張 野

鐵嶺市婦嬰醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧鐵嶺 112000

在進(jìn)行尿液潛血的實(shí)驗(yàn)中，一般采用的是干化學(xué)法，而干化學(xué)法檢測(cè)尿液潛血存在著一定的不足，例如在假陽(yáng)性和假陰性的檢測(cè)上還有一定的缺陷[1]，而免疫膠體金法的應(yīng)用可以對(duì)其進(jìn)行有效的彌補(bǔ)，通過(guò)兩者之間的對(duì)比來(lái)進(jìn)行差異分析，從而不斷地提升尿液潛血檢測(cè)工作的靈敏度和特異度。為探討干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測(cè)中的差異，為尿液潛血臨床治療提供可靠的參考資料，該研究選擇該院在2012年7月—2013年7月所治療的252 例腎病患者作為對(duì)象進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院治療的252 例腎病患者作為此次研究的主要對(duì)象，隨機(jī)分成兩組，實(shí)驗(yàn)組為免疫膠體金法組，對(duì)照組為干化學(xué)法組，在病患當(dāng)中有138 例為女性，114 例為男性，年齡1～23 歲，平均年齡（9.12±0.36）歲。

1.2 檢測(cè)方法

要在早晨進(jìn)行患者首次中斷尿的取樣，需要注意的是，必須在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行三種比較重要的檢驗(yàn)，即膠體金單克隆抗體隱血試驗(yàn)、紅細(xì)胞鏡檢以及干化學(xué)檢測(cè)。通過(guò)嚴(yán)密的操作和實(shí)驗(yàn)，得出精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并進(jìn)行一定的記錄工作，確保各種數(shù)據(jù)的有效性和適用性，為之后的尿液潛血分析提供寶貴的參考資料。

1.3 尿液潛血檢驗(yàn)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)

陽(yáng)性:鏡檢(﹢)，免疫膠體金法(﹢)，干化學(xué)法陰血(﹢)；陰性:鏡檢(﹣)，免疫膠體金法(﹣)，干化學(xué)法陰血(﹣)；假陽(yáng)性:鏡檢(﹣)，免疫膠體金法(﹣)，干化學(xué)法陰血(﹢)；假陰性:鏡檢(﹢)，免疫膠體金法(﹢)，干化學(xué)法陰血(﹣)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。通過(guò)利用SPSS14.0 軟件將此次研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行仔細(xì)的統(tǒng)計(jì)和分析，其中計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)照組假陰性為0.0%，假陽(yáng)性為22.22%，觀察組假陽(yáng)性為0.0%，假陰性為1.20%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），具體的檢測(cè)數(shù)據(jù)如表1所示。

表1 兩組患者的尿潛血檢驗(yàn)結(jié)果比較[n（%）]

