馮秀娟　李忠生

摘要：本研究評價(jià)了氟尼辛葡甲胺注射液對靶動物犬的安全性，為其臨床應(yīng)用劑量選擇提供科學(xué)依據(jù)。選用24只健康史賓格犬隨機(jī)分成4組，試驗(yàn)組分別按氟尼辛葡甲胺注射液臨床推薦劑量的1倍（2 mg/kg）、3倍（6 mg/kg）、5倍（10 mg/kg）肌內(nèi)注射給藥，空白對照組肌內(nèi)注射給予注射用水，連續(xù)給藥5 d。給藥后觀察臨床癥狀，并于不同時(shí)間點(diǎn)（給藥前、給藥中、給藥后）采集血液進(jìn)行血常規(guī)以及血液生化指標(biāo)測定。試驗(yàn)結(jié)束后尸體剖檢并進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果顯示：在整個試驗(yàn)過程中，試驗(yàn)犬只精神正常，無死亡，無其他不良反應(yīng)。各試驗(yàn)組部分血常規(guī)及血生化指標(biāo)值在給藥前后存在一定的顯著性差異，但基本上都在參考值范圍內(nèi)波動。尸體剖檢無明顯眼觀病理變化，病理組織學(xué)檢查結(jié)果顯示高劑量組與對照組臟器組織（肝、心、脾、肺、腎）均無異常，無明顯病理變化。以上結(jié)果表明，氟尼甲葡辛胺注射液在2～10 mg/kg對犬的血液生理及生化指標(biāo)影響小，無毒性反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全。

關(guān)鍵詞：氟尼辛葡甲胺；注射液；犬；靶動物；安全性

中圖分類號： S859.83文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2014）09-0185-04

收稿日期：2013-12-13

作者簡介：馮秀娟（1978—），女，博士，助理研究員，從事新獸藥產(chǎn)品開發(fā)工作。E-mail：kingdunfxj@126.com。氟尼辛葡甲胺（flunixin meglumine，F(xiàn)M），系氟胺煙酸的葡甲胺鹽，為動物專用的非甾體類解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥（NSAIDs），其作用機(jī)制在于通過抑制花生四烯酸反應(yīng)鏈中的環(huán)氧化酶，減少前列腺素和血栓烷等炎性介質(zhì)生成，有效緩解機(jī)體的發(fā)熱、炎癥和疼痛[1]。起效迅速，一般在15 min內(nèi)可減輕疼痛，效力比鎮(zhèn)痛新、哌替啶、可待因更高。參照《寵物用藥物對靶動物安全性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》[2]，結(jié)合實(shí)際情況進(jìn)行本試驗(yàn)，考察了肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性試驗(yàn)，為其臨床安全應(yīng)用提供劑量選擇依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)藥品

氟尼辛葡甲胺注射液，規(guī)格2 mL ∶0.01 g，批號20121211，由南京金盾動物藥業(yè)有限責(zé)任公司提供。

1.2試驗(yàn)動物

健康史賓格犬24只，體重8～10 kg，雌雄均有，由江蘇省南京市西崗安德圣犬業(yè)有限公司提供。試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，自由飲水，采樣期間正常飼養(yǎng)管理。

1.3儀器設(shè)備

全自動動物血細(xì)胞分析儀：XFA6130型，南京普朗醫(yī)用設(shè)備有限公司。全自動生化分析儀：BS-300，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。組織切片機(jī)：德國Leica公司生產(chǎn)。光學(xué)顯微鏡（BH-2），日本Olympus公司生產(chǎn)。

1.4試驗(yàn)方法

1.4.1試驗(yàn)動物分組及給藥24只健康犬稱重后編號，隨機(jī)分為4組，每組6只。試驗(yàn)組分別按氟尼辛葡甲胺注射液臨床推薦劑量的1倍（2 mg/kg）、3倍（6 mg/kg）、5倍（10 mg/kg）肌內(nèi)注射給藥，空白對照組按0.4 mL/kg肌內(nèi)注射生理鹽水[3]。各組每天給藥1次，連續(xù)給藥5 d。

1.4.2樣品采集與處理各組動物分別在第1次給藥前（0 d）、給藥中（3 d）、最后一次給藥后的第2天（6 d）的同一時(shí)間采血，每次分別采集1 mL的抗凝血（用枸櫞酸鈉抗凝）和4 mL的非抗凝血。抗凝血用于血常規(guī)檢查。非抗凝血樣品先置于4 ℃冰箱中靜置1 h，37 ℃水浴30 min，4 000 r/min離心10 min，取上層血清用于血液生化指標(biāo)測定。

1.5觀察指標(biāo)

1.5.1臨床觀察觀察動物是否有與藥物相關(guān)的不良反應(yīng)，如行為異常、呼吸異常、精神抑制及排糞異常等變化情況。

1.5.2血常規(guī)指標(biāo)檢查按“1.4.2”節(jié)方法采集抗凝血，進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)檢查，檢查指標(biāo)主要有：血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）和紅細(xì)胞壓積（HCT）等。

