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        不同菌劑處理對(duì)玉米芯發(fā)酵過(guò)程中纖維素降解及相關(guān)酶活性的影響

        2015-01-08 19:13:18鮮開(kāi)梅
        關(guān)鍵詞:酶活性發(fā)酵玉米芯

        鮮開(kāi)梅

        摘 要:以玉米芯為發(fā)酵原料,EM酵素菌、有機(jī)物料腐熟劑、金寶貝菌劑3種市售菌劑為發(fā)酵菌劑,研究了3種菌劑處理對(duì)玉米芯發(fā)酵過(guò)程中纖維素降解及相關(guān)酶活性的影響。結(jié)果表明,不同發(fā)酵菌劑處理后,纖維素降解酶的活性均增強(qiáng),玉米芯基質(zhì)中的纖維素、半纖維素降解率高于對(duì)照,其中EM酵素菌處理效果最佳;3種菌劑處理使木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性增強(qiáng),可有效提高玉米芯基質(zhì)中的木質(zhì)素降解率,其中金寶貝菌劑處理效果最佳,與對(duì)照相比降解率提高21.1%~50.5%。

        關(guān)鍵詞:菌劑;玉米芯;發(fā)酵;纖維素降解;酶活性;影響

        中圖分類(lèi)號(hào):Q815 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-3547(2014)22-0048-05

        育苗基質(zhì)是能為幼苗提供穩(wěn)定協(xié)調(diào)的水、氣、肥、結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)介質(zhì),是無(wú)土育苗的重要組成部分。大量被拋棄或燃燒的廢棄物經(jīng)過(guò)一定加工處理后可作為良好的環(huán)保型無(wú)土栽培有機(jī)基質(zhì)。近年來(lái),科研工作者利用各種農(nóng)業(yè)副產(chǎn)有機(jī)物及某些廢棄物研制合成了成本低、資源豐富、可再生的環(huán)保型無(wú)土栽培有機(jī)基質(zhì),在各園藝作物上栽培應(yīng)用效果良好。

        目前有機(jī)廢棄物的有效利用主要通進(jìn)行高溫好氧堆肥化處理,使堆肥原料中的不穩(wěn)定有機(jī)物形成性質(zhì)穩(wěn)定、對(duì)農(nóng)作物無(wú)害的堆肥產(chǎn)品。但堆肥速度與質(zhì)量依基質(zhì)種類(lèi)、發(fā)酵條件(發(fā)酵微生物、基質(zhì)C/N比、含水、氧量等)而不同,其中微生物菌劑與菌種的選擇是關(guān)系堆肥速度與質(zhì)量的重要因素。

        傳統(tǒng)秸稈堆肥通常都是采用改善環(huán)境條件或增加營(yíng)養(yǎng)的方法,往往存在發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng)、有臭味且肥效低等問(wèn)題[1,2],而且作物秸稈中含有大量成分復(fù)雜、難以被充分利用或被大多數(shù)微生物直接作為碳源物質(zhì)而轉(zhuǎn)化利用的木質(zhì)纖維素[3]。在發(fā)酵過(guò)程中,降解由易到難依次為:粗脂肪和碳水化合物>纖維素和半纖維素>木質(zhì)素。如何提高它們的分解速率、縮短發(fā)酵周期、提高降解率、得到穩(wěn)定的發(fā)酵產(chǎn)物是目前研究的難點(diǎn);木質(zhì)纖維素的生物降解成為生物技術(shù)處理作物秸稈的關(guān)鍵,也是近年的研究重點(diǎn)。

        目前研究表明[4~6],采用接種微生物菌劑或有效菌種處理秸稈堆肥,明顯地促進(jìn)了堆肥反應(yīng)進(jìn)程。陳華癸[7]教授曾指出,在堆肥過(guò)程中,進(jìn)行人為接種分解有機(jī)物能力強(qiáng)的微生物,可加速堆肥材料的腐熟,且形成利于消滅某些病原體、蟲(chóng)卵和雜草種子的高溫。秸稈堆肥發(fā)酵過(guò)程中,目前有采用單一菌株作為發(fā)酵劑的方法,也有采用高效復(fù)合菌劑作為發(fā)酵劑。此外,在堆肥發(fā)酵過(guò)程中加入木質(zhì)素分解菌以促進(jìn)木質(zhì)素這類(lèi)難降解有機(jī)物質(zhì)的分解,可有效縮短發(fā)酵時(shí)間,提高堆肥處理效果。

