李 賀，羅亞平

(中國(guó)人民公安大學(xué)，北京 100038)

潛血鞋印一般是暴力、兇殺等惡性犯罪案件現(xiàn)場(chǎng)的常見(jiàn)物證之一，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)的潛血鞋印進(jìn)行顯現(xiàn)，不僅有助于分析犯罪嫌疑人的個(gè)人信息(如身高、年齡、體態(tài)等)、作案人數(shù)，而且有助于分析案情、判斷案件性質(zhì)、為偵查破案提供科學(xué)的依據(jù)①羅亞平，郭威，史海清.痕跡檢驗(yàn)教程.北京:中國(guó)人民公安大學(xué)出版社，2004.72.。

目前，對(duì)于滲透性客體上的血跡顯現(xiàn)一般采用氨基黑10B、四甲基聯(lián)苯胺 (TMB)等，但是由于顯現(xiàn)出的血跡都呈深色，所以遇到深色客體時(shí)就無(wú)法通過(guò)上述方法顯現(xiàn)出反差明顯的印跡。

Acid Yellow7(酸性黃)作為一種蛋白質(zhì)染色劑能夠與血液中的蛋白質(zhì)發(fā)生靈敏反應(yīng)，其生成的熒光物質(zhì)在多波段光源激發(fā)下呈亮黃色。2005年，英國(guó)內(nèi)政部首次將Acid Yellow7引進(jìn)刑事科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，應(yīng)用于非滲透性客體上潛血手印的顯現(xiàn)。2011年，Lydia C.A.M.Bossers等人對(duì)Acid Violet17、氨基黑10B、匈牙利紅、二氧化鈦等幾種顯現(xiàn)潛血手印的方法進(jìn)行了對(duì)比實(shí)驗(yàn)。②水晶晶，羅亞平，王明超.酸性黃顯現(xiàn)非滲透性客體上血潛手印初步探究.刑事技術(shù).2012(5):35-37.但是筆者通過(guò)查閱文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)針對(duì)于Acid Yellow7的應(yīng)用基本上只限于非滲透性客體，如果能夠利用酸性黃顯現(xiàn)深色滲透性客體上潛血印跡，那么就可以彌補(bǔ)氨基黑10B、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)等方法的不足，解決犯罪現(xiàn)場(chǎng)遺留的大量深色客體上血足跡、潛血作案工具印痕、車輛輪胎印痕的顯現(xiàn)問(wèn)題，從而能夠?yàn)楸┝?、兇殺、交通肇事逃逸等案件的偵查提供有價(jià)值的技術(shù)支持。

一、材料與方法

(二)材料

標(biāo)記特征的膠底鞋、小刀、剪刀、鑷子、脫脂棉、新鮮血液 (人血)、燒杯、

量筒、玻璃皿、玻璃棒、電子天平、濾紙、警用多波段光源、單反相機(jī)、翻拍架、橙色濾光片、比例尺、不同質(zhì)地的織物、Acid Yellow7(如圖1)、5-磺基水楊酸、乙醇、乙酸、蒸餾水。

圖1 本實(shí)驗(yàn)所使用的Acid Yellow7

(二)試劑配制

Acid Yellow7試劑包括固定液、染色液和漂洗液，其配置方法如下:

1.配置固定液

步驟一:稱取40g 5-磺基水楊酸，放置于干凈、干燥的容量為2.5L的玻璃燒杯中;

步驟二:量取2L蒸餾水加入到步驟一的燒杯當(dāng)中，并用磁力攪拌器進(jìn)行攪拌至充分溶解，這樣就制成了固定液。

2.配置染色液

步驟一:稱取1g Acid Yellow7，放置于干凈、干燥的容量為2.5L的大玻璃燒杯中:

步驟二:量取50ml乙酸加入步驟一的燒杯之中;

步驟三:再量取250ml無(wú)水乙醇加入燒杯;

