吳國梁,李 娜,肖國強(qiáng)

(1.廣西科技師范學(xué)院體育學(xué)院,廣西來賓546199；2.華南師范大學(xué)體育科學(xué)學(xué)院,廣東廣州510631)

16周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者肝功能和血清膽紅素的影響*

吳國梁1,李 娜1,肖國強(qiáng)2

(1.廣西科技師范學(xué)院體育學(xué)院,廣西來賓546199；2.華南師范大學(xué)體育科學(xué)學(xué)院,廣東廣州510631)

通過觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者膽紅素的影響,探討有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD的作用機(jī)制。得出：中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)能有效消耗體脂,降低NAFLD患者體重和BMI指數(shù),改善肝損傷和血脂代謝紊亂；NAFLD患者的高膽紅素血癥主要是由脂代謝紊亂引起的氧應(yīng)激導(dǎo)致血紅蛋白生成增加所致；有氧運(yùn)動(dòng)可通過改善NAFLD患者脂代謝,降低血紅蛋白、血清膽紅素水平,對(duì)于促進(jìn)肝細(xì)胞功能障礙和損傷的恢復(fù)有效。

有氧運(yùn)動(dòng)；飲食控制；膽紅素；血紅蛋白

血清膽紅素水平是衡量肝臟功能的重要指標(biāo)之一,在非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)發(fā)病過程中常伴隨膽紅素偏高的問題。以有氧運(yùn)動(dòng)為基礎(chǔ)治療手段的綜合治療是目前NAFLD病最有效的治療方法。相關(guān)研究成果顯示,中等運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度可以有效減輕體重,降低體脂,改善組織細(xì)胞的氧供應(yīng),是大多研究者采用的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度。目前對(duì)NAFLD運(yùn)動(dòng)療法的相關(guān)研究較多,但關(guān)于有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者膽紅素影響的相關(guān)研究卻不多,對(duì)其機(jī)制、臨床意義及有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)其影響尚不清楚。本研究通過對(duì)NAFLD患者進(jìn)行16周的中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)和飲食控制,觀察有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者膽紅素的影響,探討有氧運(yùn)動(dòng)在NAFLD治療中的作用機(jī)制,為臨床上非酒精性脂肪肝的預(yù)防與治療提供新的研究思路和方向。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)抽取柳州自來水公司患非酒精性脂肪肝志愿者24人,嚴(yán)格按照非酒精性脂肪性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選。通過醫(yī)學(xué)檢查和問卷調(diào)查無嚴(yán)重心腦血管病、腎臟病、嚴(yán)重的高血壓病和運(yùn)動(dòng)禁忌癥,年齡(40±5),體重(82±8 Kg),其中女性6人,多為輕中度患者,患病時(shí)間5-15年不等,所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象在本實(shí)驗(yàn)前6個(gè)月均無指導(dǎo)性規(guī)律運(yùn)動(dòng)。

1.2 研究方法

1.2.1 運(yùn)動(dòng)方案及飲食

采取健步走和太極拳綜合練習(xí)。運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度為中等,心率保持在60%～70%HRmax(HRmax=220-年齡),運(yùn)用Polar表(RS400)進(jìn)行控制。每天運(yùn)動(dòng)1個(gè)小時(shí),一般在下午4-5點(diǎn)進(jìn)行,每周練習(xí)4次,共16周。每次運(yùn)動(dòng)包括5min伸展練習(xí)和熱身、30min健步走、20min太極拳及5min整理活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)期間,受試者在石基自來水公司食堂統(tǒng)一用餐,合理搭配飲食。

1.2.2 血液標(biāo)本的采集與處理

分別于實(shí)驗(yàn)前1天、運(yùn)動(dòng)第8周末和運(yùn)動(dòng)第16周后1天采血6ml。血液指標(biāo)測(cè)定前空腹12h,忌酒、高脂飲食。取所采集的血樣1ml注入抗凝管備用,其余注入離心管中,置于室溫25°C 30min后,經(jīng)2000r/ min離心15min后獲取血清,置于-80°C冰箱中保存,于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后同一批次集中測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。3次測(cè)定條件(測(cè)定人員、測(cè)定儀器、測(cè)定時(shí)間)相同,同時(shí)測(cè)定體重和BMI指數(shù)。

1.2.3 測(cè)定指標(biāo)和參考范圍

血脂四項(xiàng)：甘油三脂(TG)、總膽固醇(CHOL)、高密脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密脂蛋白膽固醇(LDLC)。肝功能指標(biāo)：天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)酶(ALT)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL),然后計(jì)算出間接膽紅素(間接膽紅素=總膽紅素-直接膽紅素)。血常規(guī)指標(biāo)：紅細(xì)胞數(shù)目(RBC)、血紅蛋白(Hb)。

