方 甜，廖志湖，劉道榮，李 榮，王汝庭

（湖南正大畜禽有限公司，湖南長沙410100）

影響公豬精液品質(zhì)的外在因素

方 甜，廖志湖，劉道榮，李 榮，王汝庭

（湖南正大畜禽有限公司，湖南長沙410100）

分別從稀釋液配制用水的選擇、稀釋液處理條件的選擇、精液保存條件的選擇這三個方面入手，來確定化驗室常規(guī)操作中影響公豬精液品質(zhì)的最適宜外在因素。三項外因均呈明顯的對比效果，并確定出二次蒸餾水配制稀釋液、稀釋液采用37℃溫配，并靜置1h后使用、采用水為介質(zhì)保存精液為該三項外因中的最佳值。試驗表明，通過尋找適宜的外在影響因子，可有效保證精液的最佳品質(zhì)。

公豬；精液；品質(zhì)；影響；因素

現(xiàn)有化驗室常規(guī)操作指導手冊里或其他相關(guān)資料里，對于稀釋液的處理環(huán)節(jié)上只有常規(guī)的配制方法和配方，在精液的保存方面也只給出了適宜溫度的參考。目前常見的同類文獻也都側(cè)重于稀釋液配方的研究[1]；不同稀釋液對豬精液常溫保存效果的研究[2]；以及延長常溫保存生豬精液有效期的研究[3]。鮮見有文獻對于稀釋精液的具體操作中的技巧性細節(jié)處理進行研究報道；本研究主要對影響豬精液品質(zhì)的外在因素進行研究。

1 材料和方法

1.1 材料

公豬精液原液、比利時精液稀釋粉CXM-MY；飲用純凈水、一次蒸餾水、二次蒸餾水；恒溫冰箱、恒溫水浴鍋、顯微鏡。

1.2 方法

1.2.1 稀釋液配制用水的篩選方法

規(guī)?；N豬場中普遍采用的稀釋液用水有三種：飲用純凈水（Ⅰ）、一次蒸餾水（Ⅱ）、二次蒸餾水（Ⅲ）。采取三頭精液品質(zhì)較好的公豬的精液，分別用上述三種水樣配制的稀釋液進行稀釋，并觀察效果。

1.2.2 稀釋液的處理條件的篩選方法

稀釋液用于稀釋精液前的處理方法一般為：常溫水配制，即配即用；為尋求最佳效果，本實驗中采用37℃溫水配制，配制后靜置1h后在進行使用，并觀察效果。

1.2.3 精液保存條件的篩選方法

稀釋后的精液保存的方式一般為：直接置于15～18℃恒溫冰箱中保存；為尋求最佳效果，本實驗中采用水浴方式保存：將稀釋后的精液置于裝有常溫水的容器中，然后置于15～18℃恒溫冰箱中保存，并觀察效果。

1.3 效果判定標準

活力：指作直線運動的精子量占整個視野精子量的比重，通常≥70%為合格可用精液，活力越高，品質(zhì)越好。

凝集度：指出現(xiàn)凝集反應(yīng)的精子量占整個視野精子量的的比重，凝集度越低，品質(zhì)越高。

運動波：指精液群在顯微鏡視野下的運動狀態(tài)，波動越強，品質(zhì)越好

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2 試驗結(jié)果

2.1 稀釋液配制用水的篩選結(jié)果

由表1可知，三種不同品系的優(yōu)質(zhì)原精都對不同的稀釋用水產(chǎn)生了較為敏感的反應(yīng)。隨著水樣的純度提升，其稀釋后活力越穩(wěn)定，與原精活力越接近，因精子活躍度較高，會形成較明顯的運動波；同時因稀釋產(chǎn)生的應(yīng)激相應(yīng)降低，具體表現(xiàn)為稀釋后形成的凝集團較少，即凝集度較低；再次，在保存后的同等精液上同樣體現(xiàn)了類似表現(xiàn)，表明其保存時間亦可相應(yīng)地延長。

