徐冰鈺

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動(dòng)相為水-乙腈（65∶35），檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進(jìn)樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準(zhǔn)確可靠，對(duì)提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測(cè)定；方法

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來(lái)酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)過(guò)去為海南省地方標(biāo)準(zhǔn)[1]，曾有關(guān)于對(duì)其處方中中藥材路邊青進(jìn)行薄層色譜鑒別和對(duì)其處方中馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行含量測(cè)定的報(bào)道[2]?，F(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，但未見(jiàn)對(duì)其處方中其他中藥材成分進(jìn)行含量測(cè)定的研究報(bào)道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對(duì)貫黃感冒顆粒中的該成分進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗(yàn)材料、對(duì)照品、樣品

儀器：美國(guó)Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；7725i手動(dòng)進(jìn)樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；賽多利斯BP221S萬(wàn)分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬(wàn)分之一電子天平。

試驗(yàn)材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國(guó)Fisher公司）；其余均為分析純?cè)噭?；水為超純水?/p>

對(duì)照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測(cè)得含量為98.64%，批號(hào)：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司技術(shù)開(kāi)發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：水-乙腈（65∶35）；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對(duì)照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），以進(jìn)樣量（ng）為橫坐標(biāo)（X），進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗(yàn)制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗(yàn)制備6份供試品（批號(hào)：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗(yàn)制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時(shí)間按樣品測(cè)定的方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無(wú)明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個(gè)濃度的對(duì)照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個(gè)濃度供試品溶液，每個(gè)濃度分別制備3份，分別測(cè)定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗(yàn)取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對(duì)照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無(wú)干擾。見(jiàn)圖1

4.7含量測(cè)定取對(duì)照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量即得，結(jié)果見(jiàn)表1：

參考文獻(xiàn)：

[1]海南省標(biāo)準(zhǔn)[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無(wú)糖型）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動(dòng)相為水-乙腈（65∶35），檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進(jìn)樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準(zhǔn)確可靠，對(duì)提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測(cè)定；方法

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來(lái)酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)過(guò)去為海南省地方標(biāo)準(zhǔn)[1]，曾有關(guān)于對(duì)其處方中中藥材路邊青進(jìn)行薄層色譜鑒別和對(duì)其處方中馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行含量測(cè)定的報(bào)道[2]?，F(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，但未見(jiàn)對(duì)其處方中其他中藥材成分進(jìn)行含量測(cè)定的研究報(bào)道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對(duì)貫黃感冒顆粒中的該成分進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗(yàn)材料、對(duì)照品、樣品

儀器：美國(guó)Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；7725i手動(dòng)進(jìn)樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；賽多利斯BP221S萬(wàn)分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬(wàn)分之一電子天平。

試驗(yàn)材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國(guó)Fisher公司）；其余均為分析純?cè)噭?；水為超純水?/p>

對(duì)照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測(cè)得含量為98.64%，批號(hào)：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司技術(shù)開(kāi)發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：水-乙腈（65∶35）；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對(duì)照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），以進(jìn)樣量（ng）為橫坐標(biāo)（X），進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗(yàn)制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗(yàn)制備6份供試品（批號(hào)：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗(yàn)制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時(shí)間按樣品測(cè)定的方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無(wú)明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個(gè)濃度的對(duì)照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個(gè)濃度供試品溶液，每個(gè)濃度分別制備3份，分別測(cè)定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗(yàn)取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對(duì)照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無(wú)干擾。見(jiàn)圖1

4.7含量測(cè)定取對(duì)照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量即得，結(jié)果見(jiàn)表1：

參考文獻(xiàn)：

[1]海南省標(biāo)準(zhǔn)[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無(wú)糖型）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動(dòng)相為水-乙腈（65∶35），檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進(jìn)樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準(zhǔn)確可靠，對(duì)提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測(cè)定；方法

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來(lái)酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)過(guò)去為海南省地方標(biāo)準(zhǔn)[1]，曾有關(guān)于對(duì)其處方中中藥材路邊青進(jìn)行薄層色譜鑒別和對(duì)其處方中馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)行含量測(cè)定的報(bào)道[2]。現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，但未見(jiàn)對(duì)其處方中其他中藥材成分進(jìn)行含量測(cè)定的研究報(bào)道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對(duì)貫黃感冒顆粒中的該成分進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗(yàn)材料、對(duì)照品、樣品

儀器：美國(guó)Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；7725i手動(dòng)進(jìn)樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；賽多利斯BP221S萬(wàn)分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬(wàn)分之一電子天平。

試驗(yàn)材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國(guó)Fisher公司）；其余均為分析純?cè)噭?；水為超純水?/p>

對(duì)照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測(cè)得含量為98.64%，批號(hào)：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司技術(shù)開(kāi)發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團(tuán)）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：水-乙腈（65∶35）；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對(duì)照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），以進(jìn)樣量（ng）為橫坐標(biāo)（X），進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗(yàn)制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗(yàn)制備6份供試品（批號(hào)：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗(yàn)制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時(shí)間按樣品測(cè)定的方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無(wú)明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個(gè)濃度的對(duì)照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個(gè)濃度供試品溶液，每個(gè)濃度分別制備3份，分別測(cè)定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗(yàn)取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對(duì)照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無(wú)干擾。見(jiàn)圖1

4.7含量測(cè)定取對(duì)照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量即得，結(jié)果見(jiàn)表1：

參考文獻(xiàn)：

[1]海南省標(biāo)準(zhǔn)[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無(wú)糖型）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint