顧文超，袁亞平

（浦東新區(qū)人民醫(yī)院呼吸科，上海浦東201229）

血清IL-8、TNF-α在慢性阻塞性肺疾病中的作用

顧文超，袁亞平

（浦東新區(qū)人民醫(yī)院呼吸科，上海浦東201229）

目的研究白介素-8（IL-8）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）中的水平，探討其與COPD的關(guān)系。方法收取2013年1月～2013年12月在浦東新區(qū)人民醫(yī)院呼吸科住院的臨床診斷為COPD的患者120例，為急性病例組，在經(jīng)過治療后根據(jù)病情情況分為急性加重組和病情緩解組，選取同期120例健康者為正常對照組，檢測并比較各組血清中IL-8、TNF-α的水平。結(jié)果治療前，COPD患者血清的IL-8、TNF-α水平顯著高于正常對照組（P＜0.05）。治療后，與治療前相比，102例患者病情好轉(zhuǎn)，患者血清TNF-α水平顯著降低（P＜0.05），IL-8變化不大，但病情緩解組患者血清IL-8、TNF-α水平仍顯著高于正常對照組（P＜0.05）；18例患者病情加重，急性加重組患者血清的IL-8、TNF-α水平顯著升高（P＜0.05）。結(jié)論血清IL-8、TNF-α水平在COPD的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，可作為診斷COPD的標志物。

慢性阻塞性肺疾病；白介素-8；腫瘤壞死因子-α

目前，慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的具體致病原因和機制沒有確切的證實。目前認為慢阻肺是一種以進行性氣流受限為特征的慢性氣道炎癥性疾病，多發(fā)于中老年人群中，往往反復(fù)發(fā)作。研究指出，感染性的因素不是COPD疾病本身引發(fā)的病因，致病微生物如細菌病毒會導(dǎo)致病情惡化，引發(fā)病情的進一步遷延。近年來，國內(nèi)外對COPD病情研究主要是關(guān)于氣道炎癥相關(guān)因素的病理研究，特別是對氣道炎癥中的炎癥細胞與細胞因子（如IL-8、TNF-α、IL-10等）在疾病發(fā)展過程中含量水平的研究。2013年1月～2013年12月在本院收集臨床診斷為慢阻肺急性發(fā)作期的患者共120例，檢測COPD患者在病情急性發(fā)作、緩解、惡化等不同程度的血清中IL-8與TNF-α水平，并與健康者血清中IL-8與TNF-α水平相比較，探討在整個COPD疾病發(fā)展過程中病情嚴重程度與IL-8、TNF-α含量水平變化的關(guān)系，以探討這些炎癥因子的水平檢測在COPD診斷及治療的意義，為COPD治療預(yù)后提出新的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收取2013年1月～2013年12月入住上海市浦東新區(qū)人民醫(yī)院呼吸科臨床診斷為急性期慢性阻塞性肺疾病，并且合并急性感染患者共計120例，記為急性病例組。所有患者發(fā)病均有氣急、咳嗽、咯白色黏痰膿痰等癥狀；入選標準均符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南》的診斷標準［1］。120例患者中有20例合并肺心病，8例呼吸衰竭；其中男68例，女52例，年齡44～70歲，平均（62.2±8.0）歲，病程年限8～34年，平均（22.6±5.0）年；120例患者每年有2～6次的呼吸道感染反復(fù)。體檢時所有患者均無過敏性疾病史，排除其他系統(tǒng)的炎癥和其它部位感染、內(nèi)分泌疾病、高血壓及糖尿病等心血管疾病、免疫系統(tǒng)疾病和其他診斷患有一些已知病因或具有特征性病理表現(xiàn)的氣流受限疾病，如支氣管擴張癥、肺結(jié)核、彌漫性泛細支氣管炎和閉塞性細支氣管炎等均不屬于COPD。所有患者均給予抗感染、茶堿解痙平喘、化痰、吸氧等對癥治療，但是入院前1個月內(nèi)未全身使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑。治療后根據(jù)患者病情分為急性加重組和病情緩解組。同期于3個月內(nèi)收集本院體驗中心健康體檢人員120例作為正常對照組，各項檢測指標均正常，其中男74例，女46例，年齡45～72歲，平均年齡（63.4± 8.0），1個月內(nèi)無呼吸道疾病所導(dǎo)的感染癥狀；2組人群在年齡范圍、性別構(gòu)成比數(shù)據(jù)統(tǒng)計等方面無差異。所有受試者均同意參加本次研究，簽署知情同意書，經(jīng)倫理委員會批準。

1.2 方法 采集血樣：根據(jù)入院時的要求對所有入選者（包括健康正常組）于清晨空腹抽取靜脈血4mL，在病人病情穩(wěn)定時靜脈血4mL，病情惡化嚴重的患者靜脈取血4mL，放置在無菌試管中，3000 r／min離心15min，分離好血清后保存于-18℃冰箱，待用，實驗前1 h取出備用。