1.5.3血液生化指標(biāo)檢查按“1.4.2”節(jié)方法制備血清，進(jìn)行血液生化指標(biāo)測定，檢查指標(biāo)主要有：總膽固醇（TCHO）、血糖（GLU）、肌酐（CRE）、總膽紅素（TBILI）、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）；血清總蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、血清尿素氮（UN）；血清鈣（Ca）、無機(jī)磷（P）等。

1.5.4尸體剖檢最高劑量組和對照組全部剖殺，進(jìn)行系統(tǒng)解剖學(xué)檢查。

1.5.5組織病理學(xué)檢查試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對高劑量組及尸檢異常的尸體進(jìn)行系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查，需要檢查的器官有：肝、脾、肺、腎、心。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)值用x±s表示，用EXCEL進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用雙側(cè)檢驗(yàn)，各組組內(nèi)給藥前后比較采用配對t檢驗(yàn)。

2結(jié)果與分析

2.1臨床觀察

試驗(yàn)期間觀察發(fā)現(xiàn)：氟尼辛葡甲胺注射液高、中劑量組犬在給藥時(shí)表現(xiàn)出明顯的疼痛反應(yīng)，有反抗動作，給藥部位出現(xiàn)輕微的腫脹。低劑量組和空白對照組犬也呈現(xiàn)一定的疼痛反應(yīng)。給藥結(jié)束后，各試驗(yàn)組犬精神活躍，食欲及活動正常，呼吸平穩(wěn)，排尿及排糞正常，整個試驗(yàn)過程中無犬死亡。

2.2血常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果（表1）顯示：各劑量組WBC、HGB、HCT指標(biāo)值與給藥前相比有一定的變化，其中高、中劑量組的HGB在給藥后要顯著低于給藥前（P<0.05），但處于參考值范圍內(nèi)。其他各組各指標(biāo)給藥前后相比差異均不顯著（P>005）。此結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg的范圍內(nèi)對犬的血常規(guī)指標(biāo)影響較小。

2.3血液生化指標(biāo)檢測結(jié)果

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果（表2）顯示：高、中劑量給藥后的ALT、AST及CRE水平顯著高于給藥前（P<0.05）。試驗(yàn)組其他生化指標(biāo)值在給藥后都發(fā)生了一定的變化，但都在可查閱的參考值范圍內(nèi)波動。此結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg的范圍內(nèi)對犬的血液生化指標(biāo)影響較小。endprint

2.4尸體剖檢及病理組織學(xué)檢查結(jié)果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學(xué)切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗(yàn)參考農(nóng)業(yè)部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導(dǎo)原則概述》[3]，研究了肌內(nèi)注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

3.1臨床表現(xiàn)

本試驗(yàn)按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內(nèi)注射給藥，1次/d，連續(xù)給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應(yīng)。結(jié)果顯示，整個給藥期內(nèi)，試驗(yàn)犬并未表現(xiàn)出不適與毒性反應(yīng)癥狀，僅見給藥時(shí)犬表現(xiàn)出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現(xiàn)輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規(guī)指標(biāo)的影響

血常規(guī)指標(biāo)的波動能反映血液系統(tǒng)本身的生理、病理變化，以及機(jī)體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導(dǎo)作用。本試驗(yàn)通過測定給藥期間不同時(shí)間的血常規(guī)各指標(biāo)，觀察給藥后對犬血常規(guī)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示：給藥前后各試驗(yàn)組某些指標(biāo)值略有變化，但基本在參考值范圍內(nèi)波動。結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內(nèi)對犬的血常規(guī)指標(biāo)影響小。

3.3對血生化指標(biāo)的影響

獸醫(yī)臨床上常對犬、貓等血液生化指標(biāo)如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐等進(jìn)行監(jiān)測，用以監(jiān)測動物肝腎功能的變化。本試驗(yàn)通過測定給藥前后血液生化指標(biāo)來評價(jià)肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對試驗(yàn)犬肝腎功能的影響。結(jié)果顯示：部分指標(biāo)給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內(nèi)波動，該結(jié)果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗(yàn)考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結(jié)果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學(xué)檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標(biāo)影響較小，未見臨床異常表現(xiàn)及毒性反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳文學(xué)，王中杰，李金祥. 新獸藥氟尼辛葡甲胺的研究[J]. 中國獸醫(yī)雜志，2006，42（1）：51-53.

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[3]蕭惠來. VICH獸藥靶動物安全性研究指導(dǎo)原則概述[J]. 中國獸藥雜志，2009，43（12）：33-37.

[4]周偉偉，陳未，賀生中. 犬子宮蓄膿對其血液生理及生化指標(biāo)的影響研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009（12）：216，227.