        玉米芯是玉米的副產(chǎn)品,新疆地區(qū)玉米資源豐富,每年經(jīng)過(guò)脫粒下的玉米芯,倘若經(jīng)過(guò)腐熟堆肥化作用后作為無(wú)土栽培基質(zhì),對(duì)資源的綜合利用和地方經(jīng)濟(jì)的發(fā)展有很大的促進(jìn)作用。

        1 材料與方法

        1.1 供試材料

        試驗(yàn)于2013年3月5日至12月10日在石河子大學(xué)農(nóng)學(xué)院試驗(yàn)站設(shè)施溫室內(nèi)進(jìn)行。以玉米芯為材料。試驗(yàn)采用的3種市售微生物菌劑分別是:EM酵素菌(購(gòu)于河南磐龍酵素菌生物工程有限公司);有機(jī)物料腐熟劑(購(gòu)于北京世紀(jì)阿姆斯生物技術(shù)有限公司);金寶貝菌劑(購(gòu)于北京華夏康源科技有限公司)。

        1.2 試驗(yàn)方法與處理

        試驗(yàn)采用堆肥化腐熟處理,堆置前將玉米芯粉碎至0.3~0.5 cm,玉米芯添加羊糞、尿素以及水等配料,調(diào)配至適宜的C/N比(30∶1)及控制總物料含水量為50%~60%,將預(yù)培養(yǎng)的菌劑均勻地與玉米芯基質(zhì)充分混合。試驗(yàn)共設(shè)置4個(gè)處理,詳見(jiàn)表1,以不添加發(fā)酵菌劑的處理為對(duì)照(CK)。隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),重復(fù)3次。堆體體積約直徑1.5 m,高0.8 m,堆體上覆蓋塑料薄膜進(jìn)行發(fā)酵。堆肥發(fā)酵期間每天14:00觀察堆體溫度,待堆體溫度達(dá)到65℃左右時(shí),及時(shí)翻堆并調(diào)整水分含量在50%~60%。在試驗(yàn)期間共取樣4次,依次為發(fā)酵后0,10,20,30 d,取各處理堆體中心部位處基質(zhì)100 g作為樣品,帶回實(shí)驗(yàn)室使其自行風(fēng)干后進(jìn)行理化性質(zhì)的測(cè)定。待堆體溫度與環(huán)境溫度基本一致、發(fā)酵物料變成深褐色、無(wú)惡臭味時(shí)結(jié)束。

        1.3 測(cè)定內(nèi)容及方法

        ①纖維素、半纖維素、木質(zhì)素含量的測(cè)定 發(fā)酵結(jié)束后取發(fā)酵樣品烘干至恒重,參考賀明娟等[8]的方法分析其中纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的含量,結(jié)合初始發(fā)酵物料中各纖維類(lèi)組分的含量,分別計(jì)算纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的降解率。

        ②酶液提取 隔5 d取2.0 g發(fā)酵的固體基質(zhì),用12 mL雙蒸水于4°C浸提甘草渣固體培養(yǎng)物過(guò)夜,200 r/min振蕩提取1 h,轉(zhuǎn)移提取液;再用

        4 mL雙蒸水,于200 r/min振蕩提取15 min,重復(fù)一次,完全轉(zhuǎn)移、合并提取液,4°C保存待測(cè)酶活性。

        ③酶活性測(cè)定 a.木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(LiP)活力測(cè)定。取0.2 mL藜蘆醇溶液(10 mmol/L)、0.4 mL酒石酸緩沖液(250 mmol/L,pH值3.0)與0.4 mL粗酶液混勻,即得1 mL反應(yīng)液。在30℃下,往此反應(yīng)液中加20 μL H2O2溶液(20 mmol/L)啟動(dòng)酶促反應(yīng),并在310 nm波長(zhǎng)下測(cè)定反應(yīng)1 min前后的反應(yīng)液吸光度變化。一個(gè)酶活力單位(U)定義為每1 min氧化藜蘆醇產(chǎn)生1 μmol藜蘆醛所需的酶量。

