摘要：目的 在血清中人為加入不同濃度的脂肪乳，觀察其對(duì)常規(guī)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的影響。方法 收集100例TG<2.26 mmol/L的健康體檢混合血清，取0.9 mL的混合血清加上0.1 mL的蒸餾水做對(duì)照組；0.9 mL的混合血清分別加上稀釋后不同濃度的脂肪乳做測(cè)量組。結(jié)果 當(dāng)混合脂肪乳的血清的TG濃度達(dá)到2.76時(shí)對(duì)TP、CKMB開(kāi)始有正干擾，對(duì)HDL開(kāi)始有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到4.07時(shí)，開(kāi)始對(duì)Glu、TC、HBDH有正干擾，對(duì)Cr、TB開(kāi)始有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到6.53時(shí)，開(kāi)始對(duì)ALT、AST、Alb有正干擾，對(duì)Apoa1、Apob有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到11.95時(shí)，對(duì)DB、Lp（a）、LDL有負(fù)干擾，對(duì)Alb有正干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升時(shí)，導(dǎo)致大部分指標(biāo)無(wú)法測(cè)出；脂肪乳對(duì)ALP、LDH、CHE、ADA、BUN、K、NA、CL、CO2無(wú)明顯的干擾。用高速離心15000 rpm 15 min混合了脂肪乳的血清，取下清測(cè)生化指標(biāo)，與對(duì)照組無(wú)明顯差異。結(jié)論 在實(shí)際工作中遇到脂濁標(biāo)本時(shí)，當(dāng)TG>2.26時(shí)對(duì)一些生化的指標(biāo)檢測(cè)有干擾，可以采取高速離心取下清測(cè)，以得到真值。

關(guān)鍵詞：脂濁；脂肪乳；生化指標(biāo)

在臨床工作中，我們經(jīng)常會(huì)遇到脂濁樣本。脂濁對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果造成的誤差不容忽視。為了加強(qiáng)檢驗(yàn)質(zhì)量的控制有必要對(duì)脂濁在測(cè)定生化項(xiàng)目時(shí)的影響加以分析。本實(shí)驗(yàn)用人為方法加入脂肪乳，以控制脂肪的濃度，觀察其對(duì)常規(guī)生化檢測(cè)項(xiàng)目的影響。

1資料與方法

1.1一般資料 DB、TG試劑來(lái)源于日本和光， ALT、CHE、LDL-C試劑上海豐匯， ALP北京柏定，TBA寧波美康， ADA浙江康特， GGT、LDH、UA、CK、CKMB、AMS、Bun上海德賽，以上都是雙試劑測(cè)定。ApoA1、ApoB來(lái)源于上海豐匯，免疫比濁法；AST、CO2上海豐匯，單試劑；TP北京柏定，終點(diǎn)法測(cè)定； LP（a）寧波美康，膠乳濁度法； GLU（GOD-POD法）、HBDH北京利德曼；TC德國(guó)AUTEC；HDL-C上海景源。脂肪乳華瑞制藥公司。采用OlympusAU5400自動(dòng)生化分析儀器。

1.2方法 取當(dāng)天健康者體檢標(biāo)本中TG<2.26 mmol/L的血清作為測(cè)量用的混合血清。脂肪乳分別用蒸餾水1∶1，1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32，1∶64，1∶128，1∶256，1∶512做倍比稀釋。取0.9 mL的混合血清加0.1ml的蒸餾水做對(duì)照組；0.9 mL的混合血清分別加入上述稀釋后不同濃度的脂肪乳做第一測(cè)量組；將混合了脂肪乳的血清用15000 rpm 15 min高速離心后取下清做第二測(cè)量組。

2結(jié)果

脂肪乳高速離心前后對(duì)常規(guī)生化檢測(cè)項(xiàng)目影響。脂肪乳對(duì)常規(guī)生化檢測(cè)項(xiàng)目影響各不相同，見(jiàn)表1。當(dāng)混合脂肪乳的血清的TG濃度達(dá)到2.76時(shí)對(duì)TP、CKMB開(kāi)始有正干擾，對(duì)HDL開(kāi)始有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到4.07時(shí)，開(kāi)始對(duì)Glu、TC、HBDH有正干擾，對(duì)Cr、TB開(kāi)始有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到6.53時(shí)，開(kāi)始對(duì)Alb、ALT、AST有正干擾，對(duì)ApoA1、ApoB有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升到11.95時(shí)，對(duì)DB、Lp（a）、LDL有負(fù)干擾；當(dāng)TG繼續(xù)上升時(shí)，導(dǎo)致大部分指標(biāo)無(wú)法測(cè)出，對(duì)TBA、AMS有正干擾，對(duì)GGT、UA、CK有負(fù)干擾；脂肪乳對(duì)ALP、LDH、CHE、ADA、BUN、K、Na、Cl、CO2無(wú)明顯的干擾。當(dāng)高速離心后，15000 rpm 15 min離心后取下清測(cè)生化指標(biāo)，可以觀察到與對(duì)照組基本一致。

