穆天慧

摘要：目的建立高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量方法。方法色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）；流速：1.0 mL.min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm。結(jié)果丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9991，n=5），平均回收率102.9﹪，RSD為1.19%。結(jié)論本法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：HPLC法；養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）；丹皮酚；含量測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0051-02

養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）由牡丹皮、地黃、玄參、白芍等8味中藥組成，具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺，淸熱利咽的作用，用于咽喉干燥疼痛。其中牡丹皮具有淸熱涼血，活血化瘀的功效[1]，主要成分為丹皮酚。養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）（YBZ27812005）[2]，其丹皮酚含量測(cè)定為蒸餾-紫外分光光度法。本實(shí)驗(yàn)選擇丹皮酚為指標(biāo)，用HPLC法對(duì)養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）進(jìn)行含量測(cè)定。

1儀器與試劑

戴安HPLC SUMMIT 系統(tǒng)高效液相色譜儀（P680泵，ASI-100自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，UltiMate 3000紫外檢測(cè)器，Chromeleon化學(xué)工作站），超聲波淸洗儀（中船七院七二六所），塞多利斯 CP324S 電子天平。丹皮酚對(duì)照品（110708-200506，中國(guó)藥品生物制品檢定所）。甲醇為色譜純，乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，冰醋酸為分析純。養(yǎng)陰淸肺口服液（批號(hào)20121001，20121002，20121003呼倫貝爾松鹿制藥有限公司 規(guī)格：每支裝10 mL）。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1色譜條件色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）；流速：1.0 mL.min-1；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm；進(jìn)樣量：10 μL。丹皮酚的保留時(shí)間約為12.83 min。丹皮酚對(duì)照品、供試品及陰性樣品的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2溶液的制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品20.01 mg，置50 mL容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得0.04 002 mg.mL-1丹皮酚對(duì)照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備取養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）5支，混勻，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇適量搖勻，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.2.3陰性樣品溶液的制備按處方比例及制法，制得除牡丹皮的陰性樣品。取相當(dāng)于供試品的量，按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1線性實(shí)驗(yàn)吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾。分別精密吸取5，10，15，20，25 μL進(jìn)樣，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，y=4.9736+28.6344x，r=0.9991（n=5）。

3.2精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得丹皮酚的峰面積y分別為18.3117，18.3704，18.3499，18.2943，18.3816，18.3714。RSD為0.19%。表明所選色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

3.3空白實(shí)驗(yàn)吸取2.2.3項(xiàng)下陰性樣品溶液，經(jīng)0.45 μ m 微孔濾膜過(guò)濾，精密吸取10 μ L，注入液相色譜儀，結(jié)果，在對(duì)照品和供試品色譜相應(yīng)的保留時(shí)間，陰性樣品無(wú)色譜峰，表明陰性樣品不干擾測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖1。

3.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一樣品，按照2.2.2項(xiàng)下制備，分別在0，4，8，12 h測(cè)定峰面積為19.0357，19.1021，19.2214，19.3578，RSD為0.74%，說(shuō)明丹皮酚甲醇溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

3.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品（批號(hào)：20121001）4份，按2.2.2項(xiàng)下制備，測(cè)定丹皮酚的含量，其含量的RSD為0.17%。

3.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）（批號(hào)：20121001）4份，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，分別加入不同濃度丹皮酚對(duì)照品溶液，加入甲醇溶液并稀釋至刻度，混勻。測(cè)得丹皮酚的回收率見(jiàn)表1。

4.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇文獻(xiàn)報(bào)到，檢測(cè)波長(zhǎng)大多采用274 nm。取丹皮酚對(duì)照品溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)光波段掃描（200～900 nm）掃描，結(jié)果在274 nm處有最大吸收，故選用274 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

