韓李偉，曾兆華，鄭云開，楊 廣，尤民生*

(1.福建農(nóng)林大學(xué)應(yīng)用生態(tài)研究所，福州 350002;2.農(nóng)業(yè)部閩臺(tái)作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350002;3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，福州 350013)

熊蜂隸屬于膜翅目Hymenoptera 蜜蜂科Apidae熊蜂屬Bombus，因其與蜜蜂相比具有采粉能力旺盛，對(duì)低溫、低光照適應(yīng)能力強(qiáng)、趨光性差等特點(diǎn)，成為大棚設(shè)施作物的重要授粉昆蟲(梁詩(shī)魁，2000;Velthuis，2002;李繼蓮等，2005;黃家興等，2007)。熊蜂的馴化經(jīng)歷了上百年的歷史(Velthuis and van Doorn，2006)，商品化飼養(yǎng)熊蜂一般采用蜂蜜、蔗糖或者轉(zhuǎn)換糖溶液和新鮮凍花粉作為食物。

花粉作為熊蜂工廠化生產(chǎn)主要蛋白飼料，其來源與質(zhì)量對(duì)雌性蜂產(chǎn)卵和幼蟲發(fā)育有很大影響。李屬Prunus、柳屬Salix、蒲公英屬Taraxacum 和一種商業(yè)混合花粉對(duì)歐洲熊蜂Bombus terrestris 工蜂群有影響，單一花粉的質(zhì)量對(duì)產(chǎn)卵量沒有影響，但會(huì)延遲產(chǎn)卵和幼蟲發(fā)育，李屬花粉蛋白含量和蛋白功效最高，所飼喂的熊蜂產(chǎn)生后代數(shù)最多(Genissel et al.，2002)。從6 種純花粉和9 種混合花粉對(duì)熊蜂工蜂產(chǎn)卵的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值研究中發(fā)現(xiàn)，單一花粉中向日葵屬和巖玫瑰屬花粉組產(chǎn)生的幼蟲最輕，含有96%蕓苔屬花粉的混合花粉組產(chǎn)生的幼蟲體重最重(Tasei and Aupinel，2008)。不同飼料對(duì)熊蜂工蜂蜂群發(fā)育影響的研究結(jié)果表明，飼喂玉米花粉的工蜂壽命小于其他花粉組，杏花組產(chǎn)卵量最高，杏花粉組和茶花粉組的幼蟲拖出數(shù)量最低，杏花粉組和油菜花粉組的雄蜂出房時(shí)間最短，杏花粉組的子代雄蜂數(shù)量最高 (吳杰，2009)?；ǚ鄢煞峙c熊蜂的發(fā)育質(zhì)量存在關(guān)系，含有24-亞甲膽淄醇和較高多肽 (總氨基酸)的歐洲花楸、金雀花花粉飼喂的幼蟲更大(Vanderplanck et al.，2014)。以上研究主要以熊蜂的工蜂群為研究對(duì)象，對(duì)有王蜂群各階段發(fā)育影響的研究較少，目前僅吳杰(2009)研究了杏花粉和油菜花粉對(duì)小峰熊蜂蜂群發(fā)育的影響，發(fā)現(xiàn)杏花粉喂養(yǎng)的成群前期短于油菜花粉，而杏花粉和混合花粉新生蜂王數(shù)更多，由此建議在蜂群成群前飼喂純杏花粉，成群后飼喂50% 油菜+50%杏花粉，但具體的飼料轉(zhuǎn)換時(shí)間尚需進(jìn)一步研究。

本試驗(yàn)選擇了杏花粉和油菜花粉的3 種配比，研究了在明亮熊蜂蜂王產(chǎn)卵、始見工蜂時(shí)，轉(zhuǎn)換飼喂飼料對(duì)明亮熊蜂有王蜂群發(fā)育的影響，為優(yōu)化熊蜂人工飼養(yǎng)的花粉配方提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蜂王

本實(shí)驗(yàn)于2013年11月到2014年2月在福建農(nóng)林大學(xué)應(yīng)用生態(tài)研究所進(jìn)行。將140 頭發(fā)育一致且生長(zhǎng)狀況良好的明亮熊蜂蜂王，隨機(jī)分成7 組，每組20 頭，即每個(gè)處理重復(fù)20 次。采用2 次CO2麻醉法解除滯育后，于2013年11月28 日移入蜂王產(chǎn)卵起始箱，純杏花粉單獨(dú)飼喂。