相關(guān)指標(biāo)參考范圍：TBIL：5.1-17.1umol/l；DBIL：0-6.0umol/l；IBIL：1.7-11.1umol/l；TG：0.56-1.70 mmol/l；CHOL：3.1-5.9mmol/l；LDL-C：2.0-3.1mmol/ l；HDL-C：0.4-2.0mmol/l；ALT：0-40u/l；AST：0-40u/l；RBC：4-5.5×1012/L(男)或3.5-5.0×1012/L(女)；Hb：120-160g/L(男)或110-150g/L(女)。

1.2.4 有氧運(yùn)動(dòng)有效性診斷標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)研究對(duì)象實(shí)驗(yàn)前后肝臟影像學(xué)特征進(jìn)行定型比較,按以下標(biāo)準(zhǔn)確定有氧運(yùn)動(dòng)治療的有效性。

(1)顯效：中度脂肪肝變?yōu)檎；蛟瓰橹囟戎靖巫優(yōu)檩p度或無脂肪肝。(2)有效：輕度脂肪肝變?yōu)檎！⒅卸戎靖巫優(yōu)檩p度脂肪肝或重度脂肪肝變?yōu)橹卸戎靖巍?3)無效：治療前后無變化或加重。

1.2.5 數(shù)理統(tǒng)計(jì)法

所有計(jì)量資料均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示,前后比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn),顯著性水平取P＜0.05,非常顯著性水平取P＜0.01。

2 研究結(jié)果

2.1 運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度

表1 研究對(duì)象運(yùn)動(dòng)中的平均心率

運(yùn)動(dòng)中平均心率為127±12次,基本保持在該年齡段群體60%-70%HRmax的范圍內(nèi),符合中等運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度預(yù)期。

2.2 體重和BMI指數(shù)的變化

由表2可知,經(jīng)過16周有氧運(yùn)動(dòng),NAFLD患者的體重顯著下降(P＜0.05),BMI指數(shù)下降也非常顯著(P＜0.01)。

2.3 有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD的治療效果

表3 16周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD的有效性

根據(jù)NAFLD患者影像學(xué)變化,16周有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD的平均有效率為79%,其中對(duì)輕中度NAFLD的有效率為91%和80%,但重度NAFLD的有效率只有25%,與前兩者相比較有顯著性差異。

2.4 血脂4項(xiàng)的變化

表4 運(yùn)動(dòng)中血脂的變化(mmol/L)

運(yùn)動(dòng)過程中各血脂指標(biāo)除HDL-C外均下降。8周時(shí)與實(shí)驗(yàn)前比較TG、LDL-C差異顯著(P＜0.05)；16周時(shí)與實(shí)驗(yàn)前比較TG、CHOL、MCH差異非常顯著(P＜0.01),LDL-C、HDL-C差異顯著(P＜0.05)；運(yùn)動(dòng)16周與運(yùn)動(dòng)8周比較TG、CHOL差異非常顯著(P＜0.01)。

2.5 肝功能指標(biāo)的變化

表5 運(yùn)動(dòng)中肝功能指標(biāo)的變化

在實(shí)驗(yàn)過程中,除AST上升外,其余指標(biāo)均下降。運(yùn)動(dòng)8周與實(shí)驗(yàn)前比較TBIL、DBIL、IBIL差異非常顯著(P＜0.01)；運(yùn)動(dòng)16周與實(shí)驗(yàn)前比較TBIL、DBIL、IBIL差異非常顯著(P＜0.01)。AST在運(yùn)動(dòng)前后變化不明顯。

2.6 紅細(xì)胞和血紅蛋白的變化

表6 運(yùn)動(dòng)中紅細(xì)胞和血紅蛋白的變化

在實(shí)驗(yàn)中,RBC和Hb均下降。運(yùn)動(dòng)8周與實(shí)驗(yàn)前比較RBC差異非常顯著(P＜0.01),Hb差異顯著(P＜0.05)；運(yùn)動(dòng)16周與實(shí)驗(yàn)前比較RBC和Hb差異非常顯著(P＜0.01)。

3 分析與討論

3.1 有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者體脂、血脂及肝臟影像、損傷指標(biāo)的影響