2.2 稀釋液的處理條件的篩選結(jié)果

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從表2可知，長白和大白兩頭優(yōu)質(zhì)公豬的精液對下表中四種不同的處理方式均產(chǎn)生了相應(yīng)的反應(yīng)，具體表現(xiàn)為，稀釋用水的溫度與公豬體溫越接近，其配制的稀釋液效果越佳，稀釋后的精液活力越穩(wěn)定，死精凝集度越低，精液存活時間越長；另外，“待用”即休整一定時間，約30min～1h后的稀釋液稀釋的精液效果優(yōu)于即配即用的稀釋液。

2.3 精液保存條件的篩選結(jié)果

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從表3可知，精樣6073在保存第二天AM的活力對比上可看出，水浴效果優(yōu)于常規(guī)；精樣5615在保存第二天PM的活力對比上可看出，水浴效果優(yōu)于常規(guī)；精樣7381在保存第二天AM的活力對比上可看出，水浴效果優(yōu)于常規(guī)；精樣5425沒有產(chǎn)生明顯的對比效果，試驗表明，該項試驗對結(jié)果產(chǎn)生的敏感性為75%。

3 結(jié)果分析

試驗一結(jié)果表明用二次蒸餾水配制的稀釋液效果最優(yōu)，一次蒸餾水效果次之，飲用純凈水效果最差。精液稀釋液，是用于擴大精液容量，給精子提供營養(yǎng)、中和精子代謝產(chǎn)物、保持精液PH值得勝利溶液。故其滲透壓必須與新鮮精液的滲透壓接近，因此要求制備稀釋液的溶劑必須為純的H2O。理論上，上述三種水樣均為純的H2O，但飲用純凈水的純度受商家影響，若標準過低，則其電解質(zhì)的殘留會較高；一次蒸餾水受當?shù)厮|(zhì)影響，若水質(zhì)過重，一次蒸餾無法去除所有電解質(zhì)；綜上，二次蒸餾水應(yīng)為規(guī)?；N豬場配制精液稀釋液用水的最佳選擇。

試驗二結(jié)果表明，采用37℃的溫水配制的稀釋液稀釋精液的效果優(yōu)于常溫水配制的稀釋液；充分靜置后的稀釋液稀釋精液的效果優(yōu)于即配即用的稀釋液。原因在于，藥品在高溫條件下溶解更快更充分，同時要保證酶和抗生素不失效，故37℃最理想；稀釋液在配制完（稀釋完）后，各種營養(yǎng)物質(zhì)尚未充分溶解，性質(zhì)未達穩(wěn)定，其PH亦未達到平衡，故需要一定時間的靜置。

試驗三結(jié)果表明，水浴保存的效果優(yōu)于常規(guī)保存，原因在于，用水做介質(zhì)可以保證精液各部分接觸的溫度更均勻，也更接近15～18℃的理想狀態(tài)。

本研究正是從蒸餾水、配制的稀釋液的溫水溫度、保存條件等細節(jié)入手，尋找的突破口，方法簡單、可操作性強，可執(zhí)行度高。

4 小結(jié)

精液從采出到稀釋、分裝、保存、輸精，每一個環(huán)節(jié)都至關(guān)重要，故可對其品質(zhì)造成影響的因素也較多，本實驗中從三個方面入手去探尋影響精液品質(zhì)的外在因素，并取得了明顯的效果。在以后的工作中，其他最佳外因還有待繼續(xù)探究?！?/p>

[1]張 沿.豬精液常溫保存稀釋液配方的篩選及精子頂體染色研究[D].河南農(nóng)業(yè)大學，2010，23-27.

[2]朱永雄.不同稀釋液對豬精液常溫保存效果的研究[J].江西農(nóng)業(yè)學報,2011，23(9):1.

[3]邱冬生.延長常溫保存生豬精液有效期的研究[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志,2003,4:2.

S828.34

C

1006-4907（2014）03-0011-02

10.3969/j.issn.1006-4907.2014.03.005

2014-02-19