3 討論

3.1 干化學(xué)法的含義以及臨床應(yīng)用

干化學(xué)法分析技術(shù)是將液體檢測(cè)樣品加到特定的干燥試劑條上，通過(guò)被測(cè)樣品的水分來(lái)實(shí)現(xiàn)特定的化學(xué)反應(yīng)，再進(jìn)行以酶為基礎(chǔ)的干化學(xué)分析，這就是所謂的干化學(xué)法分析技術(shù)。其原理是根據(jù)紅細(xì)胞中血紅蛋白所含的血紅素具有類似過(guò)氧化物酶的作用,通過(guò)血紅素催化分解過(guò)氧化氫，釋放出新生態(tài)氧,使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色,從而達(dá)到檢測(cè)隱血的目的[2]。干化學(xué)法分析技術(shù)不僅僅被廣泛的應(yīng)用于定性檢查，而且還可以進(jìn)行半定量和定量的深入分析，為臨床檢測(cè)提供了更大的便利。且干化學(xué)法分析技術(shù)通常是運(yùn)用反射光度法或者是差示電極法來(lái)進(jìn)行測(cè)量的，具有準(zhǔn)確度高和測(cè)量速度快的特點(diǎn)，操作簡(jiǎn)單易行，不需要進(jìn)行任何試劑儲(chǔ)備或是試劑配制，而且其中的多層膜會(huì)對(duì)干擾性的物質(zhì)進(jìn)行過(guò)濾，產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)的水分來(lái)源于標(biāo)本液體成分，可以有效地提升檢測(cè)的靈敏度[3]。但由于尿液中的成份很復(fù)雜,常存在一些類似過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),如肌紅蛋白、某些細(xì)菌繁殖代謝產(chǎn)物等因素可造成干化學(xué)隱血結(jié)果的假陽(yáng)性,而還原型谷胱苷肽、維生素C 等還原劑存在時(shí),可競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),導(dǎo)致干化學(xué)法隱血檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。干化學(xué)法隱血陽(yáng)性可通過(guò)鏡檢紅細(xì)胞的存在來(lái)證實(shí),但鏡檢未發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞的現(xiàn)象在臨床檢驗(yàn)中也很常見(jiàn),這既可能是紅細(xì)胞溶解導(dǎo)致僅有游離血紅蛋白存在(低滲尿液中紅細(xì)胞溶解更為明顯),也可能是干化學(xué)法檢測(cè)隱血出現(xiàn)了假陽(yáng)性;干化學(xué)法隱血陰性可能是真陰性,但也不能排除由于檢測(cè)敏感性不足或維生素C、還原型谷胱苷肽等還原劑存在而導(dǎo)致的假陰性。且干化學(xué)法分析技術(shù)中在使用差示電極法原理時(shí)，其中的多膜片只能使用一次。在該研究中，對(duì)照組假陰性為0.0%，假陽(yáng)性為22.22%，表明存在一定的假陽(yáng)性及假陰性問(wèn)題。

3.2 免疫膠體金法的含義以及臨床應(yīng)用

免疫膠體金法其實(shí)是一種新的免疫標(biāo)記技術(shù)法，主要是利用免疫學(xué)方法來(lái)對(duì)尿液潛血給予檢測(cè)，能夠有效地利用膠體金來(lái)作為示蹤標(biāo)記物，觀察應(yīng)用之后的特異性原抗體反應(yīng)。膠體金標(biāo)記技術(shù)就是蛋白質(zhì)分子吸附在膠體金顆粒表面的過(guò)程，因?yàn)榧t色的膠體金顆粒遇到相應(yīng)的抗原或是抗體就會(huì)聚集起來(lái)，達(dá)到一定密度就會(huì)呈現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的紅色，所以在尿液潛血的檢測(cè)中被推廣利用[4]。

免疫膠體金技術(shù)在臨床應(yīng)用中具有可操作性，膠體金顆粒對(duì)于蛋白質(zhì)分子的吸附主要是依據(jù)PH 值，如果膠體金的PH 值比蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)低，就會(huì)在聚集的同時(shí)不具備結(jié)合的能力，此外膠體金顆粒的離子強(qiáng)度、蛋白質(zhì)分子量等也會(huì)影響到兩者的結(jié)合[5]。但是這種技術(shù)的標(biāo)記物制作簡(jiǎn)單，不需要使用一些放射性的同位素，也不需要熒光顯微鏡，使用的方法具有一定的敏感性和特異性，而且應(yīng)用廣泛，不僅適用于液相免疫測(cè)定，而且更適用于固相免疫分析、流式細(xì)胞術(shù)等領(lǐng)域[2]。在該研究中，觀察組假陽(yáng)性為0.0%，假陰性為1.20%，表明該方法檢測(cè)尿液潛血不會(huì)具有假陽(yáng)性問(wèn)題，可有效解決干化學(xué)法所導(dǎo)致的假炎性問(wèn)題。但是免疫膠體金技術(shù)也存在著不足，在檢測(cè)的過(guò)程中會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)漏洞，它檢測(cè)的靈敏度以及可重復(fù)性也有待提升，并且膠體金顆粒本身也具有一定的局限性，因此，以其為依托的免疫膠體金技術(shù)也是存在局限的，例如清潔度要求高、膠體金溶液穩(wěn)定差、膠體金顆粒大、滲透能力大等都會(huì)影響到檢測(cè)的結(jié)果。