        b.漆酶(Lac)活力的測(cè)定。采用ABTS 法,反應(yīng)液在30℃保溫3 min ,后在波長(zhǎng)420 nm 處測(cè)定吸光值的增加。將在100℃煮沸15 min 的酶液作為陰性對(duì)照。酶活力單位定義為反應(yīng)體系中每1 min引起0.1個(gè)吸光度增加所需的酶量。

        c.纖維素酶(FP)活力的測(cè)定。取0.5 mL的酶液,加入1 mL 1% CMC-Na溶液,混勻,50℃水浴15 min,加入2 mL DNS 煮沸10 min,流水冷卻,加蒸餾水定容至10 mL,混勻,測(cè)OD540值。對(duì)照:在0.5 mL稀釋酶液加入1 mL 1% CMC-Na溶液,再加入2 mL DNS煮沸10 min,流水冷卻,加蒸餾水定容至10 mL,混勻,測(cè)OD540值。酶活力定義為每1 min產(chǎn)生1 μmol的葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活力單位。

        d.羥甲基纖維素酶(CMC)、木聚糖酶活性測(cè)定。采用DNS法。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        數(shù)據(jù)取平均值,采用 Excel 2003和DPS 7.5軟件進(jìn)行處理,并進(jìn)行Duncan's多重比較。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中纖維素、半纖維素降解率的變化

        ①纖維素降解率 由圖1可知,經(jīng)過(guò)30 d的發(fā)酵培養(yǎng),3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的纖維素均有不同程度降解。在發(fā)酵10 d測(cè)得,T1、T2和T3的纖維素降解率為12.3%、15.8%和15.4%,分別比對(duì)照的12.1%高1.7%、30.6%

        和25.6%,T2和T3與對(duì)照相比差異顯著。在發(fā)酵20 d測(cè)得,T1、T2和T3的纖維素降解率為26.6%、25.7%和23.7%,分別比對(duì)照的18.6%高43.0%、38.2%和37.6%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T1和T2之間無(wú)顯著差異。在發(fā)酵30 d測(cè)得,T1、T2和T3的纖維素降解率為44.4%、34.4%和36.3%,分別比對(duì)照的24.9%高78.30%、38.2%和45.8%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T2和T3之間無(wú)顯著差異。說(shuō)明3種菌種處理可有效地提高玉米芯基質(zhì)的纖維素降解率,T1效果最佳。

        ②半纖維素降解率 從圖2可看出,半纖維素隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)降解趨勢(shì)與纖維素一致。經(jīng)過(guò)30 d的發(fā)酵培養(yǎng),3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的半纖維素均有不同程度的降解。在發(fā)酵10 d測(cè)得,T1、T2和T3的半纖維素降解率為24.3%、20.0%和23.1%,分別比對(duì)照的13.8%高76.1%、44.9%和67.4%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T1和T3間無(wú)顯著差異,但與T2差異顯著。在發(fā)酵20 d測(cè)得,T1、T2和T3的半纖維素降解率為35.3%、28.5%和34.5%,分別比對(duì)照的23.3%高51.5%、22.3%和48.1%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T1和T3之間無(wú)顯著差異,但與T2差異顯著。在發(fā)酵30 d測(cè)得,T1、T2和T3的半纖維素降解率為48.9%、43.9%和42.1%,分別比對(duì)照的35.8%高36.6%、22.6%和17.6%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T2和T3之間無(wú)顯著差異,但與T1達(dá)到顯著差異。說(shuō)明3種菌種處理均可有效提高玉米芯基質(zhì)的半纖維素降解率,其中T1效果最佳。

        2.2 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中木質(zhì)素降解率的變化

        由圖3可知,3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的木質(zhì)素均有不同程度的降解。在發(fā)酵10 d測(cè)得,T1、T2和T3的木質(zhì)素降解率為12.2%、12.4%和15.9%,分別比對(duì)照的11.1%高9.9%、10.9%和43.2%,T1和T2與對(duì)照相比無(wú)顯著差異,T3與對(duì)照之間差異顯著。在發(fā)酵20 d測(cè)得,T1、T2和T3的木質(zhì)素降解率為16.0%、18.3%和25.1%,分別比對(duì)照的15.2%高5.3%、20.4%和65.1%,T1與對(duì)照相比無(wú)明顯差異,T1、T2和T3之間差異顯著。在發(fā)酵30 d測(cè)得,T1、T2和T3的木質(zhì)素降解率為25.1%、24.6%和29.5%,分別比對(duì)照的19.6%高28.1%、25.5%和50.5%,T1、T2和T3與對(duì)照相比差異顯著,T1、T2和T3之間差異顯著。說(shuō)明3種菌種處理均可有效提高玉米芯基質(zhì)的木質(zhì)素降解率,其中T3效果最佳,T1次之。

