金中文, 王揚(yáng)才, 吳仲寧, 戴海平, 蔡志立

(1.寧波市海洋與漁業(yè)研究院, 浙江 寧波315012; 2.寧波市鄞州區(qū)漁業(yè)技術(shù)管理服務(wù)站, 浙江 寧波315100;3.寧波鄞州咸祥志立水產(chǎn)苗種養(yǎng)殖場, 浙江 寧波315100)

青蟹是我國沿海重要的養(yǎng)殖種類, 是珍貴的海珍品之一[1], 在我國養(yǎng)殖有近百年的歷史。據(jù)中國漁業(yè)統(tǒng)計(jì)資料[2], 2010年全國青蟹年產(chǎn)量11.59×104t,然而, 青蟹養(yǎng)殖的苗種幾乎依賴自然海區(qū)的野生苗種。雖然, 國內(nèi)外對青蟹養(yǎng)殖開展長期的研究與技術(shù)開發(fā), 青蟹苗種培育技術(shù)均采取工廠化人工育苗的方法, 但苗種產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)尚未取得根本性的突破[3], 養(yǎng)殖業(yè)也因此受到制約。青蟹苗種培育對于環(huán)境和營養(yǎng)的要求高于其他蟹類, 人工培育的親蟹所產(chǎn)的卵, 可能存在先天的營養(yǎng)缺陷, 而工廠化人工育苗存在飼料營養(yǎng)不能滿足幼體發(fā)育的營養(yǎng)需求,最終導(dǎo)致幼體變態(tài)率低, 不能順利完成幼體全過程的變態(tài)。幼體培育的生態(tài)環(huán)境也是決定育苗成敗的關(guān)鍵[4]。河蟹、梭子蟹土池育苗技術(shù)較為成熟, 已經(jīng)普及推廣并在養(yǎng)殖生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用, 青蟹土池育苗尚未有成功的報(bào)道[5]。為此, 本文開展青蟹池塘生態(tài)育苗相關(guān)的基礎(chǔ)研究, 探討青蟹池塘生態(tài)育苗的可行性, 尋求青蟹苗種培育新的途徑。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)條件

2011年和2012年4~6月期間, 試驗(yàn)選擇在浙江省寧波市位于象山港畔區(qū)域養(yǎng)殖場, 池塘2個(gè), 育苗池形狀為長方形, 每個(gè)池塘面積 300~500 m2, 池深1.2~1.5 m, 坡比1∶2。整個(gè)育苗池鋪設(shè)防滲膜, 完全隔離與土壤的聯(lián)系, 在防滲膜內(nèi)外設(shè)有排水管和滲水排水管, 每口池塘安裝水車式增氧機(jī)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 親蟹培育與幼體孵化

種蟹選擇浙江省三門灣區(qū)域養(yǎng)殖場養(yǎng)殖的擬穴青蟹(Scylla paramamosai), 親蟹殼寬(11.66±0.83) cm,殼高(8.35±0.58) cm。親蟹放置在育苗室內(nèi)培育, 抱卵蟹胚胎發(fā)育成熟, 心跳120次/min以上, 移至池塘中孵化, 掌握蟹卵集中在2 d內(nèi)全部孵化, 每池放入抱卵蟹 5~7只。推算抱卵蟹卵數(shù)量平均 150×104粒,孵化率80%左右, 每只抱卵蟹孵化幼體120×104只[1]。幼體密度掌握在 1.2×104~2.8×104只/m3。

1.2.2 水質(zhì)管理

育苗開始前 15 d, 蓄水池進(jìn)水, 用漂白粉50 mg/L消毒, 孵化前 5 d, 將蓄水池的水抽入育苗池, 水位 80 cm, 進(jìn)水后, 投施浮游藻類的營養(yǎng)素培養(yǎng)藻類。幼體培育15 d后開始換水, 換水量視水質(zhì)狀況決定, 定時(shí)開增氧機(jī)。觀察水體浮游植物狀態(tài)、數(shù)量, 適當(dāng)添加藻類營養(yǎng)素或氮肥、磷肥和硅酸鹽等,保持藻類良好的狀態(tài)與適當(dāng)?shù)拿芏取?/p>