步驟四:最后，量取700ml蒸餾水加入燒杯之中并用磁力攪拌器攪拌至完全溶解，這樣就制成了染色液。

3.配置漂洗液

步驟一:量取100ml乙酸倒入干凈的容量為2.5L的玻璃燒杯之中;

步驟二:再量取500ml無(wú)水乙醇加入到乙酸之中;

步驟三:最后量取1400ml蒸餾水加入燒杯之中并用玻璃棒攪拌均勻，這樣就制成了漂洗液。

(三)樣本制作

1.選取生活中常見(jiàn)的衣物布料三種 (藍(lán)色棉布、黑色毛料、黑色棉布)，用剪刀裁剪成長(zhǎng)15cm、寬14cm的布?jí)K，每種布料各30塊，分為A、B兩組，每組中每種布料各15塊。

2.用小刀在選取的膠底鞋鞋底做出8個(gè)缺損痕跡特征 (如圖2)。

3.本實(shí)驗(yàn)選用的血液為六個(gè)月內(nèi)采集的保存于4℃—6℃環(huán)境中的人血。首先將血液從冰箱冷藏環(huán)境中取出，在室溫條件下放置10min左右，待其溫度與室溫相同后搖勻倒入燒杯。用鑷子夾取脫脂棉，蘸取純血均勻地涂抹在鞋底前半掌，并以行走姿勢(shì)在A組的每塊布料上制作潛血鞋印;為檢驗(yàn)Acid Yellow7與血液反應(yīng)生成熒光物質(zhì)的靈敏性，再以1:5的比例將純血與蒸餾水進(jìn)行混合，以相同的方法在B組的每塊布料上制作潛血鞋印。

圖2 標(biāo)有缺損特征的膠底鞋鞋底細(xì)節(jié)特征

4.將制作完成的樣本至于陰涼、干燥處晾干。

(四)方 法

Acid Yellow7試劑顯現(xiàn)潛血鞋印按照固定、染色、漂洗的步驟進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)中為了避免溶液濃度變化對(duì)結(jié)果產(chǎn)生的影響，將固定液、染色液、漂洗液等分為兩份，對(duì)A、B兩組分別處理。

1.固定:取玻璃皿，將已經(jīng)配置好的固定液的一半 (1L)倒入其中，用鑷子夾取A組布?jí)K浸泡在固定液中5min，然后取出在室溫條件下充分晾干。以同樣的方法，用配置的另一半固定液對(duì)B組的布?jí)K進(jìn)行固定處理并在室溫條件下充分晾干。

2.染色:取玻璃皿，將已經(jīng)配置好的染色液的一半 (500ml)倒入其中，用鑷子將已經(jīng)固定處理過(guò)的A組布?jí)K進(jìn)行浸泡5min，然后取出在室溫條件下充分晾干。以同樣的方法，用配置好的另一半染色液對(duì)B組的布?jí)K進(jìn)行染色處理并在室溫條件下充分晾干。

3.漂洗:取玻璃皿，將已經(jīng)配置好的漂洗液的一半 (1L)倒入其中，用鑷子將已經(jīng)染色處理過(guò)的A組布?jí)K在染色液中漂洗5min，然后取出在室溫條件下充分晾干以備觀察。以同樣的方法，用配置好的另一半漂洗液對(duì)B組的布?jí)K進(jìn)行漂洗處理并在室溫條件下充分晾干以備觀察。

注意事項(xiàng):因?yàn)椴級(jí)K較多，在固定、染色、漂洗過(guò)程當(dāng)中可以適當(dāng)搖晃玻璃皿使試劑與樣本進(jìn)行充分接觸。

