邵勤，刁玉巧

（1.河北醫(yī)科大學(xué)附屬邢臺市人民醫(yī)院兒科，河北邢臺054000；2.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院兒科，河北石家莊050000）

TGF-β和IL-10在呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒外周血中的含量及表達(dá)意義

邵勤1，刁玉巧2

（1.河北醫(yī)科大學(xué)附屬邢臺市人民醫(yī)院兒科，河北邢臺054000；2.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院兒科，河北石家莊050000）

目的觀察呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒外周血中TGF-β及IL-10的含量，并對其臨床意義進(jìn)行探討。方法選擇2012年10月～2013年10月間河北醫(yī)科大學(xué)附屬邢臺市人民醫(yī)院80例呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎檢測為陽性的患兒為觀察對象組，并以60例健康體檢兒童為對照組，以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測外周血中TGF-β和IL-10的含量，比較2組間的差異。結(jié)果治療前，與對照組相比，呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10含量顯著降低（P＜0.001）。與治療前相比，治療后呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10含量顯著升高（P＜0.001）；與對照組相比，治療后呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10含量雖有明顯的上升趨勢，但仍顯著低于對照組水平（P＜0.05）。結(jié)論外周血中TGF-β和IL-10含量可作為判斷呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎病情輕重的重要指標(biāo)。

呼吸道合胞病毒；毛細(xì)支氣管炎；轉(zhuǎn)化生長因子-β；白介素-10

在嚴(yán)重急性呼吸道感染患者中，病毒性感染占主導(dǎo)地位（約94.29%），而在眾多的流行病毒中，大多數(shù)患者則被檢測出呼吸道合胞病毒感染為陽性結(jié)果（51.08%），且農(nóng)村發(fā)病率顯著高于城市地區(qū)［1］。嚴(yán)重急性呼吸道感染中的毛細(xì)管支氣管炎則多發(fā)生于2歲以下的兒童，主要由呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）感染所引起發(fā)病，給我國兒童的身心健康以及患兒家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。國內(nèi)外眾多研究表明，RSV感染與炎癥反應(yīng)以及免疫反應(yīng)有著密切的聯(lián)系［2］，因此本文旨在探索重要免疫調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factorβ，TGF-β）和白介素-10（interleukin，IL-10）在RSV感染病程中含量的變化，為RSV感染疾病的臨床診斷以及治療提供思路與方向。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象選自河北醫(yī)科大學(xué)附屬邢臺市人民醫(yī)院2012年10月～2013年10月間80例RSV感染患兒，實(shí)際月齡為1～24個月，平均（7.13±3.21）歲，其中男45例，女35例。入選標(biāo)準(zhǔn)：RSV感染確診患兒，其標(biāo)準(zhǔn)符合《諸福棠使用兒科學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)［3-4］；均為第一次發(fā)病住院；感染患病入院前未曾進(jìn)行過全身糖皮質(zhì)激素類藥治療；感染患病入院前1周未曾使用過組胺類藥物；無基礎(chǔ)心肺及免疫缺陷類疾病及家族史。另選擇同期來本院進(jìn)行健康體檢兒童60例作為對照組，實(shí)際月齡為1～24個月，平均（6.71±2.82）歲，其中男31例，女29例。入選兒童均無過敏性及其他慢性病病史，且無家族過敏和哮喘史，2周內(nèi)無服藥史，2組患者一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)差異。本項(xiàng)研究經(jīng)過本院倫理委員會批準(zhǔn)與認(rèn)可，并與入選對象的家長簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法

1.2.2 標(biāo)本采集：分別于患兒入院確診后第3天（治療前）、有效治療10d后（治療后）（對照組則為體檢當(dāng)天）于7∶00～9∶00 am，空腹抽取2mL外周靜脈血于肝素鈉抗凝管中，4000 r／min離心15min后，取上清置于EP管中，－70℃低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血漿中TGF-β及IL-10含量檢測：采用購自R＆D公司的TGF-β及IL-10試劑盒，酶聯(lián)免疫吸附法檢測血漿中TGF-β及IL-10含量。具體步驟嚴(yán)格參照試劑盒說明書。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，正態(tài)計量數(shù)據(jù)用“±s”表示，正態(tài)資料組間比較采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組外周血中TGF-β含量變化比較 治療前，與對照組相比，觀察組外周血中TGF-β的含量顯著降低（P＜0.001）；與治療前相比，治療后觀察組TGF-β的含量顯著升高（P＜0.001）；治療后，與對照組相比，觀察組TGF-β的含量雖有明顯的上升趨勢，但仍顯著低于對照組（P＜0.05，見表1）。