IL-8的測定：采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定人血清中IL-8水平，參照ELISA試劑盒（上海鑫樂生物科技有限公司，批號R30452XL）說明書詳細操作。

TNF-α的測定：采用ELISA法測定人血清TNF-α中水平，參照TNF-α試劑盒（上海百蕊生物科技有限公司，批號20110911）說明書詳細操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件SPSS 18.0分析，正態(tài)計量數(shù)據(jù)用“±s”表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 急性病例組與正常對照組血清IL-8、TNF-α水平比較治療前，急性病例組患者血清IL-8、TNF-α水平顯著高于正常對照組，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，見表1）。

表1 2組患者血清IL-8、TNF-α水平比較（ng／L）Tab.1 Comparison of IL-8、TNF-αlevels between two groups

2.2 治療前后COPD患者血清IL-8、TNF-α水平比較 COPD患者治療后，有108例慢阻肺患者病情出現(xiàn)好轉(zhuǎn)，12例患者病情仍呈現(xiàn)惡化趨勢，同時合并院內(nèi)感染及其他并發(fā)癥。與治療前相比，緩解病例組TNF-α水平顯著降低（P＜0.05），但IL-8變化不大；惡化病例組IL-8、TNF-α水平顯著升高（P＜0.05，見表2）。

表2 治療前后急性病例組血清IL-8、TNF-α水平比較（ng／L）Tab.2 Comparison of IL-8、TNF-αlevels in acute cases group before and after treatment（ng／L）

2.3 病情緩解組與正常對照組血清IL-8、TNF-α水平比較

治療后，病情緩解組雖較治療前TNF-α有明顯下降，但患者血清IL-8、TNF-α水平仍顯著高于正常對照組（P＜0.05，見表2）。

表3 2組患者血清IL-8、TNF-α水平比較（ng／L）Tab.3 Comparison of IL-8，TNF-αlevels between two groups

3 討論

隨著人口的老齡化，空氣污染的日益加劇，我國慢阻肺患者在逐年增加，目前我國40歲以上人群患病率約8.2%，慢阻肺為世界上第四大致死原因，已成為嚴重的公共衛(wèi)生問題。慢阻肺的重要特征之一是病情反復(fù)發(fā)作，且逐漸加重，導(dǎo)致患者肺功能下降及食欲減退、疲乏（外周肌肉萎縮和功能障礙）、體重減輕、精神抑郁和（或）焦慮等全身性癥狀，增加患者痛苦及治療難度。因此，有效預(yù)防慢阻肺的急性加重可以減緩疾病發(fā)展，改善患者生活質(zhì)量及延長患者的生命。

目前，國內(nèi)外學(xué)者對慢阻肺氣道炎癥研究也越來越深入，研究發(fā)現(xiàn)IL-8水平與COPD疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［2］。研究指出，慢性阻塞性肺疾病主要的病理生理基礎(chǔ)是肺血管、肺實質(zhì)和氣道在疾病過程中發(fā)生炎癥反應(yīng)，從而在肺部不同位置的中性粒細胞、T淋巴細胞和肺泡巨噬細胞數(shù)量增加；導(dǎo)致在慢阻肺急性加重期因為肺部感染引起的非特異性炎癥和急性炎癥同時存在，致使炎癥細胞激活而釋放多種介質(zhì)如白介素IL-8等［3］。IL-8是一種炎性介質(zhì)，屬于細胞趨化因子家族中的一員，與許多炎性疾病相關(guān)［4］。對于COPD的發(fā)生，IL-8的作用主要是通過中性粒細胞的激活、趨化而實現(xiàn)，它成為體內(nèi)最主要的內(nèi)源性趨化因子。還有，IL-8可升高細胞內(nèi)Ca2＋濃度，從而上調(diào)黏附蛋白，釋放溶酶體酶，形成生物活性脂質(zhì)，促進其脫顆粒［5］。IL-8能促進中性粒相關(guān)的炎癥發(fā)生，使大量T淋巴細胞和中性粒細胞在患者的呼吸氣道黏膜中浸潤、增殖、聚集［6］。最近研究表明，IL-8水平在COPD患者血、痰中呈現(xiàn)上升趨勢，且與在其中的中性粒細胞數(shù)目的具有正相關(guān)性，主要COPD炎癥反應(yīng)中起作用的細胞就是中性粒細胞［7］。TNF-α是一種多功能的細胞因子，能夠激活炎性巨噬細胞和中性粒細胞使其細胞毒性增加，可以釋放更多的其他相關(guān)細胞因子，如IL-6、IL-8等。另外，COPD患者呼吸道的TNF-α水平升高，可誘導(dǎo)中性粒細胞釋放IL-8致使血清IL-8水平升高，表明TNF-α水平和IL-8水平有直接聯(lián)系。TNF-α導(dǎo)致中性粒細胞脫顆粒，而中性粒細胞增強細胞內(nèi)外蛋白分解作用，而肺氣腫形成原因之一是蛋白分解作用的增強。因此TNF-α與COPD病情發(fā)展密切相關(guān)。Shaw等［8］的研究認為在慢阻肺患者白介素-6（IL-6），白介素-8（IL-8）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等生物標志物的增加與疾病的急性加重和死亡風(fēng)險增高呈相關(guān)性。因此，Shaw等認為由于受到標本和質(zhì)量控制方法等的影響，慢阻肺患者相關(guān)生物標志物的檢測對判斷預(yù)后更合適。Guo等［9］對140例穩(wěn)定期慢阻肺患者的隨機、對照研究后也認為外周血中白介素-6（IL-6），白介素-8（IL-8），腫瘤壞死因子-a（TNF-a）的水平能反映補肺顆粒在穩(wěn)定期慢阻肺治療中的效果。

