陳明棠，譚正準(zhǔn)，黃 健，李 輝，趙朝步，鐘華配，梁賢威

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院廣西水牛研究所，農(nóng)業(yè)部（廣西）水牛遺傳繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530001）

水牛同期發(fā)情是提高水牛繁殖效率的重要途徑之一。近年來為加快奶水牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展，南方的幾個(gè)水牛大省都積極開展了相關(guān)技術(shù)研究，對水牛同期發(fā)情技術(shù)也進(jìn)行了許多的研究。但受各種因素影響，水牛同期發(fā)情的效果并不穩(wěn)定，重復(fù)性不好，不易在生產(chǎn)實(shí)踐中推廣。為此，本試驗(yàn)?zāi)康闹荚谒７敝惩具M(jìn)行同期發(fā)情處理，借助便攜式獸用B超，全程記錄母牛在處理中卵巢的變化和排卵情況，揭示水牛同期發(fā)情時(shí)卵泡的發(fā)育和成熟排卵規(guī)律，以期篩選出一套高效且適宜于生產(chǎn)推廣的水牛同期發(fā)情處理方案。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

試驗(yàn)時(shí)間為2013年9月至12月，在廣西水牛研究所水牛種畜場進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)水牛來源

試驗(yàn)水牛均為該場存欄奶用水牛，包括摩拉水牛、尼里／拉菲水牛及其雜交后代，集中圈養(yǎng)，膘情中等以上。處理前均經(jīng)B超孕檢并記錄卵巢狀態(tài)。

1.3 藥品來源

試驗(yàn)使用的氯前列醇鈉（PGc）、促性腺激素釋放激素（GnRH）為上海某計(jì)生所生產(chǎn)；孕馬血清促性腺激素（PMSG）為國外產(chǎn)品。

1.4 試驗(yàn)分組

試驗(yàn)共分3個(gè)組，Ⅰ組為PGc一次注射法，任意天（0d）肌注PGc0.4～0.6mg／頭，注射后3～6d檢查發(fā)情；Ⅱ組為PMSG＋PGc法，任意天（0d）肌注PMSG 800IU／頭，48h注PGc0.4～0.6mg／頭，注PGc后3～5d檢查發(fā)情；Ⅲ組為GnRH＋PGc＋GnRH 法，任意天（0d）肌注 GnRH 100μg／頭，第7d注0.4～0.6mgPGc，第9d注 GnRH 100μg，12～48h檢查發(fā)情。

1.5 發(fā)情檢查和判斷標(biāo)準(zhǔn)

發(fā)情檢查為每天一至二次，記錄粘液情況，用B超測量卵泡大小和排卵情況。每批次檢查四天，四天以后不再記錄；判斷標(biāo)準(zhǔn)以母牛陰戶充血腫脹并有黏液流出，或卵巢上有大卵泡（Φ≥0.9mm）發(fā)育為發(fā)情依據(jù)。

1.6 發(fā)情率（%）＝發(fā)情頭數(shù)／試驗(yàn)總頭數(shù)×100%；排卵率（%）＝排卵頭數(shù)／試驗(yàn)總頭數(shù)×100%。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析本試驗(yàn)組間差異的顯著性分析均采用卡方檢驗(yàn)分析，差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理方法同期發(fā)情效果比較

不同同期發(fā)情處理方法中，PGc組、PMSG組和GnRH組的發(fā)情率分別為58.33%、84.21%和83.90%，PMSG組和GnRH組比PGc組高，且差異顯著（P＜0.05）。排卵率分別為54.17%、50.00%和75.42%，GnRH組排卵率顯著高于前二組（P＜0.05）。試驗(yàn)PMSG組發(fā)情率雖然比PGc組要高，但兩者排卵率基本一致，從實(shí)用效果看并無優(yōu)劣之分，詳見表1。試驗(yàn)結(jié)果與梁賢威［1］、覃廣勝［2］等的報(bào)道一致，但與李旭［3］報(bào)道有差異，可能與牛群飼養(yǎng)方式、營養(yǎng)狀況及處理時(shí)的環(huán)境氣候有關(guān)。

表1 不同方法處理水牛同期發(fā)情的發(fā)情率和排卵率

2.2 同期發(fā)情處理時(shí)卵巢上有無黃體對發(fā)情效果的影響

不同處理方法中，黃體的有無對發(fā)情和排卵的影響程度并不一致，并出現(xiàn)顯著性差異。當(dāng)受體卵巢上有功能性黃體時(shí)，PMSG組和GnRH組獲得較高發(fā)情率，與PGc組比差異顯著，但在排卵率方面PGc組和PMSG組排卵效果相近，GnRH組效果最好，差異顯著。當(dāng)受體卵巢上無功能性黃體時(shí)，不同處理方法的發(fā)情率和排卵率均較之前明顯下降，數(shù)據(jù)顯示仍然是GnRH組效果最好，但因樣本量過少，不作差異性分析。詳見表2、表3。