        2.3 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中纖維素降解酶活性的變化

        ①纖維素酶 從圖4可以看出,纖維素酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~10 d的時(shí)間,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,纖維素酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的纖維素酶活性均高于對(duì)照,T1活性最強(qiáng),與對(duì)照相比提高36.1%,與其他各處理之間差異明顯,且T1的纖維素酶活性在發(fā)酵10 d時(shí)表現(xiàn)為峰值,為7.2 U/L,其他各處理均在20 d時(shí)出現(xiàn)峰值,之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),纖維素酶活性開(kāi)始緩慢降低,發(fā)酵

        30 d測(cè)得各處理之間無(wú)明顯差異。

        ②羥甲基纖維素酶 從圖5可以看出,羥甲基纖維素酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~10 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,羥甲基纖維素酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的羥甲基纖維素酶活性均高于對(duì)照,T1活性最強(qiáng),與對(duì)照相比提高26.3%,與其他各處理之間差異明顯。T1和T2的羥甲基纖維素酶活性在發(fā)酵10 d時(shí)表現(xiàn)為峰值,分別為227.7 U/L和179.6 U/L。T3和CK處理均在20 d時(shí)出現(xiàn)峰值,之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),羥甲基纖維素酶活性開(kāi)始迅速降低,發(fā)酵30 d測(cè)得各處理的羥甲基纖維素酶活性表現(xiàn)為最低,各處理之間無(wú)明顯差異。

        2.4 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中木質(zhì)素降解酶活性的變化

        ①木質(zhì)素過(guò)氧化物酶 從圖6可以看出,在0~30 d,除對(duì)照的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性變化不明顯外,各發(fā)酵處理木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。在0~10 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,各處理木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性均高于對(duì)照,T1、T2和T3分別較對(duì)照提高125.4%、50.1%和175.1%。T3活性最強(qiáng),在發(fā)酵20 d后達(dá)到峰值,與對(duì)照相比提高362.5%,且與其他各處理間差異明顯,之后迅速下降,在發(fā)酵30 d后測(cè)得的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性仍高于其他各處理,且差異明顯,T1和T2與對(duì)照之間無(wú)明顯差異。

        ②漆酶 如圖7所示,在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中對(duì)照和各處理漆酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,漆酶活性逐漸增強(qiáng),在0~10 d增加迅速,之后T3的漆酶活性仍保持較高速度的增長(zhǎng),在發(fā)酵20 d時(shí)CK、T1和T3的漆酶活性均達(dá)到最大值,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的漆酶活性均高于對(duì)照,T3活性明顯高于CK、 T1和T2。之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),漆酶活性開(kāi)始急劇降低,發(fā)酵30 d測(cè)得T3處理漆酶活性高于其他各處理,但各處理之間無(wú)明顯差異。

        2.5 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中木聚糖酶活性的變化

        從圖8中可以看出,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,在試驗(yàn)過(guò)程中,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照差異均不明顯。且各處理的木聚糖酶活性在發(fā)酵20 d時(shí)表現(xiàn)為峰值,之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),木聚糖酶活性開(kāi)始急劇下降,發(fā)酵30 d測(cè)得T1的木聚糖酶活性表現(xiàn)為最低。

        3 結(jié)論與討論

        本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,不同發(fā)酵菌劑處理下,玉米芯中半纖維素的降解率普遍高于纖維素的降解率,說(shuō)明所用菌種(劑)對(duì)半纖維素都具有較強(qiáng)的降解能力,玉米芯中半纖維素比較容易降解。

        本研究結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)30 d的發(fā)酵培養(yǎng),3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的纖維素均有不同程度的降解,說(shuō)明3種菌種處理可有效的提高玉米芯基質(zhì)的纖維素降解率,其中T1效果最佳。同時(shí),3種菌種處理也均可有效地提高玉米芯基質(zhì)的木質(zhì)素降解率,其中T3效果最佳,T1次之。研究結(jié)果表明,通過(guò)利用木質(zhì)素優(yōu)良降解菌和纖維素優(yōu)良降解菌混合發(fā)酵降解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的降解工藝是可行的,有一定的實(shí)用性。這種共降解工藝為甘草渣的生物降解提供了一種新途徑。同時(shí)利用市場(chǎng)上現(xiàn)售菌劑對(duì)玉米芯進(jìn)行降解,也具有一定的實(shí)用性,加快了玉米芯發(fā)酵進(jìn)程,縮短了發(fā)酵時(shí)間。

