【摘 要】對(duì)乙酰氨基酚也稱為對(duì)羥基乙酰苯胺、醋氨酚或撲熱息痛，是一種常用的退熱和止痛藥物。本實(shí)驗(yàn)建立反相高效液相色譜法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中對(duì)乙酰氨基酚的含量。方法：采用安捷倫 C18色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】對(duì)乙酰氨基酚泡騰片；含量；測(cè)定

對(duì)乙酰氨基酚也稱為對(duì)羥基乙酰苯胺、醋氨酚或撲熱息痛，是一種常用的退熱和止痛藥物。對(duì)乙酰氨基酚有解熱鎮(zhèn)痛作用，用于感冒發(fā)燒、關(guān)節(jié)痛、神經(jīng)痛、偏頭痛、癌痛及手術(shù)后止痛等。對(duì)乙酰氨基酚是非那西丁在體內(nèi)的代謝產(chǎn)生，其抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)前列腺素合成的作用與阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中的對(duì)乙酰氨基酚的進(jìn)行了含量測(cè)定。

1.儀器與試藥

1.1儀器

FL2200-2高效液相色譜儀（浙江福立分析儀器有限公司）；CO-1000型色譜柱溫箱（上海子期實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；R-215旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士步琦有限公司）；HQ-50高端試劑級(jí)超純水機(jī)（鄭州華新電氣公司） ；ABS220-4分析天平（德祥科技有限公司）；AP-01P無油隔膜真空泵（杭州格圖科技有限公司）；JL_720DTH超聲波清洗器（南京科捷分析儀器有限公司）；TU-1810紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

1.2色譜柱

安捷倫 C18色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3對(duì)照品

對(duì)乙酰氨基酚 購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4試劑

甲醇（上海譜振生物科技有限公司）、磷酸二氫鈉（撫順市新光精細(xì)化工有限責(zé)任公司）、溴化四丁基銨（北京邁瑞達(dá)科技有限公司）、乙腈（上海譜振生物科技有限公司）、冰醋酸（武漢宏信康精細(xì)化工有限公司）、三乙胺（鄭州皇朝化工產(chǎn)品有限公司）、四丁基硫酸氫銨（上海譜振生物科技有限公司）、庚烷磺酸鈉（沈陽(yáng)試三生化科技開發(fā)有限公司）、四氫呋喃（武漢宏信康精細(xì)化工有限公司）。

1.5試藥

對(duì)乙酰氨基酚泡騰片。

2.測(cè)定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-10]。流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品適量，置容量瓶中，加流動(dòng)相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取對(duì)乙酰氨基酚泡騰片適量，研細(xì)，精密稱取，置50mL量瓶中，加水溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4專屬性試驗(yàn)

在處方中去對(duì)乙酰氨基酚制成陰性樣品，依上述方法測(cè)定，結(jié)果在對(duì)乙酰氨基酚出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5精密度試驗(yàn)

精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品適量，加流動(dòng)相使溶解，制成濃度為20μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.76%，表明本方法精密度良好。

2.6對(duì)照品的線性考察

精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品15mg，置250ml容量瓶中，加入流動(dòng)相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，對(duì)乙酰氨基酚在18～60μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的對(duì)乙酰氨基酚泡騰片樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.83%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8準(zhǔn)確度試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品，上述方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為99.2%，RSD=0.86%。結(jié)果表明此方法的回收率良好。

2.9樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批對(duì)乙酰氨基酚泡騰片樣品，按2.3項(xiàng)下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、2、4、6、8小時(shí)，精密吸取供試品溶液10μl 注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中對(duì)乙酰氨基酚的RSD=0.72%。結(jié)果表明供試品8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

3.結(jié)論

分別考察磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），甲醇-0.01mmol·L-1三乙胺水溶液（70∶30，冰醋酸調(diào)pH7.0），甲醇-0.3%磷酸（37∶63），2%庚烷磺酸鈉溶液-甲醇-乙腈-三乙胺（25：30：30：0.1），乙腈-四氫呋喃-三乙胺磷酸緩沖液（25：15：60），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），0.34%四丁基硫酸氫銨溶液-乙腈（75∶25）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10）為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)表明此方法可用于對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定。對(duì)乙酰氨基酚泡騰片中對(duì)乙酰氨基酚的含量為標(biāo)示量的95-105%。

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