師夢凡，何文君，謝日青，劉艷麗，許瓊明，楊世林

(蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)院天然藥物化學(xué)教研室，江蘇蘇州 215123)

枸骨Ilex Cornuta Lindl為冬青科常綠植物，主產(chǎn)于河南、湖北、湖南、安徽、江蘇等地，其根、枝、葉和果均可入藥，其葉既為常用中藥，也為苦丁茶的主要來源之一［1］。枸骨具有散風(fēng)熱、清頭目、解煩悶、活血脈的功能，亦用于冠心病心絞痛和高血壓癥［2］。枸骨根味苦，性涼，無毒，有補(bǔ)肝腎、健腰膝、除風(fēng)濕、涼血清熱作用。民間用于肝腎不足，關(guān)節(jié)疼痛，牙痛。

枸骨葉的主要化學(xué)成分包括黃酮及其多酚類化合物、三萜及其皂苷類等［3-5］。近年藥理學(xué)研究表明，枸骨葉具有抗心肌缺血、降血脂、抗氧化、免疫抑制、抗生育等廣泛的藥理作用［6-8］。研究發(fā)現(xiàn)枸骨根含有多種三萜和皂苷類化學(xué)成分［9］，與枸骨葉的化學(xué)成分相似［10］，因此我們推測其可能具有心血管方面的活性。本實(shí)驗(yàn)旨在通過血瘀證大鼠模型，考察枸骨根對其血液流變性的影響，為枸骨根在治療血瘀證方面的研究和開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 動物 SD大鼠，180～220 g，雄性，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限責(zé)任公司提供 (許可證號SCXK(滬)2007-0005)。飼料和墊料由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，實(shí)驗(yàn)期間動物自由采食和飲水。

1.2 試劑與藥品 鹽酸腎上腺素 (sigma公司，Lot:070M2015V);戊巴比妥鈉 (Germany，批號6900183);地奧心血康膠囊 (成都地奧制藥集團(tuán)有限公司，批號1010033);丹參片 (上海雷允上藥業(yè)有限公司，批號100916)。

1.3 枸骨根醇提物 由蘇州大學(xué)藥物化學(xué)教研室提供。枸骨根200 kg，用50%乙醇回流提取2次，提取液減壓濃縮得不含乙醇濃縮液。濃縮液 (100 L)過D101離子交換柱，用純水、30%、60%、90%乙醇洗脫，合并30%與60%乙醇洗脫部分作藥理研究。

1.4 儀器 LG-R-80B電腦血液黏度測試儀 (北京世帝科學(xué)儀器公司);H1850R離心機(jī) (長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)。

2 方法

2.1 模型制備 大鼠隨機(jī)分6組，即正常對照組、模型組、枸骨根提取物 (30，60 mg/kg)組、丹參片組 (300 mg/kg)和地奧心血康 (300 mg/kg)組。連續(xù)灌胃給藥14 d，末次給藥1 h后，除正常對照組外，其余各組大鼠皮下給予鹽酸腎上腺素注射液0.8 mg/kg，共2次，間隔時間為4 h。第1次皮下給予鹽酸腎上腺素0.8 mg/kg后2 h，將大鼠置于0～2℃冰水中游泳4 min，造成大鼠急性血瘀模型。最后一次皮下注射鹽酸腎上腺素后大鼠禁食不禁水飼養(yǎng)。次日以戊巴比妥鈉腹腔麻醉后，腹主動脈取血 (肝素抗凝)，檢測［11］。

2.2 血液流變學(xué)測定 取上述各組大鼠肝素抗凝后的血液每只5 mL，用LG-R-80 B型血液黏度儀進(jìn)行全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、血沉、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)的測定，并計(jì)算紅細(xì)胞聚集指數(shù)、剛性指數(shù)與血沉方程K值［12］。

3 結(jié)果

3.1 對急性血瘀大鼠全血黏度的影響 與空白組相比，模型組全血黏度和全血還原黏度明顯升高，表明血瘀模型成立。而給藥組均能降低全血黏度和全血還原黏度，其中枸骨根醇提物 (60 mg/kg)可以顯著降低全血黏度 (P＜0.05，P＜0.01)，枸骨根醇提物 (30 mg/kg)可以顯著降低全血高切黏度 (P＜0.05)，結(jié)果見表1。

表1 枸骨根醇提物對血瘀大鼠模型全血黏度的影響 (ˉ，n=10)

表1 枸骨根醇提物對血瘀大鼠模型全血黏度的影響 (ˉ，n=10)

注:模型組與正常組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;給藥組與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

全血黏度全血還原黏度組別 劑量/(mg·kg－1低切 中切 高切 低切 中切 高切正常組 － 7.88±1.00 4.61±0.47 3.91±0.27 17.38±2.16 9).10±0.98 7.31±0.50模型組 － 17.75±4.91＊＊ 7.53±0.97＊＊ 6.37±0.58＊＊ 34.69±11.35* 13.02±2.49* 10.47±1.30＊＊枸骨根提 30 13.14±3.25 6.28±0.98 5.35±0.59# 27.72±6.77 11.70±1.88 9.54±1.02取物 60 11.04±1.47# 5.85±0.56# 5.08±0.40# 23.30±3.00 10.83±1.08 8.98±0.76丹參組 300 10.33±0.49# 5.50±0.23## 4.77±0.27## 22.58±1.53 10.49±0.47 8.64±0.47#心血康組 300 12.71±0.74 6.61±0.59 5.63±0.70 26.67±1.11 12.29±0.38 9.96±0.78

3.2 對急性血瘀大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、剛性指數(shù)的影響 與空白組相比，模型組大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、剛性指數(shù)均增高，給藥組均能降低這些指數(shù)，其中枸骨根醇提物 (60 mg/kg)可以顯著降低紅細(xì)胞壓積、血沉和血沉方程 (P＜0.05，P＜0.01);枸骨根醇提物 (30 mg/kg)可以顯著降低血沉和血沉方程 (P＜0.05)，結(jié)果見表2。

表2 枸骨根醇提物對血瘀大鼠血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、剛性指數(shù)的影響(ˉx ± s，n=10)

4 討論

本實(shí)驗(yàn)采用血液流變學(xué)的指標(biāo)觀察枸骨根醇提物不同劑量對血瘀大鼠的影響。血液流變學(xué)是研究循環(huán)血液的流動性、變形性、凝固性、黏彈性以及心血管黏滯性的科學(xué)。血液黏度是衡量血液流變性的指標(biāo)，而血漿黏度、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞聚集性等是決定血液黏度的內(nèi)在因素［13-15］?？梢砸罁?jù)這一指標(biāo)衡量是否“血瘀”。

由血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)變化可知，枸骨根醇提物不同劑量組均能改善血瘀大鼠異常的血液流變性，降低其全血黏度、全血還原黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、血沉、血沉方程、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、剛性指數(shù)，使其血液循環(huán)狀態(tài)得到明顯改善，這在一定程度上證實(shí)了枸骨根的活血化瘀作用。

本實(shí)驗(yàn)研究了枸骨根對改善急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的作用，證實(shí)了其活血化瘀的藥效，為其進(jìn)一步開發(fā)成預(yù)防和治療血瘀疾病的藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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