聞治國 唐 靜 謝 明 黃 葦 侯水生*

(1.中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)學國家重點實驗室，北京 100193;2.中國農業(yè)大學動物科技學院，北京 100193)

膽堿是一種水溶性維生素，動物對膽堿的需要量遠遠超出其他營養(yǎng)物質。膽堿可通過體內生物合成，主要是通過磷脂酰乙醇胺甲基化作用生成卵磷脂，再進一步生成膽堿。但是膽堿從頭合成途徑根本無法滿足動物機體對膽堿的需要量［1］，機體必須通過腸道中膽堿轉運蛋白來吸收飼糧中膽堿［2］。被吸收的膽堿在細胞膜磷脂合成［3］、甲基組代謝［4］和神經遞質合成［5－6］等方面起著重要作用。飼糧中添加膽堿能顯著提高家禽生長性能，當膽堿缺乏時，家禽表現為生長緩慢、脂肪性肝炎和滑鍵癥［7－9］。NRC(1994)［10］提供了肉雞、火雞、鵝和鵪鶉的膽堿需要量，但是北京鴨膽堿需要量沒有列在其中。Lien等［11］研究了不同水平的膽堿對鴨生長性能和脂肪代謝的影響，但并未探討鴨膽堿需要量。直到現在，關于研究北京鴨膽堿需要量的文獻未見報道。因此，本文旨在研究1～14日齡北京鴨膽堿需要量，并進一步探討膽堿缺乏的癥狀及對生長前期北京鴨的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設計及飼養(yǎng)管理

試驗采用單因子完全隨機設計，選用體重相近的1日齡雄性北京鴨384只，隨機分成8個組，每個組6個重復，每個重復8只，每組飼喂不同的試驗飼糧，試驗期為14 d。

肉鴨采用網上平養(yǎng)，自由采食和飲水。鴨舍起始溫度為32℃，以后逐步穩(wěn)定下降，每2 d降低1～2℃，直至25℃。相對濕度由最初的20%逐漸升高到60%。采取人工補光制度，光照時數由前期24 h/d減至采食補光和自然光照結合，其他按常規(guī)飼養(yǎng)管理方式進行。

1.2 試驗材料及飼糧

試驗動物來自于中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所種鴨場。膽堿購自國藥集團，為白色結晶粉，純度≥98%。

試驗采用玉米－大豆分離蛋白－玉米淀粉型基礎飼糧，膽堿以氯化膽堿的形式添加到基礎飼糧中，換算比例為74.6%。各組膽堿水平分別為0、200、400、600、800、1 000、1 200、1 400 mg/kg。采用離子色譜法測得試驗飼糧的實際膽堿含量分別為 302、496、778、990、1 182、1 414、1 625、1 832 mg/kg。其他營養(yǎng)物質參照《肉鴨飼養(yǎng)標準》［12］進行設計，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生長性能

于試驗開始和結束時，以重復為單位記錄北京鴨體重、采食量，計算14日齡各組平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.3.2 膽堿缺乏癥觀察及統(tǒng)計

飼養(yǎng)期內對試驗鴨進行觀察，并對患有膽堿缺乏癥的北京鴨從發(fā)病到死亡時腿部病變的整個過程進行觀察，找出變化規(guī)律。14日齡時對各組北京鴨腿病按重復進行系統(tǒng)統(tǒng)計，并按照表2等級進行統(tǒng)計打分。統(tǒng)計和打分由同一個人進行。

每個等級缺乏癥得分=(每組相應等級缺乏癥總數/6)×相應等級分數;總分數=∑每個等級缺乏癥得分。

1.4 數據處理

試驗數據采用SAS 8.0中單因素方差分析(one-way ANOVA)進行統(tǒng)計分析，各組間采用Duncan氏法多重比較進行差異顯著性檢驗，結果以平均值±標準差表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。采用二次曲線模型對北京鴨膽堿需要量進行估算［13］。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

2 結果與分析

2.1 飼糧膽堿水平對北京鴨生長性能的影響

由表3可知，各組初始重差異不顯著(P＞0.05)，而14日齡時，飼糧膽堿水平對北京鴨平均日增重和平均日采食量影響顯著(P＜0.05)，呈現先逐漸升高再趨于平穩(wěn)的趨勢，在990 mg/kg膽堿組達到最大。302 mg/kg膽堿組平均日增重和平均日采食量顯著低于其他各組(P＜0.05)，說明膽堿缺乏顯著抑制了北京鴨的生長發(fā)育。990 mg/kg膽堿組與302 mg/kg膽堿組相比，平均日增重和平均日采食量分別提高了33.52%和26.17%。飼糧膽堿水平對料重比沒有顯著影響(P＞0.05)。以平均日增重和平均日采食量為評定指標，二次曲線模型估算的1～14日齡北京鴨膽堿需要量分別為 1 289(y=23.554 6+0.017 53x－0.000 006 8x2，P=0.041 8，R2=0.727)和1 291 mg/kg(y=27.822 98+0.022 47x －0.000 008 7x2，P=0.024 0，R2=0.775)。

表2 北京鴨腿病癥狀評分Table 2 The score for leg symptom of Peking ducks

表3 飼糧膽堿水平對1～14日齡北京鴨生長性能的影響Table 3 Effects of dietary choline level on growth performance of Peking ducks from 1 to 14 days of age

