95%),在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組,腫瘤"/>

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        二種中藥水提取物對荷瘤小鼠免疫功能的影響

        2014-10-17 17:54:21敖亮潘正剛何昌棟楊松濤
        云南中醫(yī)中藥雜志 2014年3期

        敖亮+潘正剛+何昌棟+楊松濤

        摘要:目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率>95%),在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低劑量組、高劑量組,生地低劑量組、高劑量組,每組10只,按0.02 mL/g給予灌胃12天后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.01,菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05;在C4(1∶10)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低、高劑量組P值均<0.01,生地高劑量組P<0.05;但生地高劑量組,菟絲子低、高劑量組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,與腫瘤對照組比較,生地低、高劑量組P<0.01,在CD4(1∶5)中,與腫瘤對照組比較,生地高劑量P<0.05;在 CD8(1∶1)中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        關(guān)鍵詞:S180荷瘤小鼠;中藥影響;細(xì)胞免疫;體液免疫

        中圖分類號:R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1007-2349(2014)03-0056-02

        中醫(yī)理論認(rèn)為,腫瘤病的特點是“正虛邪實”?!夺t(yī)宗必讀》說:“積之成也,正氣不足,而后邪氣踞之?!爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況,改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài),使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

        1材料與方法

        1.1主要材料健康km小鼠,雌性(20±2)g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲,購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

        1.2實驗方法

        1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版(按成人60 kg體重計算用量(地黃9~15 g,菟絲6~12 g)及臨床用藥量的藥效,菟絲子100 g,生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁,合并3次藥液,進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液,菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

        1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率﹥95%),在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,分別設(shè)計空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低倍組(5倍劑),菟絲子高倍組(10倍劑),生地低倍組(5倍劑),生地高倍組(10倍劑)。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL,陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL,灌胃量為0.025 g/mL,0.2 mL/d,連續(xù)用藥12 d后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

        1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

        1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理,組間比較采用t檢驗,數(shù)據(jù)以(x±s)表示,P<0.05為差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2實驗結(jié)果

        3討論

        根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā),精神狀態(tài),活動量及排尿量對照,空白對照組,健康小鼠皮毛潔白,有光澤,精神狀態(tài)好,活動量大,排尿少,墊料干燥。腫瘤對照組,荷瘤小鼠皮毛稀疏,無光澤,精神萎靡,活動少,外力刺激,緩慢移動,排尿多,墊料較濕,中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中,C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低倍劑量P<0.01,證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用,菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較,P>0.05,說明對C3濃度無免疫作用。在C4(1∶10)OD值濃度中,生地高倍劑量P<0.05,對體液免疫中的C4有響作用,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01,對體液免疫中的C4有明顯影響作用,但在生地高倍劑量,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01,對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中,CD4(1∶5)中生地高劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用,CD8(1∶1)中菟絲子低劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中,腫瘤組肝臟明顯腫大,充血明顯,中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯,懷疑是肝臟靜脈回流受阻,出現(xiàn)肝臟腫大,中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示,可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫位為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        參考文獻(xiàn):

        [1]周潔,李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004,21(3).

        [2]楊悅,姬宏飛,王波,安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011,25(3):37.endprint

        摘要:目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率>95%),在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低劑量組、高劑量組,生地低劑量組、高劑量組,每組10只,按0.02 mL/g給予灌胃12天后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.01,菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05;在C4(1∶10)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低、高劑量組P值均<0.01,生地高劑量組P<0.05;但生地高劑量組,菟絲子低、高劑量組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,與腫瘤對照組比較,生地低、高劑量組P<0.01,在CD4(1∶5)中,與腫瘤對照組比較,生地高劑量P<0.05;在 CD8(1∶1)中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        關(guān)鍵詞:S180荷瘤小鼠;中藥影響;細(xì)胞免疫;體液免疫

        中圖分類號:R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1007-2349(2014)03-0056-02

        中醫(yī)理論認(rèn)為,腫瘤病的特點是“正虛邪實”?!夺t(yī)宗必讀》說:“積之成也,正氣不足,而后邪氣踞之?!爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況,改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài),使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

        1材料與方法

        1.1主要材料健康km小鼠,雌性(20±2)g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲,購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

        1.2實驗方法

        1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版(按成人60 kg體重計算用量(地黃9~15 g,菟絲6~12 g)及臨床用藥量的藥效,菟絲子100 g,生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁,合并3次藥液,進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液,菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

        1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率﹥95%),在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,分別設(shè)計空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低倍組(5倍劑),菟絲子高倍組(10倍劑),生地低倍組(5倍劑),生地高倍組(10倍劑)。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL,陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL,灌胃量為0.025 g/mL,0.2 mL/d,連續(xù)用藥12 d后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

