范冬茹，邢振楠，臧海蓮，王丹麗，張德巖

（1.伊春林業(yè)科學(xué)院，黑龍江 伊春 153000；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，哈爾濱 150030）

香菇多糖（Lentinan LNT）是一種β-1，3-葡聚糖，系從擔(dān)子菌綱傘菌科真菌香菇子實體中提取分離純化獲得的均一組分的多糖。具有抗腫瘤、抗感染和調(diào)節(jié)免疫力等作用。傳統(tǒng)香菇多糖的提取方法有水提醇沉法、稀堿浸提法、稀酸浸提法和酶法等，隨著對香菇研究的不斷深入，又出現(xiàn)超濾法、超聲波法以及微波輔助浸提法等。其中微波輔助浸提法具有設(shè)備簡單、快速、高效、安全等特點。利用微波強化固液浸取過程是頗具發(fā)展?jié)摿Φ囊环N新型輔助提取技術(shù)。

本實驗利用微波法提取香菇多糖，考察時間對多糖得率的影響，在此基礎(chǔ)上用微波法提取伊菇820及香菇808單孢菌株粗多糖，并測量菌絲體干重，加以比較。

1 材料與方法

1.1 菌種及培養(yǎng)基

伊菇820，香菇808單孢菌株是由伊春林業(yè)科學(xué)院小興安嶺原生態(tài)食用菌研究所自主選育。其中伊菇820是香菇236、香菇808孢子雜交而產(chǎn)生的菌株。

培養(yǎng)基選用CYM培養(yǎng)基：葡萄糖20.0g，蛋白胨2.0g，酵母膏2.0g，MgSO40.5g，K2HPO41.0g，KH2PO40.46g，水1 000mL，pH 自然。

1.2 儀器與設(shè)備

AL104精密電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；Galanz WD800B型微波爐，佛山市順德區(qū)格蘭仕微波爐電器有限公司；KZ-2111KB立式振蕩培養(yǎng)箱，金壇市盛藍儀器制造有限公司；BAO-23A干燥箱，施都凱儀器（上海）有限公司；MBR-304OR冰箱，三洋電機株式公社；SW-CT-1D超凈工作臺，江蘇蘇潔凈化設(shè)備有限公司；TDL-5M臺式低率冷凍離心機，湖南凱達科學(xué)儀器有限公司。

1.3 研究方法

1.3.1 伊菇820培養(yǎng)條件。在裝液量為500mL的三角瓶中裝200mL的培養(yǎng)液，共制備16瓶。高壓滅菌后，涼至常溫，接種伊菇820，每瓶10個接種點。置于搖床震蕩培養(yǎng)（26℃、160r／min）。培養(yǎng)7d左右至長滿瓶。

1.3.2 菌絲生長量測定方法。經(jīng)1.3.1方法培養(yǎng)后，4 000r／min、5min離心獲得菌絲體，于70℃恒溫烘干至恒重后稱量。

1.3.3 多糖提取步聚。稱取一定質(zhì)量的干菌絲，按1∶30的料液比加入蒸餾水并攪拌，然后設(shè)定時間、800W微波處理提取香菇多糖。收集濾液，添加乙醇使其終濃度為75%，-4℃醇沉12h后離心（4 000r／min、10min）。取沉淀，70℃烘干即得粗多糖。

1.3.4 微波提取時間梯度實驗。稱取6份干重為2.0g的菌絲體，分別設(shè)定微波提取時間為3、5、7、9、11、13min，然后按1.3.3方法提取多糖，計算多糖得率，確定微波最佳提取時間。

1.3.5 伊菇820及香菇808單孢菌株多糖產(chǎn)量比較。制備4組200mL／瓶的CYM培養(yǎng)基，每組3瓶。滅菌兩組接種伊菇820，2組接種香菇808單孢菌株。每瓶10個接種點。置于搖床震蕩培養(yǎng)（26℃、160r／min）。培養(yǎng)7天左右到長滿瓶即可。按1.3.2方法制備干菌絲并測定菌絲生長量。按1.3.3方法提取多糖，微波提取時間采用1.3.4微波提取時間梯度實驗中最佳提取時間。

2 結(jié)果與分析

2.1 微波提取時間最佳時間的確定

從圖1結(jié)果可知，微波提取時間對菌絲體粗多糖的得率有較大影響，且在9min時有最大值，表明9min為微波提取粗多糖的最佳時間。

圖1 不同微波提取時間下粗多糖干重

2.2 伊菇820及香菇808單孢菌株菌絲生長量及多糖產(chǎn)量

表2 伊菇820菌絲生長量及多糖產(chǎn)量

表3 單孢菌株菌絲生長量及多糖產(chǎn)量

由表2、表3及圖2可知，香菇808單孢菌株菌絲生長量及多糖產(chǎn)量均明顯優(yōu)于伊菇820。

圖2 兩種菌株均量比較柱形圖

3 結(jié)論

微波法提取菌絲體粗多糖的最佳提取時間為9 min。香菇808單孢菌株菌絲生長量及多糖產(chǎn)量均明顯優(yōu)于伊菇820，且粗多糖得率高達9.52%。表明香菇808單孢菌株多糖含量較高，具有進一步的研究價值。

［1］ 劉寧，李健.香菇多糖的提取工藝比較［J］.食品科學(xué)，2007，28（9）：199-201.

［2］ 申進文，王淑敏，戚元成，等.香菇939菌株單核菌絲和雙核菌絲多糖產(chǎn)量比較［J］.園藝學(xué)報，2007，34（4）：941-946.

［3］ 姜慧燕，林茂，邵平.微波輔助提取香菇菌糠多糖的工藝研究［J］.安徽農(nóng)學(xué)通報，2010，16（24）：34-36.