表1 2組外周血中TGF-β含量變化比較Tab.1 Comparison of TGF-βcontent in children between two groups

2.2 2組外周血中IL-10含量變化比較 治療前，與對照組相比，觀察組IL-10的含量顯著降低（P＜0.001）；與治療前相比，治療后觀察組IL-10的含量顯著升高（P＜0.001）；與對照組相比，觀察組IL-10的含量雖有明顯的上升趨勢，但仍顯著低于對照組（P＜0.05，見表2）。

表2 2組外周血中IL-10含量變化比較Tab.2 Comparison of IL-10 content in children between two groups

3 討論

在嬰幼兒時期，RSV是引起下呼吸道感染的重要病毒，在肺炎患兒中則占5%～40%，而在住院治療的毛細(xì)支氣管炎患兒中，則占50%～90%，且呈逐年上升的趨勢［5-7］。RSV是由Chanock［8］于1956年分離得出的一種有包膜但無極性的肺病病毒。在RNA感染時其表面的融合（F）糖蛋白和其附著（G）糖蛋白起著至關(guān)重要的作用，是RSV中和抗體的唯一成分。G糖蛋白主要在介導(dǎo)RSV附著于宿主細(xì)胞時發(fā)揮作用，2者緊密結(jié)合則會引起病毒外殼與宿主細(xì)胞膜的密切融合，最終導(dǎo)致感染，并將所形成的特有合胞培養(yǎng)于上皮組織上［9-10］。RSV發(fā)病的高危人群主要為出生低于6月齡的嬰幼兒，特別是早產(chǎn)兒或者是患有先天性心臟病、囊性纖維化與神經(jīng)肌肉疾病以及慢性肺病的嬰幼兒尤其易患［11-12］。且其發(fā)病具有一定的季節(jié)性，好發(fā)于多雨寒冷的冬季［13］。其主要臨床癥狀常以氣喘起病且病情急，伴有劇烈咳嗽，嚴(yán)重者很快出現(xiàn)發(fā)呼吸困難及心力衰竭，除具有嚴(yán)重的肺部病變外，還伴有諸多肺外并發(fā)癥，甚至出現(xiàn)多器官功能衰竭而發(fā)生死亡，因此引起醫(yī)藥界的高度關(guān)注［14-15］。

由RSV感染所引起的毛細(xì)管炎致病機(jī)制非常復(fù)雜，迄今為止，關(guān)于RSV感染的發(fā)病機(jī)制仍不明確。近年來，國內(nèi)外研究均顯示RSV感染除了與細(xì)胞的病理改變密切相關(guān)以外，其發(fā)生與炎癥因子以及免疫因素也有著密切的聯(lián)系［16-19］。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為抗炎細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在重癥肺炎的轉(zhuǎn)歸中起了重要作用。李兵等［20］人研究發(fā)現(xiàn)，在RSV感染患兒中，不僅存在細(xì)胞因子Th1／Th2與IFN-γ／IL-4的調(diào)解失衡，同時也存在IL-10／IL-17、TGF-β／IL-17的失衡，其主要表現(xiàn)則為TGF-β及IL-10的抑制炎癥效應(yīng)降低，而IL-17的促炎效應(yīng)升高。TGF-β及IL-10參與致炎反應(yīng)的同時也能涉及到抗炎的過程，被認(rèn)為是在炎癥反應(yīng)轉(zhuǎn)歸到重癥肺炎過程中起到了重要作用［21］。主要由 CD4＋及CD25＋調(diào)解分泌的TGF-β及IL-10在患有RSV感染的患兒中其作用主要有：參與抗體免疫抗炎反應(yīng)，促進(jìn)B細(xì)胞分泌抗體；增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的趨化活性并將補(bǔ)體激活，從而提高溶酶體酶以及過氧化氫酶的殺傷效應(yīng)等［22］。雖然TGF-β與毛細(xì)管合胞病毒感染的致病機(jī)理尚不完全明了，但據(jù)目前研究發(fā)現(xiàn)它是一種多功能生長調(diào)節(jié)因子，主要通過自分泌或者是旁分泌等方式來調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活化生長，對多種免疫細(xì)胞具有生物效應(yīng)，從而控制炎癥反應(yīng)的進(jìn)程，在調(diào)節(jié)細(xì)胞分化及生長中起至關(guān)重要的作用，在RSV患者體內(nèi)主要起到免疫抑制的作用［23-24］。而IL-10則可抑制促炎因子的產(chǎn)生或者減低其活性，與抗炎介質(zhì)結(jié)合發(fā)揮協(xié)同作用［25］。