        1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

        1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理,組間比較采用t檢驗,數(shù)據(jù)以(x±s)表示,P<0.05為差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2實驗結(jié)果

        3討論

        根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā),精神狀態(tài),活動量及排尿量對照,空白對照組,健康小鼠皮毛潔白,有光澤,精神狀態(tài)好,活動量大,排尿少,墊料干燥。腫瘤對照組,荷瘤小鼠皮毛稀疏,無光澤,精神萎靡,活動少,外力刺激,緩慢移動,排尿多,墊料較濕,中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中,C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低倍劑量P<0.01,證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用,菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較,P>0.05,說明對C3濃度無免疫作用。在C4(1∶10)OD值濃度中,生地高倍劑量P<0.05,對體液免疫中的C4有響作用,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01,對體液免疫中的C4有明顯影響作用,但在生地高倍劑量,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01,對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中,CD4(1∶5)中生地高劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用,CD8(1∶1)中菟絲子低劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中,腫瘤組肝臟明顯腫大,充血明顯,中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯,懷疑是肝臟靜脈回流受阻,出現(xiàn)肝臟腫大,中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示,可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫位為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        參考文獻(xiàn):

        [1]周潔,李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004,21(3).

        [2]楊悅,姬宏飛,王波,安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011,25(3):37.endprint

        摘要:目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率>95%),在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低劑量組、高劑量組,生地低劑量組、高劑量組,每組10只,按0.02 mL/g給予灌胃12天后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.01,菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05;在C4(1∶10)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低、高劑量組P值均<0.01,生地高劑量組P<0.05;但生地高劑量組,菟絲子低、高劑量組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,與腫瘤對照組比較,生地低、高劑量組P<0.01,在CD4(1∶5)中,與腫瘤對照組比較,生地高劑量P<0.05;在 CD8(1∶1)中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        關(guān)鍵詞:S180荷瘤小鼠;中藥影響;細(xì)胞免疫;體液免疫

        中圖分類號:R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1007-2349(2014)03-0056-02

        中醫(yī)理論認(rèn)為,腫瘤病的特點是“正虛邪實”?!夺t(yī)宗必讀》說:“積之成也,正氣不足,而后邪氣踞之?!爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況,改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài),使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

        1材料與方法

        1.1主要材料健康km小鼠,雌性(20±2)g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲,購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

        1.2實驗方法

        1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版(按成人60 kg體重計算用量(地黃9~15 g,菟絲6~12 g)及臨床用藥量的藥效,菟絲子100 g,生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁,合并3次藥液,進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液,菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

        1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠,抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液(活細(xì)胞比率﹥95%),在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液,制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,分別設(shè)計空白對照組,腫瘤對照組,菟絲子低倍組(5倍劑),菟絲子高倍組(10倍劑),生地低倍組(5倍劑),生地高倍組(10倍劑)。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL,陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL,灌胃量為0.025 g/mL,0.2 mL/d,連續(xù)用藥12 d后,將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

        1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1~2 mL,取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

        1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理,組間比較采用t檢驗,數(shù)據(jù)以(x±s)表示,P<0.05為差異,具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2實驗結(jié)果

        3討論

        根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā),精神狀態(tài),活動量及排尿量對照,空白對照組,健康小鼠皮毛潔白,有光澤,精神狀態(tài)好,活動量大,排尿少,墊料干燥。腫瘤對照組,荷瘤小鼠皮毛稀疏,無光澤,精神萎靡,活動少,外力刺激,緩慢移動,排尿多,墊料較濕,中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中,C3(1∶5)OD值濃度中,與腫瘤對照組比較,菟絲子低倍劑量P<0.01,證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用,菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較,P>0.05,說明對C3濃度無免疫作用。在C4(1∶10)OD值濃度中,生地高倍劑量P<0.05,對體液免疫中的C4有響作用,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01,對體液免疫中的C4有明顯影響作用,但在生地高倍劑量,菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較,P>0.05,無明顯差異。在IgG(1∶5000)中,生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01,對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中,CD4(1∶5)中生地高劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用,CD8(1∶1)中菟絲子低劑量P<0.05,對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中,腫瘤組肝臟明顯腫大,充血明顯,中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯,懷疑是肝臟靜脈回流受阻,出現(xiàn)肝臟腫大,中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示,可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫,以增強(qiáng)體液免疫位為主,可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

        參考文獻(xiàn):

        [1]周潔,李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004,21(3).

        [2]楊悅,姬宏飛,王波,安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011,25(3):37.endprint

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