敖亮+潘正剛+何昌棟+楊松濤

摘要：目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率>95%），在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低劑量組、高劑量組，生地低劑量組、高劑量組，每組10只，按0.02 mL/g給予灌胃12天后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.01，菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05；在C4（1∶10）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低、高劑量組P值均<0.01，生地高劑量組P<0.05；但生地高劑量組，菟絲子低、高劑量組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，與腫瘤對照組比較，生地低、高劑量組P<0.01，在CD4（1∶5）中，與腫瘤對照組比較，生地高劑量P<0.05；在 CD8（1∶1）中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

關(guān)鍵詞：S180荷瘤小鼠；中藥影響；細(xì)胞免疫；體液免疫

中圖分類號：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0056-02

中醫(yī)理論認(rèn)為，腫瘤病的特點是“正虛邪實”?！夺t(yī)宗必讀》說：“積之成也，正氣不足，而后邪氣踞之?！爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況，改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài)，使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

1材料與方法

1.1主要材料健康km小鼠，雌性（20±2）g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲，購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

1.2實驗方法

1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版（按成人60 kg體重計算用量（地黃9～15 g，菟絲6～12 g）及臨床用藥量的藥效，菟絲子100 g，生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁，合并3次藥液，進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液，菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率﹥95%），在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別設(shè)計空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低倍組（5倍劑），菟絲子高倍組（10倍劑），生地低倍組（5倍劑），生地高倍組（10倍劑）。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL，陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL，灌胃量為0.025 g/mL，0.2 mL/d，連續(xù)用藥12 d后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，組間比較采用t檢驗，數(shù)據(jù)以（x±s）表示，P<0.05為差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2實驗結(jié)果

3討論

根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā)，精神狀態(tài)，活動量及排尿量對照，空白對照組，健康小鼠皮毛潔白，有光澤，精神狀態(tài)好，活動量大，排尿少，墊料干燥。腫瘤對照組，荷瘤小鼠皮毛稀疏，無光澤，精神萎靡，活動少，外力刺激，緩慢移動，排尿多，墊料較濕，中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中，C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低倍劑量P<0.01，證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用，菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較，P>0.05，說明對C3濃度無免疫作用。在C4（1∶10）OD值濃度中，生地高倍劑量P<0.05，對體液免疫中的C4有響作用，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01，對體液免疫中的C4有明顯影響作用，但在生地高倍劑量，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01，對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中，CD4（1∶5）中生地高劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用，CD8（1∶1）中菟絲子低劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中，腫瘤組肝臟明顯腫大，充血明顯，中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯，懷疑是肝臟靜脈回流受阻，出現(xiàn)肝臟腫大，中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示，可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫位為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

參考文獻(xiàn)：

[1]周潔，李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004，21（3）.

[2]楊悅，姬宏飛，王波，安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011，25（3）：37.endprint

摘要：目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率>95%），在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低劑量組、高劑量組，生地低劑量組、高劑量組，每組10只，按0.02 mL/g給予灌胃12天后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.01，菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05；在C4（1∶10）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低、高劑量組P值均<0.01，生地高劑量組P<0.05；但生地高劑量組，菟絲子低、高劑量組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，與腫瘤對照組比較，生地低、高劑量組P<0.01，在CD4（1∶5）中，與腫瘤對照組比較，生地高劑量P<0.05；在 CD8（1∶1）中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

關(guān)鍵詞：S180荷瘤小鼠；中藥影響；細(xì)胞免疫；體液免疫

中圖分類號：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0056-02

中醫(yī)理論認(rèn)為，腫瘤病的特點是“正虛邪實”?！夺t(yī)宗必讀》說：“積之成也，正氣不足，而后邪氣踞之?！爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況，改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài)，使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

1材料與方法

1.1主要材料健康km小鼠，雌性（20±2）g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲，購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