3討論

3.1干擾機(jī)制

3.1.1目前很多生化項(xiàng)目都是用比色、比濁等分析方法進(jìn)行測(cè)定的，而脂濁對(duì)光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會(huì)升高，從而對(duì)吸光度產(chǎn)生正向干擾[1]。主要是由于懸浮在樣品中的極低密度脂蛋白（VLDL）引起所致。TP波長(zhǎng)為546 nm。脂肪乳對(duì)其從1∶64開(kāi)始有正干擾，原因是濁度對(duì)波長(zhǎng)的干擾。Glu主波長(zhǎng)520 nm，副波長(zhǎng)600 nm。脂肪乳對(duì)其從1∶8開(kāi)始是正干擾，原因是濁度在主波長(zhǎng)520 nm左右處增加了吸光度。TC主波長(zhǎng)505 nm，副波長(zhǎng)700 nm。脂肪乳對(duì)其從1∶8開(kāi)始是正干擾，原因是濁度在主波長(zhǎng)505 nm左右處增加了吸光度。HBDH波長(zhǎng)為340 nm，脂肪乳對(duì)其是正干擾，原因?yàn)橹救樵?40 nm處有較高的吸光度。ALT、AST波長(zhǎng)為340 nm，脂肪乳對(duì)其是正干擾，原因?yàn)橹救樵?40 nm處有較高的吸光度。白蛋白的測(cè)定方法是BCG法，脂濁增加了色源物質(zhì)的干擾，對(duì)其造成正干擾。TBA主波長(zhǎng)405 nm，負(fù)波長(zhǎng)660 nm；AMS主波長(zhǎng)405 nm。脂肪乳對(duì)二者均造成正干擾，原因是脂肪乳在主波長(zhǎng)處增加了吸光度。

3.1.2血清中水分被不溶性的脂濁微粒所取代，因此除甘油三酯等少數(shù)項(xiàng)目以外，脂濁可以使大多數(shù)血清成分產(chǎn)生負(fù)誤差[2]。HDL-C波長(zhǎng)為600 nm。脂肪乳對(duì)其從1∶16開(kāi)始是負(fù)干擾，原因是濁度在600nm處未對(duì)吸光度造成干擾，而對(duì)其他波長(zhǎng)造成干擾，造成對(duì)其為負(fù)干擾[3]。肌酐的測(cè)定方法受許多特異\"色源\"物質(zhì)的干擾，血清中的水分被不溶性的脂濁微粒所取代，對(duì)其造成負(fù)干擾。TB的測(cè)定方法是重氮法、DB的測(cè)定方法是釩酸氧化酶法，主波長(zhǎng)是450 nm，負(fù)波長(zhǎng)是546 nm，脂肪乳對(duì)其是負(fù)干擾，原因是二者主、副波長(zhǎng)相距較小，濁度對(duì)二者的影響相似，甚至對(duì)副波長(zhǎng)的影響更大。

3.1.3脂濁血清由于血清粘度加大及脂濁微粒的屏蔽效應(yīng)，可以減少抗原抗體結(jié)合的機(jī)率，從而對(duì)免疫比濁法產(chǎn)生一定的影響[4]。血清載脂蛋白A1、B是免疫投射比濁法，波長(zhǎng)為340 nm。脂肪乳度其是負(fù)干擾，原因是脂肪乳與試劑中的抗體結(jié)合形成沉淀，降低了抗體的含量。脂濁血清由于血清粘度加大及脂濁微粒的屏蔽效應(yīng)，可以減少抗原抗體結(jié)合的機(jī)率，從而對(duì)免疫比濁法產(chǎn)生負(fù)影響。脂蛋白（a）的測(cè)定方法是膠乳濁度法，主波長(zhǎng)為600 nm，反應(yīng)方向?yàn)橄蛏?。脂濁?duì)光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會(huì)升高，導(dǎo)致本底吸光度過(guò)高，從而對(duì)吸光度產(chǎn)生負(fù)向干擾[1]。LDL主波長(zhǎng)506 nm，副波長(zhǎng)700 nm。脂濁對(duì)其是負(fù)干擾，其原因是脂濁對(duì)光線有一定的散射作用，因此脂濁血清的樣本空白吸光度值會(huì)升高，導(dǎo)致本底吸光度過(guò)高，從而對(duì)吸光度產(chǎn)生負(fù)向擾。

3.1.4脂濁使分析物分布呈非均一性，因此測(cè)定過(guò)程中的隨機(jī)誤差加大。在臨床過(guò)程中遇到脂濁嚴(yán)CKMB的測(cè)定方法是速率法，波長(zhǎng)為340 nm。脂肪乳對(duì)其從1∶16開(kāi)始是正干擾，原因?yàn)闈岫仍?40 nm處增加了吸光度，對(duì)其造成正干擾。但是CK的方法也是速率法，波長(zhǎng)也為340 nm，本次試驗(yàn)中對(duì)CK造成了負(fù)干擾，其原因是脂濁使分析物分布呈非均一性，因此測(cè)定過(guò)程中的隨機(jī)誤差加大。

3.1.5由于電解質(zhì)的測(cè)定原理是電極法，故脂肪乳對(duì)K、Na、Cl沒(méi)有影響。

3.2消除方法

3.2.1中度脂濁的血清（TG<2.26 mmol/l），我們常常不需要對(duì)其進(jìn)行特殊處理。

3.2.2對(duì)于重度脂濁血清（TG>2.26 mmol/l），由于樣本的本底吸光度過(guò)高，必須對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)處理[2]。具體方法有如下幾種：生理鹽水稀釋法；醚抽提法；靜置實(shí)驗(yàn)；高速離心法；在本次試驗(yàn)中已得到驗(yàn)證，高速離心后能有效去除干擾。VITROS干化學(xué)分析儀利用特殊的多層薄膜技術(shù)，因其測(cè)試條有過(guò)濾功能，對(duì)于有些脂血標(biāo)本的測(cè)定很有用[5]。

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編輯/肖慧