1.2.3 餌料投喂

幼體孵化后, 及時(shí)投喂輪蟲和配合飼料。輪蟲由專門土池塘培養(yǎng), 密度為300~500個(gè)/L, 每日1~2次, 螺旋藻粉和日本對蝦配合飼料, 每次用量各1mg/L, 每日3次。之后隨著幼體發(fā)育進(jìn)展, 加大輪蟲投喂密度, 逐漸增至500~1000 個(gè)/L。幼體發(fā)育變態(tài)至蚤狀幼體Ⅲ期(Z3)后, 開始投喂豐年蟲幼體, 變態(tài)到大眼幼體階段,增投豐年蟲成蟲, 幼蟹Ⅰ~Ⅱ期(C1~C2)階段, 投喂冷凍的豐年蟲成蟲,投喂量為幼體總體質(zhì)量的100%~200%。

1.3 采樣與檢測

1.3.1 浮游生物采樣

浮游生物每 5 d采樣一次, 浮游藻類采樣水深0.5 cm, 水樣1 L, 采得后立即加入15 mL魯哥氏液固定。浮游動物用2.5 L采水器, 采樣10 L, 現(xiàn)場利用浮游動物網(wǎng)(25號)過濾, 濃縮樣品集中于500 mL塑料瓶中, 并加入7 mL甲醛(4%)固定,帶回實(shí)驗(yàn)室鑒定和計(jì)數(shù)。浮游植物和浮游動物計(jì)數(shù)方法參考湖泊富營養(yǎng)化調(diào)查規(guī)范[6]。

1.3.2 水質(zhì)檢測

在池塘設(shè)固定水質(zhì)檢測點(diǎn), 用美國產(chǎn)“QUANTA”水質(zhì)檢測儀, 現(xiàn)場測定溶解氧、溫度、鹽度、pH值、飽和度, 營養(yǎng)鹽測定方法, 按照《海洋調(diào)查規(guī)范》進(jìn)行[7]。

1.3.3 幼體生長指標(biāo)測定

每個(gè)變態(tài)期對幼體取樣, 取變態(tài)前1 d和剛變態(tài)的幼體。幼體體質(zhì)量檢測方法, 用吸紙吸除幼體體表的水分, 然后進(jìn)行稱質(zhì)量。

13.4 數(shù)據(jù)分析

使用Prime軟件中Simper分析群落的優(yōu)勢物種,用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 育苗數(shù)量與幼體成活率

2011年和2012年實(shí)驗(yàn)的兩口池塘, 共培育出蟹苗(稚蟹Ⅰ至Ⅱ期)34.1×104只。2011年單位產(chǎn)苗量107.00只/m2, 2012年為 212.38 只/m2, 單位水體育苗最高產(chǎn)量為383.00只/m2。2011年幼體成活率平均0.89%, 2012年2.10%, 幼體成活率(Z1至C1~2)最高為3.19%(表2和表3)。

表1 餌料投喂量參考表Tab.1 Bait feeding quantity

表2 2011年青蟹育苗量統(tǒng)計(jì)表Tab.2 Seedling quantity statistics in 2011

表3 2012年青蟹育苗量統(tǒng)計(jì)表Tab.3 Seedling quantity statistics in 2012

2.2 幼體變態(tài)與生長

幼體生長(蚤狀幼體Ⅰ期至大眼幼體階段)符合指數(shù)生長, 計(jì)算生長曲線方程:y=0.14e0.497x(圖1),大眼幼體平均體質(zhì)量3.43 mg, 稚蟹Ⅰ期(C1)平均體質(zhì)量18.13 mg。

圖1 幼體體質(zhì)量增長結(jié)果Fig.1 Larvae weight growth curve

從蚤狀幼體孵出至蟹苗銷售的時(shí)間需要33~34 d, 出售蟹苗規(guī)格為稚蟹Ⅰ至Ⅱ期, 幼體全部變態(tài)至稚蟹再繼續(xù)培育約一周后。幼體的變態(tài)時(shí)間,Z1變態(tài)至 C1約 23~25 d(表4)。

表4 幼體變態(tài)天數(shù)Tab.4 Larva abnormal days

2.3 育苗池塘水質(zhì)因子變化

2011年育苗期間, 池塘水溫(24.85±26.50)℃, 鹽度(S)26.50±4.64。2012 年池塘水溫(23.13±1.25)℃, 鹽度 20.18±1.37(圖2, 圖3), 溶解氧(DO)(7.20±0.67)mg/L, pH8.65±0.39。

圖2 2011年育苗池塘鹽度變化Fig.2 Changes of water salinity in seedling pond in 2012

圖3 2012年育苗池塘鹽度變化Fig.3 Changes of water salinity in seedling pond in 2012

表5 2012年池塘營養(yǎng)鹽分析Tab.5 Pond nutrients in 2012

池塘氨氮濃度為(0.037±0.012) mg/L, 亞硝酸鹽濃度為(0.026±0.012) mg/L, 硝酸鹽濃度為(0.186±0.136 ) mg/L(表5)。