4.2流動(dòng)相的考察根據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，當(dāng)流動(dòng)相比例為甲醇-水（75：25）[3]和乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）[4]下都能出峰，而在反復(fù)驗(yàn)證下，在本實(shí)驗(yàn)環(huán)境下，乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）時(shí)，出峰的保留時(shí)間合適，分離效果比較好，所以本實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相比例為乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）。

4.3不同提取方法的考察取同一批號(hào)的樣品，分別采用水蒸氣蒸餾法，有機(jī)溶劑提取法，直接加甲醇溶劑定量稀釋法，按樣品測(cè)定法測(cè)定含量，含量幾無(wú)差別，故采用甲醇溶劑定量稀釋法。

4.4不同溶劑的考察采用甲醇、無(wú)水乙醇、95%乙醇為溶劑，按樣品測(cè)定方法測(cè)定，含量分別為0.415 mg/mL、0.387 mg/mL、0.382 mg/mL，表明甲醇為溶劑效果好。

5結(jié)論

該方法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）的含量測(cè)定。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：160.

[2]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）（YBZ27812005）.

[3]李健，陳妍，徐金波.液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺顆粒中丹皮酚的含量[J].天津中醫(yī)藥，2004，21（1）：72-73.

[4]趙剛，李月霞，吳貴華.反相高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺丸中丹皮酚的含量[J].天津藥學(xué)，2005，17（5）：14-15.endprint

摘要：目的建立高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量方法。方法色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）；流速：1.0 mL.min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm。結(jié)果丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9991，n=5），平均回收率102.9﹪，RSD為1.19%。結(jié)論本法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：HPLC法；養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）；丹皮酚；含量測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0051-02

養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）由牡丹皮、地黃、玄參、白芍等8味中藥組成，具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺，淸熱利咽的作用，用于咽喉干燥疼痛。其中牡丹皮具有淸熱涼血，活血化瘀的功效[1]，主要成分為丹皮酚。養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）（YBZ27812005）[2]，其丹皮酚含量測(cè)定為蒸餾-紫外分光光度法。本實(shí)驗(yàn)選擇丹皮酚為指標(biāo)，用HPLC法對(duì)養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）進(jìn)行含量測(cè)定。

1儀器與試劑

戴安HPLC SUMMIT 系統(tǒng)高效液相色譜儀（P680泵，ASI-100自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，UltiMate 3000紫外檢測(cè)器，Chromeleon化學(xué)工作站），超聲波淸洗儀（中船七院七二六所），塞多利斯 CP324S 電子天平。丹皮酚對(duì)照品（110708-200506，中國(guó)藥品生物制品檢定所）。甲醇為色譜純，乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，冰醋酸為分析純。養(yǎng)陰淸肺口服液（批號(hào)20121001，20121002，20121003呼倫貝爾松鹿制藥有限公司 規(guī)格：每支裝10 mL）。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1色譜條件色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）；流速：1.0 mL.min-1；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm；進(jìn)樣量：10 μL。丹皮酚的保留時(shí)間約為12.83 min。丹皮酚對(duì)照品、供試品及陰性樣品的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2溶液的制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品20.01 mg，置50 mL容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得0.04 002 mg.mL-1丹皮酚對(duì)照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備取養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）5支，混勻，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇適量搖勻，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.2.3陰性樣品溶液的制備按處方比例及制法，制得除牡丹皮的陰性樣品。取相當(dāng)于供試品的量，按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1線性實(shí)驗(yàn)吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾。分別精密吸取5，10，15，20，25 μL進(jìn)樣，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，y=4.9736+28.6344x，r=0.9991（n=5）。

3.2精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得丹皮酚的峰面積y分別為18.3117，18.3704，18.3499，18.2943，18.3816，18.3714。RSD為0.19%。表明所選色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

3.3空白實(shí)驗(yàn)吸取2.2.3項(xiàng)下陰性樣品溶液，經(jīng)0.45 μ m 微孔濾膜過(guò)濾，精密吸取10 μ L，注入液相色譜儀，結(jié)果，在對(duì)照品和供試品色譜相應(yīng)的保留時(shí)間，陰性樣品無(wú)色譜峰，表明陰性樣品不干擾測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖1。