NAFLD與體脂含量密切相關(guān),體重或BMI指數(shù)超標(biāo)時(shí)發(fā)病率大大增加,甚至在BMI指數(shù)正常的群體中也有一定的發(fā)病率。相關(guān)研究表明,有氧運(yùn)動(dòng)可以通過增加體脂的消耗,減輕體重和降低BMI指數(shù),對(duì)肝脂肪有明顯的改善效果。甚至有學(xué)者認(rèn)為運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD所表現(xiàn)出的有效性即使是在體重輕度減輕或是不變時(shí),運(yùn)動(dòng)仍能顯著減輕肝細(xì)胞的脂肪沉淀。由表2可知,本研究中NAFLD患者BMI平均水平高出正常范圍,有氧運(yùn)動(dòng)16周后,體重和BMI顯著下降。從肝臟造影結(jié)果(表3)來看,16周有氧運(yùn)動(dòng)后NAFLD患者肝細(xì)胞脂肪沉淀有較明顯減輕,總有效率可達(dá)79%。

血脂代謝異常是NAFLD發(fā)病過程中顯著特征之一。由表3可知,實(shí)驗(yàn)前TG、CHOL、LDL-C、均超出正常范圍。有氧運(yùn)動(dòng)可以使體重減輕,消耗體脂,降低血脂,與肝內(nèi)脂肪含量呈負(fù)相關(guān),同時(shí)可增加胰島素敏感性,對(duì)NAFLD的改善作用已經(jīng)達(dá)成國際共識(shí)。在本實(shí)驗(yàn)中可以觀察到,16周太極拳綜合健步走運(yùn)動(dòng)后,NAFLD患者的血脂水平有顯著下降,這與以往的研究結(jié)果基本一致。血清AST、ALT是反映肝細(xì)胞損傷程度的重要指標(biāo),NAFLD發(fā)病時(shí)常伴有AST、ALT升高,多數(shù)研究報(bào)道有氧運(yùn)動(dòng)可以使AST、ALT有效轉(zhuǎn)歸。由表5可知本研究中實(shí)驗(yàn)前ALT偏高,運(yùn)動(dòng)16周后顯著降低,已基本轉(zhuǎn)歸至正常參考范圍,可能是因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)中研究對(duì)象多為中輕度NAFLD患者,肝細(xì)胞受損并不嚴(yán)重,16周有氧運(yùn)動(dòng)后肝細(xì)胞損傷狀況明顯減輕。

3.2 有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者膽紅素的影響

3.2.1 NAFLD對(duì)膽紅素的影響

由表5可知,實(shí)驗(yàn)前研究對(duì)象TBIL和IBIL水平偏高。臨床上認(rèn)為以IBIL升高為特征的高膽紅素血癥與溶血有關(guān),凋亡紅細(xì)胞中血紅蛋白(Hb)是膽紅素的主要來源,Hb的升高在一定程度上導(dǎo)致膽紅素生成量的增加。國內(nèi)外曾多次報(bào)道NAFLD患者血紅蛋白升高的現(xiàn)象,如胡學(xué)琴發(fā)現(xiàn)NAFLD患者RBC、Hb、HCT、MCV和MCH顯著高于正常對(duì)照組。劉志元在實(shí)驗(yàn)中觀察到NAFLD患者RBC、Hb顯著高于正常對(duì)照組。Yu等則發(fā)現(xiàn)血紅蛋白α亞單位的峰值在NAFLD患者中顯著升高,認(rèn)為血紅蛋白升高是NAFLD的危險(xiǎn)因素,或可用于NAFLD預(yù)測(cè)和診斷。蘇大芝等在臨床中也發(fā)現(xiàn)Hb水平NAFLD呈正相關(guān)關(guān)系,認(rèn)為高Hb水平是獨(dú)立于肥胖和代謝綜合癥的NAFLD的又一風(fēng)險(xiǎn)因素。由表6可知,本研究中也觀察到實(shí)驗(yàn)前NAFLD患者RBC、Hb水平偏高,而Hb上升可能是造成膽紅素水平上升的原因之一。另一方面,膽紅素在生理?xiàng)l件下又是重要的抗氧化劑,給運(yùn)動(dòng)大鼠補(bǔ)充膽紅素可以有效提高SOD的激活程度,降低MDA生成。國外學(xué)者也在研究中觀察到生理范圍內(nèi)高膽紅素現(xiàn)象與非酒精性脂肪肝的發(fā)病率成負(fù)相關(guān)。因此,可以推測(cè)膽紅素的抗氧化作用所引起的保護(hù)性機(jī)制可能也是造成非酒精性脂肪肝患者血清膽紅素水平輕度升高的原因之一,但具體機(jī)制尚需進(jìn)一步研究證明。