1.2 飼養(yǎng)條件

環(huán)境條件:溫度為28±1℃，相對(duì)濕度60±5%。

蜂箱:蜂王產(chǎn)卵起始箱 (10 cm× 10 cm×10 cm)，始見工蜂后轉(zhuǎn)移到飼養(yǎng)箱(產(chǎn)卵室18 cm×24 cm×16 cm，排泄室10 cm×24 cm×8 cm)。

1.3 供試花粉

供試花粉為新鮮杏花粉和新鮮油菜花粉，于-18℃冰箱保存。

1.4 飼喂處理

產(chǎn)卵前期(從蜂王入箱到蜂王產(chǎn)卵)均采用純杏花粉飼喂，A1、A2、A3 在蜂王產(chǎn)卵時(shí)轉(zhuǎn)換花粉，B1、B2、B3 在始見工蜂時(shí)轉(zhuǎn)換花粉，具體配比如下表(表1)。

各處理蜂王均飼喂足量的花粉和50%蔗糖溶液，每2 d 更換一次，及時(shí)清除剩余食物和糞便。

1.5 蜂群管理

始見工蜂后，將蜂王和工蜂一并轉(zhuǎn)移到飼養(yǎng)箱繼續(xù)飼養(yǎng);當(dāng)出房工蜂數(shù)量達(dá)30 頭時(shí)，記錄為成群時(shí)間。

1.6 觀察指標(biāo)

每天觀察蜂王活動(dòng)和蜂群發(fā)育情況，記錄蜂王存活情況、產(chǎn)卵情況、始見工蜂時(shí)間、成群時(shí)間等。

1.7 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 22 對(duì)所采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。用卡方檢驗(yàn)分析工蜂出房率之間、成群率之間的差異性，單因素方差分析對(duì)不同時(shí)間段蜂王產(chǎn)卵率、不同花粉配比的始見工蜂時(shí)間和成群時(shí)間進(jìn)行差異顯著性分析，并用S-N-K 法進(jìn)行多重比較，差異顯著水平α=0.05。

表1 在明亮熊蜂不同發(fā)育階段花粉組合處理(杏花粉∶油菜花粉，V/V)Table 1 The treatments of different pollen mixtures at different development stages of Bombus lurorum (apricot pollen∶rape pollen，V/V)

2 結(jié)果與分析

2.1 純杏花粉飼喂下首次產(chǎn)卵蜂王個(gè)數(shù)的時(shí)間分布

本試驗(yàn)中，40 d 內(nèi)產(chǎn)卵蜂王總數(shù)為128 頭，產(chǎn)卵率為91.43%。采用純杏花粉飼喂的明亮熊蜂蜂王產(chǎn)卵率動(dòng)態(tài)如圖1。從圖中可以看出，在不同時(shí)間段之間首次產(chǎn)卵的蜂王數(shù)有顯著差異(F=24.56，df1=7，df2=48，P=0)，其中，在第6-15 d 內(nèi)首次產(chǎn)卵蜂王數(shù)量最多，占40 d 內(nèi)產(chǎn)卵蜂王總數(shù)的72.66%，產(chǎn)卵前期小于20 d的蜂王數(shù)為108 頭，占77.14%，20-40 d 產(chǎn)卵蜂王數(shù)為20 頭，占14.28%。

2.2 不同花粉處理對(duì)工蜂出房率和始見工蜂時(shí)間的影響

不同花粉處理下，明亮熊蜂工蜂出房群數(shù)及各蜂群始見工蜂時(shí)間的情況如表2。本階段中，B1、B2、B3、CK 仍采用純杏花粉飼喂，將其看作空白處理，與A1、A2、A3 進(jìn)行比較。結(jié)果表明各處理之間的出房率差異不顯著(χ2=2.25，df=3，P=0.52)，始見工蜂時(shí)間差異不顯著(F=1.75，df1=3，df2=82，P=0.16)。

表2 不同花粉處理下明亮熊蜂工蜂首次出房率和出房時(shí)間Table 2 The rate of worker emergence and the time of first worker emergence for Bombus lurorum feeding on different pollen diets