3.3 干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測(cè)中的比較應(yīng)用

在進(jìn)行尿液潛血檢測(cè)的過(guò)程中，必須要進(jìn)行嚴(yán)格的觀察和實(shí)驗(yàn)，確保檢測(cè)的結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，從而為臨床治療提供寶貴的參考資料，提升醫(yī)療檢測(cè)的質(zhì)量和水平，例如在對(duì)患者進(jìn)行臨床檢驗(yàn)的過(guò)程中，如果患者的鏡檢紅細(xì)胞呈陰性，但尿液潛血檢測(cè)結(jié)果是呈陽(yáng)性，就應(yīng)該考慮是不是患者的泌尿道劃傷或者在血管的內(nèi)外存在著溶血的現(xiàn)象，一般要對(duì)患者進(jìn)行復(fù)診，但是復(fù)診會(huì)增加病患的醫(yī)療負(fù)擔(dān)，并且很容易引發(fā)醫(yī)患糾紛[6]，因此，必須使用先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行高效檢測(cè)，而干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測(cè)中的應(yīng)用使得檢測(cè)的結(jié)果有了很大的保障。

對(duì)于檢測(cè)的結(jié)果分析主要是通過(guò)干化學(xué)法尿液分析儀，利用這種自動(dòng)化的儀器可以對(duì)尿液中的一些成分進(jìn)行檢測(cè)，并且使用的標(biāo)本少，操作簡(jiǎn)單快捷，適合進(jìn)行疾病篩查和臨床疾病的普查，但是必須要控制好尿液放置的時(shí)間、陽(yáng)光的照射以及藥物性等，按照規(guī)定的要求進(jìn)行操作，避免不利因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。使用該儀器可以把催化之后的氧化氫當(dāng)作電子受體，從而實(shí)現(xiàn)色源的氧化呈色，以達(dá)到便于分析檢測(cè)結(jié)果的目的[7]。

在患者的尿液中存在著有機(jī)紅蛋白，并且尿液中的雜質(zhì)具有過(guò)氧化酶相似的活性，尿液樣本中的56 例在鏡顯中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞，但是免疫膠體金技術(shù)檢測(cè)的結(jié)果為陰性，通過(guò)兩種技術(shù)的對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，56 例樣本呈假陽(yáng)性[8]。由此可見(jiàn)，干化學(xué)法在進(jìn)行尿液潛血檢測(cè)時(shí)具有較高的靈敏度，可以被運(yùn)用到臨床篩查中，但是它也存在著缺點(diǎn)，其特異性并不高，很容易在進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)一定的誤差，對(duì)患者的病情造成誤診，增加診斷費(fèi)用，引發(fā)醫(yī)患糾紛。

同時(shí)，在該實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，有156 例尿液樣本經(jīng)過(guò)免疫膠體金法進(jìn)行檢測(cè)全部呈陽(yáng)性，它的檢測(cè)效率比干化學(xué)法檢測(cè)的效率要高，優(yōu)化率為73.83%，并且兩者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即P<0.05。但是有3 例樣本在高倍顯微鏡下呈陽(yáng)性，而免疫膠體金法檢測(cè)的結(jié)果卻是陰性，出現(xiàn)這種狀況是因?yàn)闃颖灸蛞旱募t細(xì)胞含量低，超出了其檢測(cè)的范圍，使得檢測(cè)的結(jié)果出現(xiàn)了誤差。

通過(guò)此次試驗(yàn)結(jié)果的分析可以明確的指示，免疫膠體金法在靈敏度上要比干化學(xué)法弱，而在特異度方面要比干化學(xué)法強(qiáng)，因此，在進(jìn)行對(duì)病患的尿液潛血檢測(cè)的過(guò)程中，要將兩種方法有機(jī)結(jié)合起來(lái)，確保檢測(cè)結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，提升檢測(cè)工作的質(zhì)量和水平。

[1]田利榮,孫恒壽,張慶賢,等.尿液干化學(xué)法和鏡檢法檢測(cè)尿液紅細(xì)胞結(jié)果與性別因素的分析[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè),2012,14(20):261-262.

[2]徐新,羅春麗,蒲軍,等.干化學(xué)法尿隱血檢測(cè)的可靠性分析[J].重慶醫(yī)學(xué),2012,41(18):1802-1804.

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