促紅細(xì)胞生成素(EPO)是重要的造血調(diào)節(jié)因子,人體內(nèi)Hb的合成和紅細(xì)胞的增殖主要受EPO的調(diào)節(jié)。NAFLD患者Hb升高的機(jī)制可能與EPO表達(dá)上調(diào)有關(guān),從目前研究結(jié)果來看包括以下幾個(gè)方面：一是肝脂肪化產(chǎn)生的物理擠壓和脂肪毒性作用導(dǎo)致肝細(xì)胞缺血低氧。EPO主要受低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1)的調(diào)控,常氧情況下HIF-1可以很快降解,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)長期慢性缺氧時(shí),HIF-1降解速度下降,表達(dá)升高的HIF-1與EPO基因位點(diǎn)相結(jié)合,使EPO基因表達(dá)上調(diào)促進(jìn)EPO的分泌,促進(jìn)骨髓紅細(xì)胞的生成,生成更多的Hb。二是活性氧自由基(ROS)對(duì)EPO表達(dá)的增強(qiáng)作用。FFA可使線粒體產(chǎn)生大量的ROS,細(xì)胞內(nèi)ROS達(dá)到一定濃度后會(huì)通過刺激原癌基因c-fos和c-jun的表達(dá)提高AP-1的活性,激活的AP-1可與EPO基因上的位點(diǎn)相結(jié)合,促進(jìn)EPO表達(dá)上調(diào)。三是ROS對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子(NF-KB)的誘導(dǎo)作用。低氧情況下細(xì)胞產(chǎn)生的大量ROS可激活NF-KB進(jìn)入細(xì)胞核并與EPO基因上的位點(diǎn)相結(jié)合,促進(jìn)EPO的轉(zhuǎn)錄。

肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的代謝由IBIL的攝取、轉(zhuǎn)化為DBIL和排泄入膽道3個(gè)階段組成,這3個(gè)階段互相銜接,任何一個(gè)階段發(fā)生障礙都會(huì)造成膽紅素代謝紊亂。由表5可知,實(shí)驗(yàn)前ALT偏高,說明本研究中NAFLD患者肝細(xì)胞有一定程度的損傷,肝臟對(duì)膽紅素的代謝功能必然會(huì)受到影響。肝細(xì)胞通過兩種載體蛋白對(duì)IBIL進(jìn)行攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)：Y蛋白和Z蛋白。Y蛋白含量多,比Z蛋白對(duì)IBIL的親和力強(qiáng),是肝細(xì)胞攝取IBIL的主要載體蛋白；Z蛋白是一種脂肪酸結(jié)合蛋白,它與IBIL的親合力較弱,而是優(yōu)先結(jié)合游離脂肪酸(FFA)。通常情況下IBIL濃度較低時(shí)優(yōu)先與Y蛋白結(jié)合,在IBIL濃度高時(shí)Z蛋白與IBIL的結(jié)合量才增加,而當(dāng)FFA較多時(shí)可對(duì)Z蛋白攝取IBIL形成競(jìng)爭(zhēng)性抑制。由表5可知,實(shí)驗(yàn)前IBIL、血脂偏高,DBIL基本正常,可以推斷在NAFLD中IBIL生成增加時(shí), Y蛋白攝取IBIL的能力已經(jīng)飽和,Z蛋白可能因受FFA的競(jìng)爭(zhēng)性抑制其攝取IBIL的能力并不能完全發(fā)揮,進(jìn)而影響肝細(xì)胞對(duì)IBIL的代謝,導(dǎo)致IBIL升高。另一方面,IBIL在肝細(xì)胞內(nèi)被酯化為DBIL的場(chǎng)所是滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),在NAFLD中肝細(xì)胞脂肪的堆積導(dǎo)致氧化應(yīng)激進(jìn)而引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,使肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能受損,而肝細(xì)胞對(duì)IBIL的攝取作用是可逆的,已經(jīng)滲入肝細(xì)胞的IBIL如果無法被完全轉(zhuǎn)化為DBIL,便可以返流入血,使血液中IBIL升高。而DBIL基本正常,說明肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的轉(zhuǎn)化和排泄功能基本正常,這可能與本研究中NAFLD患者均為輕度有關(guān)。