2.2 膽堿缺乏癥觀察及統(tǒng)計

對各組北京鴨的生長發(fā)育進行觀察后發(fā)現，飼糧膽堿缺乏明顯抑制北京鴨生長發(fā)育，飼糧膽堿水平從302到1 832 mg/kg時，膽堿缺乏癥狀逐漸減輕。從表4可以看出，膽堿缺乏癥隨飼糧膽堿水平的提高而逐漸減少，當膽堿水平達到1 182 mg/kg時，膽堿缺乏癥能夠得到有效緩減。同時，對患有膽堿缺乏癥的北京鴨進行觀察后發(fā)現，患病北京鴨表現為從腿骨無力而爬行、脛跖骨關節(jié)腫大、弓形腿、跛腳站立不起到死亡的變化趨勢，其中302 mg/kg膽堿組最為嚴重。圖1為膽堿缺乏癥的典型癥狀，圖1－A表現為腿無力，圖1－B表現為腿骨無力，無法站立，圖1－C表現為弓形腿，圖1－D表現為劈叉、爬行，圖1－E表現為跛行，癱瘓不起。

3 討論

本試驗采用玉米、大豆分離蛋白和玉米淀粉配制成膽堿缺乏的基礎飼糧。因為玉米中膽堿含量為620 mg/kg且膽堿利用率低，大豆分離蛋白和玉米淀粉這2種原料中膽堿含量基本為0，很多試驗也成功地應用這2種原料來研究雞和火雞的膽堿需要量以及飼料中膽堿的生物學利用率［14－16］。從本試驗北京鴨平均日增重和平均日采食量隨膽堿的劑量反應效應可以看出，此飼糧類型適合研究北京鴨膽堿需要量和缺乏癥。

圖1 北京鴨膽堿缺乏的不同癥狀Fig.1 The different symptom of choline deficiency in Peking ducks

表4 北京鴨膽堿缺乏癥評分Table 4 The score of choline deficiency symptom in Peking ducks

膽堿是一種水溶性維生素，在動物體內發(fā)揮著構成細胞膜磷脂、神經遞質傳遞和提供甲基等作用。在肉雞研究上，膽堿缺乏會顯著降低肉雞生長速率和采食量［17－18］。然而，飼糧中添加膽堿也會提高肉雞和火雞生長性能以及降低膽堿缺乏癥的 發(fā) 生 率［7，19－20］。同 時，Bernard 等［8］和 Roos等［9］研究發(fā)現，飼糧中添加膽堿能夠提高北京鴨體增重和減少膽堿缺乏癥的發(fā)生率。Lien等［11］研究了不同膽堿水平對鴨生產性能的影響，但并未研究鴨膽堿需要量。本試驗中，膽堿缺乏組(302 mg/kg膽堿組)顯著抑制了北京鴨的生長發(fā)育，表現為體重減輕和采食量降低，這種抑制作用隨飼糧膽堿水平的提高而逐漸減緩。北京鴨平均日增重和平均日采食量隨飼糧膽堿水平的提高而呈現先逐漸升高后平穩(wěn)的趨勢，在990 mg/kg時達到最大。過去，直線折線模型常常被使用估算膽堿需要量，但Pesti等［13］認為直線折線模型容易低估需要量。同時，二次曲線模型也廣泛應用于家禽膽堿需要量的估算上［21］，因此本試驗使用二次曲線模型估算膽堿需要量。以平均日增重和平均日采食量為評定指標，采用二次曲線模型估算的1～14日齡膽堿需要量分別為1 289和1 291 mg/kg，與 NRC(1994)［10］推薦的 1～ 14 日齡肉雞膽堿需要量相當(1 300 mg/kg)。

膽堿缺乏癥首次被Jukes［20］在火雞上發(fā)現，其癥狀和已經發(fā)現的肉雞錳缺乏癥相似，主要以跗關節(jié)腫大、骨短粗、弓形腿和跟鍵滑脫為主要特征。本試驗中，生長前期北京鴨膽堿缺乏主要表現為腿無力、站立困難、弓形腿、關節(jié)扭曲以及跛行和癱瘓的癥狀，與Jukes［20］在火雞上發(fā)現的癥狀類似。但是本試驗中膽堿缺乏癥主要以鴨弓形腿為主，個別表現為關節(jié)腫大和跟腱滑落的癥狀。陳季春［22］認為，禽類膽堿缺乏癥是一個不斷變化的病理過程，應該從動態(tài)發(fā)展的觀點評述這一病癥。膽堿缺乏癥最初特點是關節(jié)點狀出血，隨后附骨扭轉致使脛跗關節(jié)腫脹，跗骨繼續(xù)扭曲呈彎形，以至與脛骨不呈一條直線。由于腿不能承受禽的重量，關節(jié)軟骨錯位，跟鍵從踝骨頭滑脫。一些處于中期階段、跟腱不完全滑落而表現為脛骨短粗、扭曲和關節(jié)腫大的病癥也屬于膽堿缺乏癥的范疇。從表4可以看出，當飼糧中膽堿含量超過990 mg/kg時，北京鴨膽堿缺乏癥可有效緩解。為什么膽堿缺乏會導致北京鴨腿骨發(fā)育不良呢?Fritz等［23］認為膽堿是構成卵磷脂重要生理活性物質的組成部分，而卵磷脂是動物細胞膜的結構成分，同樣也是軟骨組織磷脂的構成成分，因此膽堿是防止雞和火雞脛骨短粗癥和滑健癥所必需的物質。另外，動物體內膽堿攝入量與體內高半胱氨酸濃度有直接關系，當膽堿缺乏時，體內高半胱氨酸濃度明顯升高［24－26］。血漿高濃度高半胱氨酸影響骨代謝，與骨折密切相關，是骨質疏松骨折的危險信號，這也是醫(yī)學上早已證明的［27－29］。

4 結論

①飼糧膽堿缺乏可顯著抑制生長前期北京鴨生長發(fā)育，膽堿缺乏癥表現為從腿骨無力而爬行、脛跖骨關節(jié)腫大、跛腳站立不起到死亡的變化趨勢。

② 本試驗條件下，1～14日齡北京鴨膽堿推薦量為1 300 mg/kg。

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