        真菌分解木質(zhì)素主要是依靠一個(gè)復(fù)雜的胞外過(guò)氧化酶系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要由木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(Lignin Peroxidase/LiP)、錳過(guò)氧化物酶(Manganases Peroxidase/MnP)和漆酶(Laccase/Lac)3種酶構(gòu)成。白腐菌是少數(shù)的能選擇性降解木質(zhì)素的真菌之一,它們通過(guò)分泌木質(zhì)素降解酶系的主要成分等胞外氧化酶來(lái)降解木質(zhì)素。在3種不同處理下的發(fā)酵過(guò)程中分別取樣進(jìn)行木質(zhì)素過(guò)氧化物酶、漆酶的測(cè)定,結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵時(shí)間內(nèi),除對(duì)照的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性變化不明顯外,各發(fā)酵處理木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì);在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性均高于對(duì)照;在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中對(duì)照和各處理漆酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),發(fā)酵30 d測(cè)得T3處理漆酶活性高于其他各處理,但各處理之間無(wú)顯著差異。以上結(jié)果說(shuō)明,在玉米芯發(fā)酵過(guò)程中,金寶貝微生物菌劑能促進(jìn)基質(zhì)中木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性和漆酶活性的增強(qiáng),促進(jìn)基質(zhì)腐熟,使有機(jī)物料釋放大量的養(yǎng)分。

        木聚糖是植物細(xì)胞的一種主要的結(jié)構(gòu)多糖,是自然界含量位居第2位的多糖,占地球上約1/3的可再生有機(jī)碳源,是半纖維素的主要成分,木聚糖酶是一類(lèi)水解酶,可以將木聚糖降解成低聚木糖和木糖。本研究結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵過(guò)程中,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照無(wú)明顯差異。

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        [1] 李國(guó)學(xué),張福鎖.固體廢物堆肥化與有機(jī)復(fù)混肥生產(chǎn)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.

        [2] Bernheisel J F. What's the status of municipal solid waste composting?[J]. Resource Recycling, 1999, 14(10): 64-74.

        [3] 鄒儀明.植物纖維素化學(xué)(第2版)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,1995,152-154.

        [4] VanderGheynst J S, VanderGheynst G B, Walker L P. Measuring oxygen in composting piles[J]. Biocycle, 1997, 38(10): 72-84.

        [5] Chen Z, Huang G H, Chakma A. A screening approach for decision analysis of composting actions-a Canadian case study[C]. Saskatoon Canada: The 49th Annual CSCHE Conference, 1999.

        [6] Vuorinen A H, Saharinen M H. Evolution of microbiological and chemical parameters during manure and straw co-composting in a drum composting system [J]. Agriculture, Ecosystems and Environment, 1997, 66: 19-29.

        [7] 陳華癸.微生物學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1979.

        [8] 賀明娟,韓廣泉,劉慧英.不同菌種對(duì)甘草渣降解的影響研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(4):805-809.

        2.5 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中木聚糖酶活性的變化

        從圖8中可以看出,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,在試驗(yàn)過(guò)程中,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照差異均不明顯。且各處理的木聚糖酶活性在發(fā)酵20 d時(shí)表現(xiàn)為峰值,之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),木聚糖酶活性開(kāi)始急劇下降,發(fā)酵30 d測(cè)得T1的木聚糖酶活性表現(xiàn)為最低。

        3 結(jié)論與討論

        本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,不同發(fā)酵菌劑處理下,玉米芯中半纖維素的降解率普遍高于纖維素的降解率,說(shuō)明所用菌種(劑)對(duì)半纖維素都具有較強(qiáng)的降解能力,玉米芯中半纖維素比較容易降解。