在本次研究中分析其結(jié)果顯示，與治療前相比，對照組（57.01±7.48）pg／mL RSV毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10含量（21.91±4.77）、（14.85±2.83）pg／mL顯著降低（P＜0.000）；治療后，與治療前相比呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10（43.41±7.17）、（40.85± 5.65）pg／mL含量顯著升高（P＜0.000）；但治療后與對照組相比，呼吸道合胞病毒毛細(xì)支氣管炎患兒組外周血中TGF-β及IL-10含量雖有明顯的上升趨勢，但仍顯著低于對照組水平（P＜0.05）。這結(jié)果也間接反映了目前在治療RSV患兒過程中的艱難局面。雖然RSV感染危及著眾多嬰幼兒的健康及生命，通過多年的研究也取得了一些進(jìn)步，目前臨床上治療RSV所引起的毛細(xì)支氣管炎主要包括給氧、補(bǔ)液、保持呼吸道暢通以及采用高滲鹽水霧化治療，藥物治療則主要為糖皮質(zhì)激素類藥物以及腎上腺素類支氣管擴(kuò)張劑，這些措施可以一定程度上治療RSV感染，緩解癥狀，但目前仍沒有針對RSV感染的特效藥或者疫苗得到醫(yī)藥界的廣泛認(rèn)可，因此關(guān)于RSV感染的致病機(jī)理以及防治措施，仍是醫(yī)藥界的研究熱點(diǎn)［26］。

綜上所述，關(guān)于RSV感染的研究迫在眉睫，而本研究結(jié)果顯示RSV毛細(xì)支氣管患兒外周血中TGF-β和IL-10含量可作為判斷其病情輕重的重要指標(biāo)，給RSV感染疾病的臨床治療以及實(shí)驗(yàn)研究提供一定的思路和方向。

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（編校：王儼儼）

Clinical significance of concentration of peripheral serum TGF-βand IL-10 in children w ith respiratory syncytial virus bronchiolitis

SHAO Qin1，DIAO Yu-qiao2

（1.Department of Pediatric，XingtaiMunicipal People's Hospital Affiliated to HebeiMedical University，Xingtai054000，China；2.Department of Pediatric，The Fourth Hospital of HebeiMedical University，Shijiazhuang 050000，China）

ObjectiveTo observe TGF-βand IL-10 contentof children with respiratory syncytial virus bronchiolitis in peripheralblood and explore its clinical significance.Methods80 children tested positive for respiratory syncytial virus bronchiolitis in Xingtaimunicipal people's hospital affiliated to HebeiMedical University from October 2012 to October 2013 were selected as observation group，and 60 cases of health children as control group. TGF-β，and the contentof IL-10 in peripheral blood were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）and compared between the groups.ResultsBefore treatment，TGF-βand IL-10 content in controlgroup were lower than those in observation group（P＜0.001）；after treatment，TGF-β and IL-10 content in observation group increased significantly compared with before treatment（P＜0.001）；compared with the control group after treatment，TGF-βand IL-10 content increased significantly in observation group，but were still significantly lower than those in control group（P＜0.05）.ConclusionTGF-βand IL-10 in the peripheral blood could be used as an indicators for severity of the disease of respiratory syncytial virus bronchiolitis.

respiratory syncytial virus；bronchiolitis；transforming growth factor-β；interleukin-10

R453.9

A

1005－1678（2014）09－0096－03

邵勤，女，研究生，副主任醫(yī)師，研究方向：兒科臨床，E-mail：sq15001112320＠163.com；刁玉巧，通信作者，女，研究生，研究方向：兒科臨床，E-mail：dyq15010737708＠163.com。