2.4 浮游生物種類與群落特征

2.4.1 浮游植物

鑒定出藻類20種。硅藻門:尖刺菱形藻(Nitzschia pungens Grunow),小環(huán)藻(Cyclotellasp.),曲舟藻(Pleurosigma affine), 舟形藻(Naviculasp), 角毛藻(Chaetoceros.sp.), 菱形藻(Nitzschiasp), 雙尖菱形藻(Nitzschia amphioxys), 奇異菱形藻(Nitzschia paradoxa), 楔形藻(Licmophorsp.); 綠藻門: 小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 盤星藻(Pediastrum), 卵囊藻(Oocystis), 小形平藻(Pedinomona sminor), 柵藻(Scenedesmus quadricanda), 綠球藻(Chlorellasp.); 甲藻門:裸甲藻(Gymnodinium aerucyinosum), 多甲藻(Peridinium conicum); 藍(lán)藻門:顫藻(Oscillatoria), 螺旋藻(Arthrospira)。細(xì)胞密度(1760.2×104±5119.4×104)個(gè)/L。藻類群落以小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 尖刺菱形藻(Nitzschia pungensGrunow), 小環(huán)藻(Cyclotellasp.),舟形藻(Naviculasp.), 菱形藻(Nitzschiasp.), 出現(xiàn)的頻度較高, 細(xì)胞密度大(表6)。

表6 主要藻類種類以及密度Tab.6 The main plankton species and density

2.4.2 浮游動物

鑒定出大型浮游動物種類 11種, 原生動物 12種。橈足類: 尖額真猛水蚤(Euterpe acutifrons)、透明溫劍水蚤(Thermocyclops hyalinus)、無節(jié)幼蟲(Nauplius)、精致真刺水蚤(Euchaeta concinna)、刺尾紡錘水蚤(Acartia spinicauda)、紅小毛猛水蚤(Microsetella rosea); 輪蟲: 皺褶臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis); 幼體: 輻射幼蟲(Actinula)、搖蚊幼蟲(Chironomidae larva)、纖毛幼蟲(Zoanthina larva); 線蟲: 線蟲(Nematoda)。密度(646.28±899.17)個(gè)/L(表7, 圖4, 圖5)。

原生動物: 膜袋蟲(Cyclidiumsp.)、纖毛蟲(Ciliophorasp)、蚤狀中縊蟲(Mesodinium pulex)、急游蟲(Strombidiumsp.)、草履蟲(paramoeciumsp.)、單柱偏體蟲(Dysteria monostyla)、輻射變形蟲(Amoeba radiosa)、尾毛蟲(Uronemasp.)、袋形蟲(Bursariasp.)、游仆蟲(Euplotessp.)、優(yōu)雅擬盜蟲(Strombidinopsis elegans)、鐘蟲游泳體(Vorticellasp.)。密度(6.66×104±18.57 )個(gè)/L。優(yōu)勢種類有: 游仆蟲、丁丁急游蟲、水虱幼體(表8, 圖6, 圖7)。

表7 主要大型浮游動物種類及密度Tab.7 The main species and density of zooplankton

圖4 1#池塘浮游動物密度變化Fig.4 Dynamics of zooplankton in pond 1#

圖5 2#池塘浮游動物密度變化Fig.5 Dynamics of zooplankton in pond 2#

浮游動物群落以橈足類和輪蟲生物量最大。人工投喂的皺褶臂尾輪蟲在蚤狀幼體培育的前兩周,1#池塘密度維持在 250~300個(gè)/L, 2#池塘密度200~1500 個(gè)/L, 之后, 也保持一定的數(shù)量。育苗開始約20 d(池塘進(jìn)水時(shí)開始計(jì)算)后, 尖額真猛水蚤數(shù)量上升, 密度 100~250 個(gè)/L, 無節(jié)幼蟲在進(jìn)水 1~2周時(shí)出現(xiàn)峰值。1#池塘的原生動物在育苗開始的一周后, 數(shù)量減少, 2#池塘原生動物在育苗開始15 d后,丁丁急游蟲等原生動物數(shù)量增加。固著類纖毛蟲以及幼體在育苗開始后20~25 d出現(xiàn)高峰。