        本研究結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)30 d的發(fā)酵培養(yǎng),3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的纖維素均有不同程度的降解,說(shuō)明3種菌種處理可有效的提高玉米芯基質(zhì)的纖維素降解率,其中T1效果最佳。同時(shí),3種菌種處理也均可有效地提高玉米芯基質(zhì)的木質(zhì)素降解率,其中T3效果最佳,T1次之。研究結(jié)果表明,通過(guò)利用木質(zhì)素優(yōu)良降解菌和纖維素優(yōu)良降解菌混合發(fā)酵降解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的降解工藝是可行的,有一定的實(shí)用性。這種共降解工藝為甘草渣的生物降解提供了一種新途徑。同時(shí)利用市場(chǎng)上現(xiàn)售菌劑對(duì)玉米芯進(jìn)行降解,也具有一定的實(shí)用性,加快了玉米芯發(fā)酵進(jìn)程,縮短了發(fā)酵時(shí)間。

        真菌分解木質(zhì)素主要是依靠一個(gè)復(fù)雜的胞外過(guò)氧化酶系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要由木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(Lignin Peroxidase/LiP)、錳過(guò)氧化物酶(Manganases Peroxidase/MnP)和漆酶(Laccase/Lac)3種酶構(gòu)成。白腐菌是少數(shù)的能選擇性降解木質(zhì)素的真菌之一,它們通過(guò)分泌木質(zhì)素降解酶系的主要成分等胞外氧化酶來(lái)降解木質(zhì)素。在3種不同處理下的發(fā)酵過(guò)程中分別取樣進(jìn)行木質(zhì)素過(guò)氧化物酶、漆酶的測(cè)定,結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵時(shí)間內(nèi),除對(duì)照的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性變化不明顯外,各發(fā)酵處理木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì);在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性均高于對(duì)照;在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中對(duì)照和各處理漆酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),發(fā)酵30 d測(cè)得T3處理漆酶活性高于其他各處理,但各處理之間無(wú)顯著差異。以上結(jié)果說(shuō)明,在玉米芯發(fā)酵過(guò)程中,金寶貝微生物菌劑能促進(jìn)基質(zhì)中木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性和漆酶活性的增強(qiáng),促進(jìn)基質(zhì)腐熟,使有機(jī)物料釋放大量的養(yǎng)分。

        木聚糖是植物細(xì)胞的一種主要的結(jié)構(gòu)多糖,是自然界含量位居第2位的多糖,占地球上約1/3的可再生有機(jī)碳源,是半纖維素的主要成分,木聚糖酶是一類(lèi)水解酶,可以將木聚糖降解成低聚木糖和木糖。本研究結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵過(guò)程中,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照無(wú)明顯差異。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 李國(guó)學(xué),張福鎖.固體廢物堆肥化與有機(jī)復(fù)混肥生產(chǎn)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.

        [2] Bernheisel J F. What's the status of municipal solid waste composting?[J]. Resource Recycling, 1999, 14(10): 64-74.

        [3] 鄒儀明.植物纖維素化學(xué)(第2版)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,1995,152-154.

        [4] VanderGheynst J S, VanderGheynst G B, Walker L P. Measuring oxygen in composting piles[J]. Biocycle, 1997, 38(10): 72-84.

        [5] Chen Z, Huang G H, Chakma A. A screening approach for decision analysis of composting actions-a Canadian case study[C]. Saskatoon Canada: The 49th Annual CSCHE Conference, 1999.

        [6] Vuorinen A H, Saharinen M H. Evolution of microbiological and chemical parameters during manure and straw co-composting in a drum composting system [J]. Agriculture, Ecosystems and Environment, 1997, 66: 19-29.

        [7] 陳華癸.微生物學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1979.

        [8] 賀明娟,韓廣泉,劉慧英.不同菌種對(duì)甘草渣降解的影響研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(4):805-809.

        2.5 不同菌種處理下玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中木聚糖酶活性的變化

        從圖8中可以看出,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,在試驗(yàn)過(guò)程中,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照差異均不明顯。且各處理的木聚糖酶活性在發(fā)酵20 d時(shí)表現(xiàn)為峰值,之后隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),木聚糖酶活性開(kāi)始急劇下降,發(fā)酵30 d測(cè)得T1的木聚糖酶活性表現(xiàn)為最低。

        3 結(jié)論與討論

        本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,不同發(fā)酵菌劑處理下,玉米芯中半纖維素的降解率普遍高于纖維素的降解率,說(shuō)明所用菌種(劑)對(duì)半纖維素都具有較強(qiáng)的降解能力,玉米芯中半纖維素比較容易降解。

