陳章興，戴益琛，談秋慧

廈門(mén)大學(xué)附屬成功醫(yī)院消化內(nèi)科，福建 廈門(mén) 361003

大腸癌是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，發(fā)病率呈逐漸增加趨勢(shì)，LIMD1在大腸癌中的作用國(guó)內(nèi)外報(bào)道甚少[1-2]，本研究利用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大腸癌LIMD1陽(yáng)性表達(dá)率，試探性研究LIMD1在大腸癌組織中的表達(dá)特點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 資料 選取2010年2月－2012年2月經(jīng)解放軍174醫(yī)院病理科證實(shí)的27例大腸癌及癌旁正常大腸黏膜組織，年齡22～74歲，平均年齡(47±2)歲;Dukes分期:A期5例、B期6例、C期5例、D期11例;腺癌16例、黏液癌7例、未分化癌4例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)標(biāo)本LIMD1陽(yáng)性表達(dá)率(兔抗人LIMD1單克隆抗體購(gòu)自CST公司)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求操作，用磷酸緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性的大腸癌作陽(yáng)性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷 隨機(jī)觀察每張切片10個(gè)高倍鏡視野:細(xì)胞未出現(xiàn)棕黃色－;≤25%的細(xì)胞輕度棕黃色+;25% ～50%棕黃色++;＞50%棕褐色+++。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大腸腺癌與黏液癌組織中LIMD1表達(dá)情況大腸腺癌與黏液癌LIMD1的陽(yáng)性表達(dá)率分別為87.50%、85.71%，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.71，P ＞0.05)，而兩者 LIMD1 的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于大腸未分化癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.86，P＜0.05，見(jiàn)表1)。

表1 不同病理類(lèi)型的大腸癌組織中LIMD1的陽(yáng)性表達(dá)率Tab1 Positive expression rates of LIMD1 in different pathological types of colorectal carcinoma

2.2 大腸癌與癌旁正常大腸黏膜組織中LIMD1表達(dá)情況 LIMD1在大腸癌組織表達(dá)遠(yuǎn)高于癌旁正常大腸黏膜組織，大腸癌組織中LIMD1表達(dá)陽(yáng)性率為88.89%(24/27)，而癌旁正常大腸黏膜組織中LIMD1表達(dá)陽(yáng)性率為33.33%(9/27)，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.11，P ＜0.05)。

2.3 不同臨床分期的大腸癌組織中LIMD1表達(dá)情況 LIMD1在大腸癌不同分期(Dukes分期)陽(yáng)性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.41，P ＜0.05)，且與分期呈正相關(guān)(見(jiàn)表2)。

表2 LIMD1蛋白在大腸癌不同Dukes分期的表達(dá)情況Tab2 Expression of LIMD1 protein in different Dukes stage of colorectal cancers

3 討論

LIMD1基因位于人染色體3p21.3，cDNA長(zhǎng)約5067 bp，編碼469個(gè)氨基酸殘基，并富含脯氨酸/絲氨酸，可參與調(diào)控 RNA穩(wěn)定性[3]。該基因與 Zyxin、LPP、TRIP6、Ajuba、migfilin 及 WTIP 一起構(gòu)成 ZYXIN家族，參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞分化及細(xì)胞間黏附等，對(duì)維持正常細(xì)胞的生理活動(dòng)發(fā)揮重要作用，同時(shí)可抑制腫瘤細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移等[4-5]。

研究發(fā)現(xiàn)在人類(lèi)多種實(shí)體瘤中普遍存在抑癌基因LIMD1基因表達(dá)下調(diào)，主要以基因缺失、啟動(dòng)子甲基化、突變及基因沉默等為主，其表達(dá)水平與病情進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)[6]。Sharp 等[7]利用 RT-PCR 及 Western blotting發(fā)現(xiàn)85.9%的LIMD1可使E2F1介導(dǎo)的相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)，同時(shí)LIMD1可以阻止A549肺癌細(xì)胞株集落形成。Ghosh等[8]發(fā)現(xiàn)50%的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌組織中LIMD1較正常組織表達(dá)明顯下降，且利用單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)及甲基化特異性PCR技術(shù)檢測(cè)83例原發(fā)性頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(HNSCC)組織發(fā)現(xiàn)約93.98%LIMD1基因型發(fā)生改變，且在HNSCC早期主要以基因缺失及甲基化為主，但隨腫瘤演進(jìn)LIMD1突變頻率逐漸增高。Spenlove等[9]利用免疫組織化學(xué)及組織芯片技術(shù)對(duì)495例原發(fā)性乳腺癌組織LIMD1表達(dá)水平的研究時(shí)發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平及亞細(xì)胞定位與腫瘤分期、分化程度及病理類(lèi)型有關(guān)，胞漿或胞核內(nèi)LIMD1表達(dá)下調(diào)或缺失提示預(yù)后較差，同時(shí)發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中LIMD1表達(dá)水平差異可能與翻譯后表觀修飾有關(guān)。本研究試探性研究LIMD1在大腸癌中的表達(dá)情況及在不同病理類(lèi)型、Dukes分期的大腸癌中的生物學(xué)特點(diǎn)。在癌旁正常大腸黏膜組織中LIMD1陽(yáng)性表達(dá)率為33.33%，而在大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率卻為88.89%，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.11，P ＜0.05)。大腸腺癌與黏液癌中的LIMD1陽(yáng)性表達(dá)率低于未分化癌，且與Dukes分期呈正相關(guān)，可能預(yù)示與大腸癌的演進(jìn)有相關(guān)性，同時(shí)也反映腫瘤惡性程度，但LIMD1在大腸癌組織中確切生物學(xué)行為仍不明確，需要多中心、大樣本研究進(jìn)一步深入探討。

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