本實驗數(shù)據(jù)總結(jié)也同樣發(fā)現(xiàn)，處于急性發(fā)作期的COPD患者組的血清IL-8、TNF-α水平與正常對照組比較明顯升高；說明COPD疾病可以通過IL-8、TNF-α水平變化來初步判斷。患者經(jīng)過積極抗感染和對癥治療后，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后病情緩解組血清IL-8的水平與入院前一樣仍舊處于高水平，但TNF-α水平有明顯下降。表明疾病雖然有所控制，但有持續(xù)存在的細胞炎癥因子。疾病惡化組患者血清中IL-8、TNF-α水平較正常組和緩解組及疾病加重組都顯著升高，這也表明炎癥因子和疾病的惡化有一定關(guān)系，表明IL-8、TNF-α與COPD的氣道炎癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，且貫穿整個COPD病程的各個時期，這與Chiba［10］的觀點相符合。本研究結(jié)果表明血清IL-8、TNF-α可作為COPD急性加重早期診斷和觀察療效及病情變化的重要指標，這與Nussbaumer-ochsner等［11-12］觀點一致。與正常人群相比，血清IL-8、TNF-α水平在病情穩(wěn)定期仍處于較高水平，伴隨病情的惡化，呈現(xiàn)持續(xù)升高，表明IL-8、TNF-α不僅存在于COPD急性加重期，也存在于病情穩(wěn)定期，而病情惡化期則顯著升高，它們的濃度水平和炎癥的輕重成正比，與Fabbri等［13-14］的研究結(jié)果相一致。

目前在治療COPD方面尚無特效的治療方案，僅局限于對控制氣道和炎癥發(fā)生的對癥治療上。如氨溴索能清除反應(yīng)性氧化物，控制支氣管痙攣［15-16］。糖皮質(zhì)激素類藥物也廣泛應(yīng)用，其具有較強的抗炎癥能力，治療效果顯著，能迅速控制病癥，縮短患者住院時間［17］。COPD患者血清中IL-8、TNF-α水平的變化與COPD的病情變化大體一致的?？勺鳛镃OPD患者診斷和療效判斷及疾病遷延惡化的參考指標。通過對炎性介質(zhì)如IL-8、TNF-α在COPD疾病的發(fā)生發(fā)展中的研究，對研究COPD病理生理的改變有重要意義。

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（編校：吳茜）

Role of serum IL-8，TNF-αin chronic obstructive pulmonary disease

GUWen-chao，YUAN Ya-ping

（Department of Respiration，People's Hospital of Shanghai Pudong District，Shanghai201299，China）

ObjectiveTo study the role of interleukin-8 and TNF-αin patients with chronic obstructive pulmonary disease（COPD）in different periods，and to investigate its correlation with COPD.Methods120 patients from January 2013 to December 2013 in Department of Respiration，People's Hospital of Shanghai Pudong District diagnosed with acute exacerbation of COPD were selected as acute case group.They were divided into remission group and acute exacerbation group after treatment.120 healthy people were selected as normal control group in the same period.The levels of IL-8 and TNF-αweremeasured and compared.ResultsBefore treatment，the serum levels of IL-8 and TNF-αin patients with acute exacerbation of COPD were significantly higher than thosemeasured in normal control group（P＜0.05）.After treatment，102 cases had an improvement in disease，and TNF-αlevels in patients significantly decreased compared with before treatment（P＜0.05），but IL-8 levels had no significant changes.Levels of IL-8 and TNF-αin remission group were higher than those in normal control group（P＜0.05）；18 cases gotworse，and the IL-8，TNF-αlevels in acute exacerbation group were significantly higher than those in remission group and acute case group（P＜0.05）.ConclusionSerum IL-8，TNF-αlevel plays an important role in the occurrence and development of airway inflammation in chronic obstructive pulmonary disease（COPD），and could be indicators in the diagnosis of COPD.

chronic obstructive pulmonary disease；interleukin-8；tumor necrosis factor-alpha

R563.9

A

1005－1678（2014）09－0093－03

上海市浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)領(lǐng)先人才培養(yǎng)計劃（PWRI2014-04）；上海市浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)重點學(xué)科建設(shè)資助（PWZx2014-12）

顧文超，女，碩士，主任醫(yī)師，研究方向：呼吸系統(tǒng)中的氣道疾病，E-mail：shglsarah＠126.com。