1.2實驗方法

1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版（按成人60 kg體重計算用量（地黃9～15 g，菟絲6～12 g）及臨床用藥量的藥效，菟絲子100 g，生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁，合并3次藥液，進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液，菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率﹥95%），在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別設(shè)計空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低倍組（5倍劑），菟絲子高倍組（10倍劑），生地低倍組（5倍劑），生地高倍組（10倍劑）。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL，陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL，灌胃量為0.025 g/mL，0.2 mL/d，連續(xù)用藥12 d后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，組間比較采用t檢驗，數(shù)據(jù)以（x±s）表示，P<0.05為差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2實驗結(jié)果

3討論

根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā)，精神狀態(tài)，活動量及排尿量對照，空白對照組，健康小鼠皮毛潔白，有光澤，精神狀態(tài)好，活動量大，排尿少，墊料干燥。腫瘤對照組，荷瘤小鼠皮毛稀疏，無光澤，精神萎靡，活動少，外力刺激，緩慢移動，排尿多，墊料較濕，中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中，C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低倍劑量P<0.01，證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用，菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較，P>0.05，說明對C3濃度無免疫作用。在C4（1∶10）OD值濃度中，生地高倍劑量P<0.05，對體液免疫中的C4有響作用，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01，對體液免疫中的C4有明顯影響作用，但在生地高倍劑量，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01，對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中，CD4（1∶5）中生地高劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用，CD8（1∶1）中菟絲子低劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中，腫瘤組肝臟明顯腫大，充血明顯，中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯，懷疑是肝臟靜脈回流受阻，出現(xiàn)肝臟腫大，中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示，可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫位為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

參考文獻(xiàn)：

[1]周潔，李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004，21（3）.

[2]楊悅，姬宏飛，王波，安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011，25（3）：37.endprint

摘要：目的探討中藥生地及菟絲子水提物對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。方法選取接種S180腫瘤7d的荷瘤小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率>95%），在小鼠右前肢腋窩皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型。設(shè)空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低劑量組、高劑量組，生地低劑量組、高劑量組，每組10只，按0.02 mL/g給予灌胃12天后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。結(jié)果在 C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.01，菟絲子高劑量組及生地低、高劑量組P>0.05；在C4（1∶10）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低、高劑量組P值均<0.01，生地高劑量組P<0.05；但生地高劑量組，菟絲子低、高劑量組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，與腫瘤對照組比較，生地低、高劑量組P<0.01，在CD4（1∶5）中，與腫瘤對照組比較，生地高劑量P<0.05；在 CD8（1∶1）中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低劑量組P<0.05。結(jié)論生地及菟絲子水提物可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

關(guān)鍵詞：S180荷瘤小鼠；中藥影響；細(xì)胞免疫；體液免疫

中圖分類號：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0056-02

中醫(yī)理論認(rèn)為，腫瘤病的特點是“正虛邪實”?！夺t(yī)宗必讀》說：“積之成也，正氣不足，而后邪氣踞之?！爆F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實機(jī)體免疫力低下是腫瘤形成的主要原因之一。[1]研究中藥提高機(jī)體的功能狀況，改善免疫功能而非直接去殺癌細(xì)胞。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能狀態(tài)，使機(jī)體的抗腫瘤免疫功能得以加強(qiáng).是中藥抗腫瘤重要機(jī)制之一。本實驗研究生地及菟絲對S180荷瘤小鼠腫瘤生長對細(xì)胞免疫及體液免疫的影響。

1材料與方法

1.1主要材料健康km小鼠，雌性（20±2）g。購于四川省簡陽達(dá)碩動物有限公司。S180肉瘤細(xì)胞株由成都中醫(yī)藥大學(xué)實驗室提供。生地及菟絲，購于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