3.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一樣品，按照2.2.2項(xiàng)下制備，分別在0，4，8，12 h測(cè)定峰面積為19.0357，19.1021，19.2214，19.3578，RSD為0.74%，說(shuō)明丹皮酚甲醇溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

3.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品（批號(hào)：20121001）4份，按2.2.2項(xiàng)下制備，測(cè)定丹皮酚的含量，其含量的RSD為0.17%。

3.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）（批號(hào)：20121001）4份，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，分別加入不同濃度丹皮酚對(duì)照品溶液，加入甲醇溶液并稀釋至刻度，混勻。測(cè)得丹皮酚的回收率見(jiàn)表1。

4.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇文獻(xiàn)報(bào)到，檢測(cè)波長(zhǎng)大多采用274 nm。取丹皮酚對(duì)照品溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)光波段掃描（200～900 nm）掃描，結(jié)果在274 nm處有最大吸收，故選用274 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

4.2流動(dòng)相的考察根據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，當(dāng)流動(dòng)相比例為甲醇-水（75：25）[3]和乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）[4]下都能出峰，而在反復(fù)驗(yàn)證下，在本實(shí)驗(yàn)環(huán)境下，乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）時(shí)，出峰的保留時(shí)間合適，分離效果比較好，所以本實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相比例為乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）。

4.3不同提取方法的考察取同一批號(hào)的樣品，分別采用水蒸氣蒸餾法，有機(jī)溶劑提取法，直接加甲醇溶劑定量稀釋法，按樣品測(cè)定法測(cè)定含量，含量幾無(wú)差別，故采用甲醇溶劑定量稀釋法。

4.4不同溶劑的考察采用甲醇、無(wú)水乙醇、95%乙醇為溶劑，按樣品測(cè)定方法測(cè)定，含量分別為0.415 mg/mL、0.387 mg/mL、0.382 mg/mL，表明甲醇為溶劑效果好。

5結(jié)論

該方法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）的含量測(cè)定。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：160.

[2]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）（YBZ27812005）.

[3]李健，陳妍，徐金波.液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺顆粒中丹皮酚的含量[J].天津中醫(yī)藥，2004，21（1）：72-73.

[4]趙剛，李月霞，吳貴華.反相高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺丸中丹皮酚的含量[J].天津藥學(xué)，2005，17（5）：14-15.endprint

摘要：目的建立高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量方法。方法色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）；流速：1.0 mL.min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm。結(jié)果丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9991，n=5），平均回收率102.9﹪，RSD為1.19%。結(jié)論本法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）中丹皮酚的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：HPLC法；養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）；丹皮酚；含量測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）03-0051-02

養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）由牡丹皮、地黃、玄參、白芍等8味中藥組成，具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺，淸熱利咽的作用，用于咽喉干燥疼痛。其中牡丹皮具有淸熱涼血，活血化瘀的功效[1]，主要成分為丹皮酚。養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）（YBZ27812005）[2]，其丹皮酚含量測(cè)定為蒸餾-紫外分光光度法。本實(shí)驗(yàn)選擇丹皮酚為指標(biāo)，用HPLC法對(duì)養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）進(jìn)行含量測(cè)定。