表8 主要原生動物種類及密度Tab.8 The main species and density of protozoon

圖6 1#池塘原生動物密度變化Fig.6 Dynamics of protozoon in pond 1#

圖7 2#池塘原生動物密度變化Fig.7 Dynamics of protozoon in pond 2#

3 討論

育苗池塘的鹽度呈初期高, 后期低, 符合自然海區(qū)中青蟹幼體的生長發(fā)育過程經(jīng)歷了從高鹽到低鹽的過渡[8]。陳弘成和鄭金華[9]青蟹早期幼體適宜鹽度為25~30, 后期適宜鹽度為20~25。2012年育苗鹽度低, 平均 20.18±1.37, 1#池塘鹽度從 5月 29日的20.27到 6月 4日持續(xù)下降至 15.66, 期間觀察到 Z5幼體密度明顯減少, 育苗成活率可能與鹽度偏低有關(guān),推測蚤狀幼體Ⅴ期至大眼幼體階段鹽度應(yīng)高于20。

水溫是選擇合適的育苗季節(jié)的主要依據(jù)。浙江寧波沿海4月份氣溫較低, 冷空氣頻繁, 直至5月上中旬也有多個(gè)冷空氣影響, 6月份水溫穩(wěn)定并趨于明顯的上升, 鑒于當(dāng)?shù)厍嘈佛B(yǎng)殖一般在 6月上旬之前放養(yǎng), 產(chǎn)品當(dāng)年可以上市的習(xí)慣, 5月上旬育苗時(shí)段顯得十分重要。幼體變態(tài)速度與水溫有密切關(guān)系[10],整個(gè)育苗期間的水溫范圍, 2011年為(23.13±1.25)℃,2012年為(24.85±26.50)℃。幼體變態(tài)至稚蟹的時(shí)間(Z1~C1)25d左右, 整個(gè)育苗周期33 d左右, 池塘培育幼體變態(tài)時(shí)間與曾朝曙等[10]所需時(shí)間基本一致。鋸緣青蟹蚤狀幼體生長發(fā)育的適溫范圍為25~30℃。溫度對蚤狀幼體變態(tài)過程有明顯影響, 水溫大于或達(dá)到 30℃時(shí)不利于變態(tài)的進(jìn)行, 但變態(tài)后的大眼幼體對高溫適應(yīng)力增強(qiáng)[10]。寧波地區(qū)青蟹池塘育苗時(shí)間,春夏季選擇在 5~7月, 此時(shí), 水溫穩(wěn)定在 23℃以上,開展池塘育苗較為合適。

育苗期間, 池塘溶解氧處在較高的水平, pH值在正常范圍之內(nèi), 各池塘的氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽濃度不存在顯著差異(P＞0.05), 濃度普遍較低。這可能與育苗時(shí)間短, 投喂活餌料和控制配合餌料投量,加之, 池塘用防滲膜與土壤隔離以后, 大幅度減少池塘底部有機(jī)物數(shù)量有關(guān)。以上水質(zhì)指標(biāo)反映池塘的物質(zhì)代謝順暢, 水質(zhì)相對穩(wěn)定, 對育苗是十分有利的。

育苗池塘浮游藻類以硅藻、小球藻和扁藻為優(yōu)勢。小球藻作為輪蟲的營養(yǎng)強(qiáng)化餌料和保持水質(zhì)穩(wěn)定性發(fā)揮十分重要作用, 不僅可以提高輪蟲的 EPA和DHA含量, 尤其是DHA含量, 將有利于鋸緣青蟹幼體的存活和發(fā)育[11-13], 硅藻和扁藻是蝦蟹類幼體的優(yōu)良餌料。池塘橈足類豐富, 后期幼體投喂橈足類可以提高成活率[14]?？梢? 池塘育苗過程中幼體可以獲得更全面和優(yōu)質(zhì)的餌料營養(yǎng)。

育苗過程中, 尖額真猛水蚤等水蚤密度過大,合計(jì)達(dá)到120.27 個(gè)/L, 尖額真猛水蚤的繁殖速度快,日增值率 0.149[15], 而且, 猛水蚤與其幼體的游泳速度極快, 與青蟹幼體產(chǎn)生餌料和水體空間的競爭。青蟹幼體捕食水蚤與其幼體的的機(jī)會十分有限。

青蟹幼體發(fā)生固著性纖毛蟲附著現(xiàn)象比較普遍,纖毛蟲病在河蟹和三疣梭子蟹土池育苗同樣存在嚴(yán)重的危害[16-17]。2012年育苗的1#池塘沒有檢測到纖毛蟲, 2#池塘, 后期纖毛蟲密度呈高達(dá) 10×104ind/L,嚴(yán)重危害幼體的攝食和活動, 纖毛蟲可能是造成幼體成活率低的主要原因之一。纖毛蟲的主要來源可能從投喂輪蟲時(shí)攜帶入池塘, 土池培養(yǎng)輪蟲, 預(yù)防纖毛蟲十分關(guān)鍵。才女蟲(Polydorasp)對中華絨螯蟹(Eriocheir sinens)、梭子蟹土池育苗造成嚴(yán)重危害,防滲膜圍隔可以徹底避免才女蟲的滋生[18], 育苗過程中未發(fā)生才女蟲危害。