        本研究結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)30 d的發(fā)酵培養(yǎng),3種不同菌種處理下的玉米芯基質(zhì)發(fā)酵過(guò)程中的纖維素均有不同程度的降解,說(shuō)明3種菌種處理可有效的提高玉米芯基質(zhì)的纖維素降解率,其中T1效果最佳。同時(shí),3種菌種處理也均可有效地提高玉米芯基質(zhì)的木質(zhì)素降解率,其中T3效果最佳,T1次之。研究結(jié)果表明,通過(guò)利用木質(zhì)素優(yōu)良降解菌和纖維素優(yōu)良降解菌混合發(fā)酵降解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的降解工藝是可行的,有一定的實(shí)用性。這種共降解工藝為甘草渣的生物降解提供了一種新途徑。同時(shí)利用市場(chǎng)上現(xiàn)售菌劑對(duì)玉米芯進(jìn)行降解,也具有一定的實(shí)用性,加快了玉米芯發(fā)酵進(jìn)程,縮短了發(fā)酵時(shí)間。

        真菌分解木質(zhì)素主要是依靠一個(gè)復(fù)雜的胞外過(guò)氧化酶系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要由木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(Lignin Peroxidase/LiP)、錳過(guò)氧化物酶(Manganases Peroxidase/MnP)和漆酶(Laccase/Lac)3種酶構(gòu)成。白腐菌是少數(shù)的能選擇性降解木質(zhì)素的真菌之一,它們通過(guò)分泌木質(zhì)素降解酶系的主要成分等胞外氧化酶來(lái)降解木質(zhì)素。在3種不同處理下的發(fā)酵過(guò)程中分別取樣進(jìn)行木質(zhì)素過(guò)氧化物酶、漆酶的測(cè)定,結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵時(shí)間內(nèi),除對(duì)照的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性變化不明顯外,各發(fā)酵處理木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì);在發(fā)酵10 d后測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性均高于對(duì)照;在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中對(duì)照和各處理漆酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),發(fā)酵30 d測(cè)得T3處理漆酶活性高于其他各處理,但各處理之間無(wú)顯著差異。以上結(jié)果說(shuō)明,在玉米芯發(fā)酵過(guò)程中,金寶貝微生物菌劑能促進(jìn)基質(zhì)中木質(zhì)素過(guò)氧化物酶活性和漆酶活性的增強(qiáng),促進(jìn)基質(zhì)腐熟,使有機(jī)物料釋放大量的養(yǎng)分。

        木聚糖是植物細(xì)胞的一種主要的結(jié)構(gòu)多糖,是自然界含量位居第2位的多糖,占地球上約1/3的可再生有機(jī)碳源,是半纖維素的主要成分,木聚糖酶是一類(lèi)水解酶,可以將木聚糖降解成低聚木糖和木糖。本研究結(jié)果表明,在0~30 d的發(fā)酵過(guò)程中,木聚糖酶活性表現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在0~20 d,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,木聚糖酶活性逐漸增強(qiáng),在發(fā)酵20 d后急劇下降,測(cè)得3種添加菌劑的玉米芯基質(zhì)中的木聚糖酶活性與對(duì)照無(wú)明顯差異。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 李國(guó)學(xué),張福鎖.固體廢物堆肥化與有機(jī)復(fù)混肥生產(chǎn)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.

        [2] Bernheisel J F. What's the status of municipal solid waste composting?[J]. Resource Recycling, 1999, 14(10): 64-74.

        [3] 鄒儀明.植物纖維素化學(xué)(第2版)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,1995,152-154.

        [4] VanderGheynst J S, VanderGheynst G B, Walker L P. Measuring oxygen in composting piles[J]. Biocycle, 1997, 38(10): 72-84.

        [5] Chen Z, Huang G H, Chakma A. A screening approach for decision analysis of composting actions-a Canadian case study[C]. Saskatoon Canada: The 49th Annual CSCHE Conference, 1999.

        [6] Vuorinen A H, Saharinen M H. Evolution of microbiological and chemical parameters during manure and straw co-composting in a drum composting system [J]. Agriculture, Ecosystems and Environment, 1997, 66: 19-29.

        [7] 陳華癸.微生物學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1979.

        [8] 賀明娟,韓廣泉,劉慧英.不同菌種對(duì)甘草渣降解的影響研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(4):805-809.

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