[5]張華，侯紹華. 血常規(guī)檢查在犬貓疾病診斷中的應(yīng)用[J]. 中國動物檢疫，2009，26（3）：55-56.

[6]徐叔云. 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]. 3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.

[7]齊云，蔡潤蘭，劉彬，等. 新藥長毒試驗(yàn)動物血液生化測定規(guī)范化研究系列之七——Beagle犬血液生化參考值的建立[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（4）：201-203，207.張保平，李娜，高惠林，等. 豪豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：189-190.endprint

2.4尸體剖檢及病理組織學(xué)檢查結(jié)果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學(xué)切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗(yàn)參考農(nóng)業(yè)部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導(dǎo)原則概述》[3]，研究了肌內(nèi)注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

3.1臨床表現(xiàn)

本試驗(yàn)按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內(nèi)注射給藥，1次/d，連續(xù)給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應(yīng)。結(jié)果顯示，整個給藥期內(nèi)，試驗(yàn)犬并未表現(xiàn)出不適與毒性反應(yīng)癥狀，僅見給藥時(shí)犬表現(xiàn)出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現(xiàn)輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規(guī)指標(biāo)的影響

血常規(guī)指標(biāo)的波動能反映血液系統(tǒng)本身的生理、病理變化，以及機(jī)體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導(dǎo)作用。本試驗(yàn)通過測定給藥期間不同時(shí)間的血常規(guī)各指標(biāo)，觀察給藥后對犬血常規(guī)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示：給藥前后各試驗(yàn)組某些指標(biāo)值略有變化，但基本在參考值范圍內(nèi)波動。結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內(nèi)對犬的血常規(guī)指標(biāo)影響小。

3.3對血生化指標(biāo)的影響

獸醫(yī)臨床上常對犬、貓等血液生化指標(biāo)如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐等進(jìn)行監(jiān)測，用以監(jiān)測動物肝腎功能的變化。本試驗(yàn)通過測定給藥前后血液生化指標(biāo)來評價(jià)肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對試驗(yàn)犬肝腎功能的影響。結(jié)果顯示：部分指標(biāo)給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內(nèi)波動，該結(jié)果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗(yàn)考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結(jié)果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學(xué)檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標(biāo)影響較小，未見臨床異常表現(xiàn)及毒性反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全。

參考文獻(xiàn)：

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[7]齊云，蔡潤蘭，劉彬，等. 新藥長毒試驗(yàn)動物血液生化測定規(guī)范化研究系列之七——Beagle犬血液生化參考值的建立[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（4）：201-203，207.張保平，李娜，高惠林，等. 豪豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：189-190.endprint

2.4尸體剖檢及病理組織學(xué)檢查結(jié)果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學(xué)切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗(yàn)參考農(nóng)業(yè)部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導(dǎo)原則概述》[3]，研究了肌內(nèi)注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

3.1臨床表現(xiàn)

本試驗(yàn)按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內(nèi)注射給藥，1次/d，連續(xù)給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應(yīng)。結(jié)果顯示，整個給藥期內(nèi)，試驗(yàn)犬并未表現(xiàn)出不適與毒性反應(yīng)癥狀，僅見給藥時(shí)犬表現(xiàn)出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現(xiàn)輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規(guī)指標(biāo)的影響

血常規(guī)指標(biāo)的波動能反映血液系統(tǒng)本身的生理、病理變化，以及機(jī)體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導(dǎo)作用。本試驗(yàn)通過測定給藥期間不同時(shí)間的血常規(guī)各指標(biāo)，觀察給藥后對犬血常規(guī)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示：給藥前后各試驗(yàn)組某些指標(biāo)值略有變化，但基本在參考值范圍內(nèi)波動。結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內(nèi)對犬的血常規(guī)指標(biāo)影響小。

3.3對血生化指標(biāo)的影響

獸醫(yī)臨床上常對犬、貓等血液生化指標(biāo)如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐等進(jìn)行監(jiān)測，用以監(jiān)測動物肝腎功能的變化。本試驗(yàn)通過測定給藥前后血液生化指標(biāo)來評價(jià)肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對試驗(yàn)犬肝腎功能的影響。結(jié)果顯示：部分指標(biāo)給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內(nèi)波動，該結(jié)果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗(yàn)考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結(jié)果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學(xué)檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內(nèi)注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結(jié)果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標(biāo)影響較小，未見臨床異常表現(xiàn)及毒性反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全。

參考文獻(xiàn)：

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[4]周偉偉，陳未，賀生中. 犬子宮蓄膿對其血液生理及生化指標(biāo)的影響研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009（12）：216，227.

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[7]齊云，蔡潤蘭，劉彬，等. 新藥長毒試驗(yàn)動物血液生化測定規(guī)范化研究系列之七——Beagle犬血液生化參考值的建立[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（4）：201-203，207.張保平，李娜，高惠林，等. 豪豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（9）：189-190.endprint