromatoar A，2007，1162（2）：187－192.

［5］ 楊秋娥，曾釗輝.320例0型血孕婦學期IgG抗A（B）抗體效價分析［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2012，12（9）.