表2 不同處理方法對有黃體牛的同期發(fā)情效果

表3 不同處理方法對無黃體牛的同期發(fā)情效果

2.3 發(fā)情的判斷標(biāo)準(zhǔn)

由于水牛發(fā)情征狀不明顯，黃牛發(fā)情時(shí)常見的流粘液現(xiàn)象在水牛身上卻不容易觀察到，在發(fā)情檢查時(shí)若僅憑流粘液這一現(xiàn)象來判斷母牛是否發(fā)情會(huì)造成較大誤判，本系列試驗(yàn)中僅觀察到47.80%的發(fā)情牛表現(xiàn)出流粘液現(xiàn)象，因此對卵巢進(jìn)行檢查很有必要。詳見表4。

表4 發(fā)情標(biāo)準(zhǔn)一覽表

2.4 發(fā)情后的排卵時(shí)間

在發(fā)情后的排卵監(jiān)測中，PGc組排卵主要分布在處理結(jié)束后的3d～6d內(nèi)（24／26），PMSG組集中在3d～4d內(nèi)（16／19），GnRH組表現(xiàn)出高度集中的排卵時(shí)間，96.63%（86／89）的排卵發(fā)生在處理結(jié)束后的2d內(nèi)完成（平均排卵時(shí)間約為處理結(jié)束后33h）。相對集中的排卵時(shí)間有利于定時(shí)輸精或胚胎移植，詳見表5。

表5 不同方法處理水牛同期發(fā)情的排卵時(shí)間

3 討論和結(jié)論

分析水牛同期發(fā)情的各種處理方案，在常見的幾種處理方法中都各有優(yōu)劣，也不同程度存在一些不足。如PGc一次注射法，優(yōu)點(diǎn)是方案簡潔，僅需一次注射，操作十分簡便，費(fèi)用也最少，但缺點(diǎn)也十分突出，PGc對卵巢有較強(qiáng)的選擇性，有功能黃體的發(fā)情率高，有大卵泡的發(fā)情排卵早，如果受體不經(jīng)選擇，該方案總體效率不高。PMSG＋PGc處理相對于PGc一次注射法，能獲得較高的發(fā)情率，處理也比較簡單，處理周期短，但PMSG＋PGc處理往往出現(xiàn)多濾泡發(fā)育和囊腫現(xiàn)象，在本次試驗(yàn)中，囊腫率為10.53%（4／38），上述兩種處理方案排卵率相近，分別為54.17%和50.00%。用孕激素陰道栓（CIDR）處理愛泡水打滾的水牛也有缺點(diǎn)，CIDR放置時(shí)間長，易誘發(fā)陰道感染，水牛斜尻現(xiàn)象普遍，也易出現(xiàn)較高的掉栓率，韋英明等［4］的試驗(yàn)中，掉栓率為11%（15／137），發(fā)情率為85.13%。用 GnRH 處理需進(jìn)行三次注射，周期偏長（9d），激素成本也較高，但可以獲得良好的發(fā)情率和排卵率，同時(shí)排卵時(shí)間范圍窄，較其它方法處理的更易于掌握，可以減少檢查次數(shù)，便于開展定時(shí)輸精和胚胎移植。

綜合以上幾種方案，我們認(rèn)為在水牛的同期發(fā)情處理中以GnRH處理為最好，該法具有較高的效率和性價(jià)比，可以在生產(chǎn)實(shí)踐中推廣。

［1］ 梁賢威，覃廣勝，陳明棠等.水牛同期發(fā)情技術(shù)的研究［J］.畜牧與獸醫(yī)，2007，（10）：6－9.

［2］ 覃廣勝，陳明棠，梁賢威等.GnRH結(jié)合PGF2α法處理水牛同期發(fā)情試驗(yàn)［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008，（2）：34.

［3］ 李旭 ，趙政，李仕堅(jiān)等.不同同期發(fā)情技術(shù)提高奶水牛繁殖率試驗(yàn)［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，（2）：121－123.

［4］ 韋英明，蔣如明，凌澤繼.不同同期發(fā)情方法對水牛發(fā)情和受胎效果的影響［J］.中國畜牧雜志，2006，（1）：35－36.