青蟹池塘生態(tài)育苗試驗(yàn)表明: 池塘餌料豐富,幼體可以獲得更全面和優(yōu)質(zhì)的餌料營養(yǎng), 水體環(huán)境良好, 經(jīng)過兩年的試驗(yàn), 在自然條件下成功培育出蟹苗, 幼體成活率和單位產(chǎn)量與梭子蟹地膜池塘育苗幼體成活率為6.95%, 單位產(chǎn)量1325.8只/m2[16]的結(jié)果接近。地膜池塘培育梭子蟹苗試驗(yàn)[18]結(jié)果, 梭子蟹幼體成活率有顯著提高(P<0.05), 平均出苗量比較土池塘的出苗量提高 16.24%, 育成率提高 63.53%,試驗(yàn)池塘的蟹苗捕撈更方便、徹底。只要選擇合適的季節(jié), 做好競爭性生物和病害的預(yù)防, 可以獲得量產(chǎn)的目標(biāo), 池塘生態(tài)育苗方法培育青蟹苗是可行的, 并有可能獲得規(guī)?；a(chǎn)的重大突破。

[1]賴慶生.青蟹養(yǎng)殖[M].北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1990.

[2]農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局.中國漁業(yè)年鑒[M].北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2010.

[3]李少菁, 王桂忠.青蟹繁殖生物學(xué)及人工育苗和養(yǎng)成技術(shù)的研究[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2001,40(2): 552-565.

[4]喬振國.鋸緣青蟹苗種培育的科技進(jìn)展[J].海洋漁業(yè), 2005, 27(2): 160-163.

[5]顧孝連, 喬振國.我國蟹類土池育苗技術(shù)研究進(jìn)展[J].海洋漁業(yè) 2012, 34(1): 110-116.

[6]金相燦, 屠清瑛.湖泊富營養(yǎng)化調(diào)查規(guī)范[M].北京:中國環(huán)境科學(xué)出版社, 2001.

[7]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局.海洋調(diào)查規(guī)范[S].GB 12763, 6-91.北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 1991.

[8]王桂忠, 林淑君, 林瓊武, 等.鹽度對鋸緣青蟹幼體存活與生長發(fā)育的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào), 1998, 22(1):89-92.

[9]陳弘成, 鄭金華.1985鱘苗人工培育之研究.I溫度鹽度對鱘卵孵化及鱘苗存活和成長之影響[J].臺灣水產(chǎn)學(xué)會會刊.12(2): 70-77.

[10]曾朝曙, 李少菁.溫度對鋸緣青蟹幼體成活與發(fā)育的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào), 1992, 16(3): 213-221.

[11]彭慧婧, 蔣 艷, 楊家林, 等.兩種補(bǔ)充營養(yǎng)在鋸緣青蟹育苗中后期的效果分析[J].廣西科學(xué), 2008,15(4): 449-451, 460.

[12]艾春香, 劉建國, 林瓊武, 等.青蟹的營養(yǎng)需求研究及其配合飼料研制[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2007, 30(增刊) :124-128.

[13]翁幼竹, 李少菁, 王桂忠.鋸緣青蟹幼體餌料的營養(yǎng)強(qiáng)化[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào) 2001, 25(3): 228-231.

[14]陳凱, 喬振國, 王朝新.不同餌料對擬穴青蟹(Scylla paramamosian)后期幼體變態(tài)及成活率的影響[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息, 2010, 25(11): 25-27.

[15]陳世杰.廈門港尖額真猛水蚤室內(nèi)培養(yǎng)的研究[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào), 1988, 12(4): 439-345.

[16]李曉東, 金送笛, 劉胥, 等.河蟹生態(tài)育苗中集中常見生物對其蚤狀幼體的影響[J].水產(chǎn)科學(xué), 2000,19(3): 1-4.

[17]閻斌倫, 梁利國, 張曉君.三疣梭子蟹主要病害研究進(jìn)展[J].水產(chǎn)科技情報(bào), 2010, 37(1): 29-37.

[18]金中文, 戴海平, 蔡志立.地膜池塘三疣梭子蟹育苗試驗(yàn)[J].福建水產(chǎn), 2010, 12(4): 35-38.