2.3 不同花粉處理對(duì)成群率和成群時(shí)間的影響

不同配比的花粉處理對(duì)成群率和成群時(shí)間的影響如表3。結(jié)果分析表明各處理之間的成群率差異不顯著(χ2=3.56，df=6，P=0.74)，但各處理之間的成群時(shí)間差異顯著(F=2.47，df1=6，df2=39，P=0.04)。其中，A3的成群時(shí)間為83.00 ±2.64 d，與A2、B3的成群時(shí)間(74.33 ±3.24 d，72.67 ±2.82 d)差異不顯著，但與其他處理之間均有顯著差異;且除A3 外，其他不同的混合花粉飼喂明亮熊蜂蜂王與純杏花粉飼喂在成群時(shí)間上均無顯著差異。分別在蜂王產(chǎn)卵后和始見工蜂后更換為杏花粉∶油菜花粉=2∶1的混合花粉飼喂明亮熊蜂蜂王的成群時(shí)間之間差異不顯著(t=-0.74，df=12，P=0.47)，更換為杏花粉∶油菜花粉=1 ∶1的混合花粉差異亦不顯著(t=1.72，df=13，P=0.11);但更換為杏花粉∶油菜花粉=1 ∶2 有顯著差異(t=2.52，df=8，P=0.036)。

表3 不同花粉處理下明亮熊蜂的成群率和成群時(shí)間Table 3 Rate and period of colonization for Bombus lurorum feeding on different pollen diets

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)中的明亮熊蜂蜂王首次產(chǎn)卵的時(shí)間主要集中在6-15 d，占總產(chǎn)卵蜂王數(shù)的72.85%，這符合采用兩次CO2麻醉交配后蜂王產(chǎn)卵時(shí)間縮短到17-18 d的結(jié)論(Yoon et al.，2003)。但是有研究建議應(yīng)該拋棄產(chǎn)卵前期大于20 d的蜂王(Yoon et al.，2004;Strange，2010)，主要是因?yàn)楫a(chǎn)卵前期大于20 d的蜂王質(zhì)量差、成群率低，本試驗(yàn)中產(chǎn)卵前期大于20 d的蜂王數(shù)為20 頭，占14.28%，這可能是導(dǎo)致本試驗(yàn)中工蜂出房率和成群率整體較低的原因之一。

在蜂王產(chǎn)卵后采用不同的混合花粉飼喂蜂王，對(duì)蜂群的工蜂出房率和始見工蜂時(shí)間無顯著影響，說明在始見工蜂前，花粉質(zhì)量不是影響蜂群發(fā)育的主要因素，可能是因?yàn)榇穗A段蜂王的主要任務(wù)是孵化幼蟲，而不是大量產(chǎn)卵，所以對(duì)蛋白質(zhì)飼料的質(zhì)量要求不高。

在蜂王產(chǎn)卵后和始見工蜂后更換為不同配比的混合花粉之間對(duì)成群率無顯著影響，但在成群時(shí)間上有顯著差異，其中更換為杏花粉∶油菜花粉=1∶2的混合花粉表現(xiàn)出最長(zhǎng)的成群時(shí)間。此階段是蜂群發(fā)育的繁盛期，此時(shí)蜂群對(duì)蛋白質(zhì)的需求量大、質(zhì)量要求高。不同配比的花粉組合其游離氨基酸和必需氨基酸含量有很大不同，因而會(huì)對(duì)蜂群發(fā)育造成不同影響 (王開發(fā)等，1999;Genissel et al.，2002)。

在熊蜂的成群階段和后期育王階段，純油菜花粉不如純杏花粉或杏花粉與油菜花粉混合的效果好(吳杰，2009)，但是熊蜂發(fā)育過程中花粉的更換對(duì)熊蜂飼喂效應(yīng)的影響尚未知曉。本試驗(yàn)設(shè)置“蜂王首次產(chǎn)卵”和“始見工蜂”為兩個(gè)花粉更換時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在不同時(shí)間點(diǎn)更換為杏花粉:油菜花粉=1∶2的混合花粉有顯著差異，更換為其他同一混合花粉無顯著差異。且在蜂王產(chǎn)卵后更換為杏花粉∶油菜花粉=1∶2的混合花粉的蜂群表現(xiàn)較差;在蜂群始見工蜂后，適當(dāng)增加油菜花粉在飼喂飼料中的配比對(duì)蜂群發(fā)育無影響，綜合考慮飼養(yǎng)成本和飼養(yǎng)效率等因素，故建議在人工飼養(yǎng)明亮熊蜂的過程中，蜂群始見工蜂后更換為杏花粉∶油菜花粉=1∶1 混合花粉進(jìn)行飼喂。

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