3.2.2 有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD患者膽紅素的影響

以往相關(guān)研究觀察到有氧運(yùn)動(dòng)可以有效降低NAFLD血清膽紅素水平。認(rèn)為有氧運(yùn)動(dòng),特別是中小強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)可以在提高機(jī)體功能的同時(shí)較好地供應(yīng)組織對(duì)血液和氧氣的需要,更有利于降低胰島素抵抗和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的相關(guān)凋亡。但有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)IBIL的影響報(bào)道較少。由前分析,在NAFLD患者中,機(jī)體生成和代謝膽紅素能力的變化都會(huì)影響到血清膽紅素的濃度,而有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)膽紅素的影響作用也可能發(fā)生在這兩個(gè)階段,而以上機(jī)制可能是有氧運(yùn)動(dòng)引起NAFLD血清膽紅素水平下降的作用靶點(diǎn)。有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)膽紅素生成的改善機(jī)制可能包括：一是有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)體脂有效消耗減輕了肝細(xì)胞內(nèi)脂肪沉淀,使肝細(xì)胞因物理擠壓和脂肪毒性導(dǎo)致的缺血缺氧狀況得到緩解,氧濃度上升,HIF-1降解速度加快,EPO基因激活程度和EPO的生成也隨之下降,血紅蛋白生成減少,進(jìn)而導(dǎo)致TBIL、IBIL生成量的減少；二是有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)體脂的消耗促進(jìn)FFA下降,減少了ROS的生成,使NF-KB的激活程度下降,進(jìn)一步抑制了EPO基因的激活和轉(zhuǎn)錄,使Hb生成減少,導(dǎo)致IBIL生成下降；三是長期中等強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)能提高機(jī)體VEGF-A mRNA水平,使組織毛細(xì)血管增加,從而增加氧及能量物質(zhì)的輸送,進(jìn)一步改善細(xì)胞內(nèi)低氧狀況,抑制HIF-1和EPO的表達(dá),進(jìn)而減少紅細(xì)胞和Hb的生成,導(dǎo)致IBIL生成量減少。

另一方面,有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)膽紅素偏高的改善也有可能發(fā)生在膽紅素代謝階段：一是有氧運(yùn)動(dòng)可以有效改善肝細(xì)胞膜的破損和通透性,如王艷、費(fèi)金秀、曹姣等分別在研究中發(fā)現(xiàn)有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后NAFLD患者肝損傷指標(biāo)有較好的轉(zhuǎn)歸變化,證明有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)NAFLD肝細(xì)胞損傷有較好的改善效果,使受損肝細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)化IBIL的能力得到恢復(fù)；二是有氧運(yùn)動(dòng)有效降低了血脂,減輕了肝細(xì)胞內(nèi)FFA與IBIL對(duì)Z蛋白結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng),使肝細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)化IBIL的最大能力又重新恢復(fù)。本研究中也觀察到16周有氧運(yùn)動(dòng)后TG、CHOL、LDL-c的顯著性下降,但由于本研究中缺乏相關(guān)指標(biāo)測(cè)定,其具體機(jī)制還需做進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

(1)16周有氧運(yùn)動(dòng)能有效消耗體脂,降低NAFLD患者體重和BMI指數(shù),改善肝損傷和血脂代謝紊亂。

(2)中輕度NAFLD患者的高膽紅素血癥主要是由脂代謝紊亂引起的氧應(yīng)激造成的。

(3)16周有氧運(yùn)動(dòng)可通過改善NAFLD患者脂代謝,降低血紅蛋白、血清膽紅素水平,對(duì)于促進(jìn)肝細(xì)胞功能障礙和損傷的恢復(fù)具有有效作用。

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Influence of 16-Week Aerobics Exercises on Liver Function and Serum Bilirubin of NAFLD Patients

WU Guoliang1,LI Na1,XIAO Guoqiang2
(1.Sport Dept.,Guangxi Technology Normal College,Laibin 546199,China；2.Sports Science Dept.,South China Normal Univ.,Guangzhou 510631,China)

Based on the observation of influence of aerobics exercises on the serum bilirubin of the NAFLD patients,the paper discusses the function mechanism of aerobics exercises on NAFLD.The paper proposes that moderate intensity aerobic exercises can effectively burn body fat,reduce the weight and BMIindex of NAFLDpatients and recover from liver damageand lipid metabolism disorders.High blood bilirubin of the NAFLD patients is mainly caused by hemoglobin increase caused by lipid metabolism disorders caused by oxygen stress.Aerobic exercise canimprove lipid metabolism of NAFLD patients.Lower hemoglobin and serum bilirubin level is helpful to promote the recovery of liver cell dysfunction and damage effectively.

aerobic exercise；diet control；bilirubin；hemoglobin

G804.55

：A

：1672-268X(2015)04-0063-04

2015-03-02)

廣西教育廳高?？蒲匈Y助項(xiàng)目(LX2014488),柳州師范高等?？茖W(xué)?？蒲谢鹳Y助項(xiàng)目(LSZ2013B005)。