1.2實驗方法

1.2.1制取藥物根據(jù)中國藥典2000年版（按成人60 kg體重計算用量（地黃9～15 g，菟絲6～12 g）及臨床用藥量的藥效，菟絲子100 g，生地黃300 g粉碎后常規(guī)以10、8、6倍水煮沸后溫火煮90、60、45 min去渣取汁，合并3次藥液，進(jìn)一步經(jīng)水浴鍋水浴濃縮為1.0 g/mL的濃縮液，菟絲子100 mL、地黃300 mL入冰箱2度冷藏。

1.2.2動物造模、分組及給藥選取接種S180腫瘤7d的荷瘤腹水小鼠，抽取乳白色腹水并用無菌生理鹽水稀釋成1×10個/L細(xì)胞懸液（活細(xì)胞比率﹥95%），在小鼠右腋皮下注射0.2 mL腫瘤細(xì)胞懸液，制成實體瘤動物模型[2]。將荷瘤小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，分別設(shè)計空白對照組，腫瘤對照組，菟絲子低倍組（5倍劑），菟絲子高倍組（10倍劑），生地低倍組（5倍劑），生地高倍組（10倍劑）。陰性對照組灌服生理鹽水0.2 mL，陽性對照組分別按5倍、10倍劑量灌服中藥0.2 mL，灌胃量為0.025 g/mL，0.2 mL/d，連續(xù)用藥12 d后，將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，進(jìn)行C3、C4、IgG、CD4、CD8檢測并分析。

1.2.3取材將小鼠摘除眼球靜脈取血1～2 mL，取血后用ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8的值。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，組間比較采用t檢驗，數(shù)據(jù)以（x±s）表示，P<0.05為差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2實驗結(jié)果

3討論

根據(jù)每天觀察小鼠毛發(fā)，精神狀態(tài)，活動量及排尿量對照，空白對照組，健康小鼠皮毛潔白，有光澤，精神狀態(tài)好，活動量大，排尿少，墊料干燥。腫瘤對照組，荷瘤小鼠皮毛稀疏，無光澤，精神萎靡，活動少，外力刺激，緩慢移動，排尿多，墊料較濕，中藥灌服組在兩者之間。在體液免疫中，C3（1∶5）OD值濃度中，與腫瘤對照組比較，菟絲子低倍劑量P<0.01，證明菟絲子低倍劑量對體液免疫中的C3有影響作用，菟絲子高倍組及生地A、B與腫瘤對照組比較，P>0.05，說明對C3濃度無免疫作用。在C4（1∶10）OD值濃度中，生地高倍劑量P<0.05，對體液免疫中的C4有響作用，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量均P<0.01，對體液免疫中的C4有明顯影響作用，但在生地高倍劑量，菟絲子低倍劑量及菟絲子高倍劑量中組間比較，P>0.05，無明顯差異。在IgG（1∶5000）中，生地低劑量與生地高劑量組均P<0.01，對IgG免疫有顯著影響作用。在細(xì)胞免疫中，CD4（1∶5）中生地高劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用，CD8（1∶1）中菟絲子低劑量P<0.05，對細(xì)胞免疫有影響作用。在解剖小鼠過程中，腫瘤組肝臟明顯腫大，充血明顯，中藥灌服組肝臟腫大及充血沒有腫瘤組明顯，懷疑是肝臟靜脈回流受阻，出現(xiàn)肝臟腫大，中藥對肝臟腫大有一定抑制作用。根據(jù)觀察肝臟及ELISAS試劑盒檢測C3、C4、IGG、CD4、CD8值結(jié)果顯示，可以推斷生地及菟絲可增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫，以增強(qiáng)體液免疫位為主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。

參考文獻(xiàn)：

[1]周潔，李竹庭 中藥與腫瘤免疫[J].天津中醫(yī)藥 2004，21（3）.

[2]楊悅，姬宏飛，王波，安巍巍紅松松塔加壓熱提取物對S180荷瘤小鼠腫瘤生長及胸腺、脾指數(shù)的影響[J].實用腫瘤學(xué)雜志 2011，25（3）：37.endprint