1儀器與試劑

戴安HPLC SUMMIT 系統(tǒng)高效液相色譜儀（P680泵，ASI-100自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，UltiMate 3000紫外檢測(cè)器，Chromeleon化學(xué)工作站），超聲波淸洗儀（中船七院七二六所），塞多利斯 CP324S 電子天平。丹皮酚對(duì)照品（110708-200506，中國(guó)藥品生物制品檢定所）。甲醇為色譜純，乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，冰醋酸為分析純。養(yǎng)陰淸肺口服液（批號(hào)20121001，20121002，20121003呼倫貝爾松鹿制藥有限公司 規(guī)格：每支裝10 mL）。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1色譜條件色譜柱為依利特-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）；流速：1.0 mL.min-1；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm；進(jìn)樣量：10 μL。丹皮酚的保留時(shí)間約為12.83 min。丹皮酚對(duì)照品、供試品及陰性樣品的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2溶液的制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹皮酚對(duì)照品20.01 mg，置50 mL容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得0.04 002 mg.mL-1丹皮酚對(duì)照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備取養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）5支，混勻，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇適量搖勻，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.2.3陰性樣品溶液的制備按處方比例及制法，制得除牡丹皮的陰性樣品。取相當(dāng)于供試品的量，按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1線性實(shí)驗(yàn)吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾。分別精密吸取5，10，15，20，25 μL進(jìn)樣，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，丹皮酚的濃度在0.2001～1.6008 μg.mL-1 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，y=4.9736+28.6344x，r=0.9991（n=5）。

3.2精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得丹皮酚的峰面積y分別為18.3117，18.3704，18.3499，18.2943，18.3816，18.3714。RSD為0.19%。表明所選色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

3.3空白實(shí)驗(yàn)吸取2.2.3項(xiàng)下陰性樣品溶液，經(jīng)0.45 μ m 微孔濾膜過(guò)濾，精密吸取10 μ L，注入液相色譜儀，結(jié)果，在對(duì)照品和供試品色譜相應(yīng)的保留時(shí)間，陰性樣品無(wú)色譜峰，表明陰性樣品不干擾測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖1。

3.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一樣品，按照2.2.2項(xiàng)下制備，分別在0，4，8，12 h測(cè)定峰面積為19.0357，19.1021，19.2214，19.3578，RSD為0.74%，說(shuō)明丹皮酚甲醇溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

3.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品（批號(hào)：20121001）4份，按2.2.2項(xiàng)下制備，測(cè)定丹皮酚的含量，其含量的RSD為0.17%。

3.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）（批號(hào)：20121001）4份，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，分別加入不同濃度丹皮酚對(duì)照品溶液，加入甲醇溶液并稀釋至刻度，混勻。測(cè)得丹皮酚的回收率見(jiàn)表1。

4.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇文獻(xiàn)報(bào)到，檢測(cè)波長(zhǎng)大多采用274 nm。取丹皮酚對(duì)照品溶液進(jìn)行紫外可見(jiàn)光波段掃描（200～900 nm）掃描，結(jié)果在274 nm處有最大吸收，故選用274 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

4.2流動(dòng)相的考察根據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，當(dāng)流動(dòng)相比例為甲醇-水（75：25）[3]和乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶2）[4]下都能出峰，而在反復(fù)驗(yàn)證下，在本實(shí)驗(yàn)環(huán)境下，乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）時(shí)，出峰的保留時(shí)間合適，分離效果比較好，所以本實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相比例為乙腈-水-冰醋酸（33∶67∶1.5）。

4.3不同提取方法的考察取同一批號(hào)的樣品，分別采用水蒸氣蒸餾法，有機(jī)溶劑提取法，直接加甲醇溶劑定量稀釋法，按樣品測(cè)定法測(cè)定含量，含量幾無(wú)差別，故采用甲醇溶劑定量稀釋法。

4.4不同溶劑的考察采用甲醇、無(wú)水乙醇、95%乙醇為溶劑，按樣品測(cè)定方法測(cè)定，含量分別為0.415 mg/mL、0.387 mg/mL、0.382 mg/mL，表明甲醇為溶劑效果好。

5結(jié)論

該方法準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)便可靠，結(jié)果穩(wěn)定，可用于養(yǎng)陰淸肺口服液（無(wú)糖型）的含量測(cè)定。

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[4]趙剛，李月霞，吳貴華.反相高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)陰淸肺丸中丹皮酚的含量[J].天津藥學(xué)，2005，17（5）：14-15.endprint