鄧 娟 ，王延花，孫 菁，葉潤(rùn)蓉，盧學(xué)峰，袁園園，彭 敏，周玉碧

1中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所 青海省青藏高原特色生物資源研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西寧 810008;2中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 100049;3 青海省環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站，西寧 810001

鐮萼喉毛花［Comastoma falcatum (Turcz.ex Kar.et Kir.)Toyokuni］與長(zhǎng)梗喉毛花［Comastoma pedunlulatum (Rogle et D.Dou)Holub］均為龍膽科(Gentianacese)喉毛花屬(Comastoma)植物。兩種喉毛花都生長(zhǎng)于海拔3200～4420 m 的河灘、沼澤草甸、高山草甸等環(huán)境中，在我國(guó)主要分布在西藏、青海、甘肅、四川北部［1］，均具有利濕祛痰［2］、清熱解毒、舒肝利膽［3］等功效。在青藏高原地區(qū)，長(zhǎng)梗喉毛花的干燥全草可作為藏茵陳使用［4］，主要用于治療肝炎、膽結(jié)石［5］等由病毒和細(xì)菌引起的各種疾病。

多種礦質(zhì)元素是維持機(jī)體某些特殊生理功能的重要成分或是多種酶系的激活劑的組成部分，在維持機(jī)體正常的能量轉(zhuǎn)換和新陳代謝等方面發(fā)揮著極其重要的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道［6］，中藥的藥性、功效及作用機(jī)理與其含有的礦質(zhì)元素有著一定的相關(guān)性。同時(shí)，礦質(zhì)元素對(duì)藥材的的道地性質(zhì)量起到一定的作用［7］。中藥礦質(zhì)元素的研究可為闡明中藥性能及藥理、營(yíng)養(yǎng)作用等方面提供一定的科學(xué)依據(jù)。

電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP-OES)具有同時(shí)測(cè)定多種元素、分析速度快、檢出限低、準(zhǔn)確度高、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)［8，9］。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)長(zhǎng)梗喉毛花的研究主要集中于化學(xué)成分和藥理作用方面［10-12］，對(duì)長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花全草中礦質(zhì)元素的測(cè)定分析尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究采用ICP-OES法對(duì)長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花中的21 種礦質(zhì)元素含量進(jìn)行分析測(cè)定，為兩種喉毛花的進(jìn)一步研究及合理利用提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

21 種元素混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液100 mg/L(國(guó)家環(huán)?？偩謽?biāo)準(zhǔn)樣品研究中心);鹽酸、高氯酸、硝酸、氫氟酸均為優(yōu)級(jí)純(購(gòu)自西安化學(xué)試劑廠);實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。

1.2 儀器與設(shè)備

Optima 7000DV 電感耦合等離子發(fā)射光譜儀(美國(guó)Perkin Elmer 公司);微波消解儀(CEM，美國(guó)CEM 公司);VB20 型趕酸裝置(美國(guó)Lab Tech 公司)。

1.3 測(cè)定條件

ICP-OES 儀器工作參數(shù)如下:射頻功率1300 W，冷卻氣流量0.8 L/min，輔助氣流量0.2 L/min，載氣流量15 L/min。各元素分析測(cè)定波長(zhǎng)見(jiàn)表1。

表1 元素的分析波長(zhǎng)Table 1 Detection wavelength of tested elements

1.4 樣品來(lái)源

試驗(yàn)材料采自青海省祁連縣扎麻什鄉(xiāng)，采集全草，除去雜物。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)混勻，淋洗，陰干后置40℃恒溫烘箱中烘干48 h 至恒量，粉碎，過(guò)80 目篩，待用。原植物標(biāo)本經(jīng)中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所盧學(xué)峰副研究員鑒定為龍膽科(Gentianacese)喉毛花屬植物鐮萼喉毛花［Comastoma falcatum(Turcz.ex Kar.et Kir.)Toyokuni］和長(zhǎng)梗喉毛花［Comastoma pedunlulatum (Rogle et D.Dou)Holub］。

1.5 樣品處理

準(zhǔn)確稱取0.4000 g 樣品，置于微波消解罐中，然后加入2.0 mL HCl，6.0 mL HNO3和2.0 mL HF，加蓋密封，放入微波消解爐中。采用三階段消解控制方法，具體消解工作條件見(jiàn)表2。按工作條件表消解樣品，待冷卻至室溫后，將消解罐放入趕酸裝置繼續(xù)加熱趕酸，待酸趕盡，轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶中，定容。同時(shí)制備全程序試劑空白溶液和加標(biāo)樣品。

表2 微波消解工作條件Table 2 Working conditions of microwave digestion

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

于100 mL 容量瓶中精密吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用1%硝酸稀釋配制成濃度為0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列，定容，搖勻。以標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度(mg/mL)與相應(yīng)元素的發(fā)射強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，各待測(cè)元素標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表3。可得相關(guān)系數(shù)r 的范圍為0.9990～0.9999，說(shuō)明各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線具有良好的線性關(guān)系。

表3 21 種元素線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限Table 3 Linear regression equations of elements and detection limits

2.2 加標(biāo)回收率試驗(yàn)

取鐮萼喉毛花樣品進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)，對(duì)加標(biāo)后的同一份樣品進(jìn)行3 次重復(fù)測(cè)定(見(jiàn)表4)。結(jié)果顯示21 種礦質(zhì)元素的加標(biāo)回收率在86%～108%，說(shuō)明方法準(zhǔn)確。

表4 鐮萼喉毛花樣品回收率測(cè)定結(jié)果Table 4 The recovery of standard addition of C.falcatum

2.3 樣品的測(cè)定

對(duì)長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花的樣品進(jìn)行三次測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表5。根據(jù)測(cè)定結(jié)果(表5)，長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花中共檢出20 種礦質(zhì)元素。其中，長(zhǎng)梗喉毛花檢出20 種，鐮萼喉毛花檢出19 種，Cd 元素在兩者中均未檢出，Co 元素只在鐮萼喉毛花中未檢出。檢出礦物質(zhì)元素含量的RSD 值在0.11%～4.48%，表明測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

表5 長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花中21 種無(wú)機(jī)元素的含量(n=3)Table 5 Contents of tested elements in C.pedunlulatum and C.falcatum (n=3)

2.4 元素含量比較分析

長(zhǎng)梗喉毛花中檢出礦物質(zhì)元素含量高低依次為Fe ＞Ca ＞Mg ＞Ti ＞Mn ＞Zn ＞Sr ＞Cr ＞Se ＞Cu ＞Li＞Tl ＞V ＞As ＞Ni ＞Pb ＞Sb ＞Be ＞Mo ＞Co。其中，F(xiàn)e、Ca、Mg 等三種元素在長(zhǎng)梗喉毛花中含量相對(duì)最高，Co、Mo、Be 等三種元素在長(zhǎng)梗喉毛花中含量相對(duì)最低。

鐮萼喉毛花中檢出礦物質(zhì)元素含量大小依次為Ca ＞Mg ＞Fe ＞Ti ＞Zn ＞Se ＞Mn ＞Tl ＞Cr ＞As ＞Sr＞Cu ＞Pb ＞Li ＞V ＞Be ＞Sb ＞Ni ＞Mo。其中，Ca、Mg、Fe 等三種元素在鐮萼喉毛花中含量相對(duì)最高，Sb、Ni、Mo 等三種元素在鐮萼喉毛花中含量相對(duì)最低。

兩種喉毛花中Ca、Mg、Fe 三種元素的含量均較高。這三種元素均為人體所必需礦質(zhì)元素。Ca、Mg兩種元素是骨骼和牙齒生長(zhǎng)發(fā)育所需元素，具有保護(hù)血管透性和彈性的功能［13］;Fe 元素是血紅蛋白與肌紅蛋白的組成部分，參與氧的運(yùn)輸和貯存。有人測(cè)定了37 例肝癌患者的頭發(fā)中鐵的含量，發(fā)現(xiàn)顯著低于健康人，說(shuō)明肝癌患者體內(nèi)缺鐵［14］，這與兩種喉毛花具有的舒肝利膽之功效相符。

檢出的19 種共有礦質(zhì)元素中，Ca、Mg 兩種元素是人體中的常量元素［15］，F(xiàn)e、Zn、Se、Mn、Cr、Cu、V、Ni、Mo 等9 種元素為人體所需微量元素［16］。兩種喉毛花中常量和微量元素含量的比較結(jié)果見(jiàn)圖1。從圖1 可以看出，除Se 元素外，其他的10 種常量、微量元素在長(zhǎng)梗喉毛花中含量均高于在鐮萼喉毛花中的含量。

據(jù)中國(guó)藥典(2010 版)記載［17］，重金屬主要包括Pb、Cd、Cu、As、Hg 等。重金屬元素在長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花中檢出Pb、Cu、As 等3 種，且這三種元素在兩種喉毛花中的含量相對(duì)較低。Pb、As 兩種重金屬元素在鐮萼喉毛花中的均含量高于在長(zhǎng)梗喉毛花中的含量(見(jiàn)圖2)，而Cu 元素在兩種喉毛花中的含量呈相反趨勢(shì)。

圖1 兩種喉毛花中11 種常量、微量元素含量的高低趨勢(shì)Fig.1 The contents trend of major elements and trace elements in two species of Comastoma

圖2 兩種喉毛花中重金屬元素含量的高低趨勢(shì)Fig.2 The contents trend of heavy metals in two species of Comastoma

3 結(jié)論

通過(guò)ICP-OES 法分析測(cè)定了長(zhǎng)梗喉毛花和鐮萼喉毛花中的21 種礦質(zhì)元素，建立了兩種喉毛花中礦物元素的分析測(cè)定方法。該方法線性關(guān)系良好，r≥0.9990，各元素的檢出限均低于0.0036 mg/L，加標(biāo)回收率在86%～108%，RSD 值小于4.48%，表明該方法的檢出限低，精密度高，具有良好的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

對(duì)兩種喉毛花中21 種礦質(zhì)元素含量進(jìn)行比較分析，結(jié)果表明:Ca、Mg、Fe 三種元素在兩種喉毛花中的含量均較高。兩種喉毛花中檢出的11 種常量、微量元素中，除Se 元素外，其他的10 種常量、微量元素在長(zhǎng)梗喉毛花中含量均高于在鐮萼喉毛花中的含量。對(duì)于檢出的Pb、Cu、As 等3 種重金屬元素，Pb、As 兩種元素在鐮萼喉毛花中的均含量高于在長(zhǎng)梗喉毛花中的含量，而Cu 元素則相反。本研究為兩種喉毛花的進(jìn)一步研究及科學(xué)合理利用提供參考依據(jù)。

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