4.觀察:將已經(jīng)漂洗處理的A、B兩組布?jí)K樣本放置于自然光下進(jìn)行觀察，并用翻拍架配合單反相機(jī)進(jìn)行拍照固定;其后，將A、B兩組布?jí)K樣本置于多波段光源下，以440nm光源通過(guò)橙色護(hù)目鏡進(jìn)行觀察，并用翻拍架配合單反相機(jī)通過(guò)橙色濾光片在光圈為F5.6，曝光時(shí)間為6s的設(shè)置下 (可能會(huì)隨著多波段光源的強(qiáng)度不同有所變化)進(jìn)行拍照固定。但是在拍照過(guò)程中，筆者發(fā)現(xiàn)由于潛血鞋印的面積較大，而多波段光源要覆蓋整個(gè)潛血鞋印會(huì)導(dǎo)致單位面積上的光強(qiáng)度不足，要想使?jié)撗≡诠庠吹募ぐl(fā)下產(chǎn)生最利于觀察的熒光特征，可以借助于四周有遮光材料的移動(dòng)式指紋熒光成像儀 (如下圖3)。

5.評(píng)判標(biāo)準(zhǔn):將顯現(xiàn)出的潛血鞋印按照其反映的缺損特征數(shù)量分為三個(gè)等級(jí)，每個(gè)等級(jí)對(duì)應(yīng)的細(xì)節(jié)特征見(jiàn)表1。

表1 潛血鞋印等級(jí)及細(xì)節(jié)特征對(duì)照表

(五)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 A、B兩組的三種布料上顯現(xiàn)出的潛血鞋印特征等級(jí)數(shù)量分布

表2中數(shù)據(jù)分析討論如下:

1.A組中，Acid Yellow7處理黑色毛料、藍(lán)色棉布、黑色棉布上的純血潛血鞋印后，在自然光下有較弱的鞋印輪廓，不易觀察，但是在440nm的光源激發(fā)下通過(guò)橙色護(hù)目鏡觀察有較明顯的熒光特征。其中，可能由于黑色毛料表面較粗糙，潛血鞋印細(xì)節(jié)特征反映效果較藍(lán)色棉布、黑色棉布上潛血鞋印稍差。(如圖4藍(lán)色棉布上的純血潛血鞋印效果)

圖3 移動(dòng)式移動(dòng)式指紋熒光成像儀

圖4 藍(lán)色棉布上的純血潛血鞋印

2.通過(guò)觀察，筆者發(fā)現(xiàn)雖然血液經(jīng)過(guò)稀釋，但是經(jīng)過(guò)Acid Yellow7處理后大多數(shù)潛血鞋印在440nm光源下通過(guò)橙色護(hù)目鏡仍能顯現(xiàn)出清晰的熒光特征;通過(guò)對(duì)比，也不難看出稀釋血潛血鞋印的細(xì)節(jié)特征表現(xiàn)稍差于純血潛血鞋印的細(xì)節(jié)特征表現(xiàn)，稀釋血潛血鞋印的熒光強(qiáng)度也要稍弱于純血潛血鞋印的熒光強(qiáng)度。

二、討 論

圖5 Acid Yellow7的結(jié)構(gòu)式

Acid Yellow7，又名酸性黃，分子式為C19H13N2NaO5S，分子量:404.37，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)下圖8。其結(jié)構(gòu)中含有磺酸基，遇水磺酸鈉水解生成磺酸，因而酸性黃具有酸性物質(zhì)的各種反應(yīng)性質(zhì);另外其結(jié)構(gòu)中還含有一個(gè)氨基，因而其又能與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，作為一種蛋白質(zhì)染色劑，在生物上常用于蛋白質(zhì)的定性和定量測(cè)試。從以上實(shí)驗(yàn)可以看到，Acid Yellow7可以用來(lái)顯現(xiàn)一些深色滲透性客體上的潛血鞋印，與血液中的蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，并在440nm光源激發(fā)下通過(guò)橙色護(hù)目鏡進(jìn)行觀察。但是，本文只是Acid Yellow7在顯現(xiàn)深色滲透性客體上潛血鞋印的初步研究，比如在樣本選取上，還可以進(jìn)一步擴(kuò)大樣本種類范圍;在試劑配方、操作步驟上還是采用國(guó)外顯現(xiàn)非滲透性客體上潛血痕跡的方法，是否存在更利于顯現(xiàn)深色滲透性客體上潛血鞋印的配方及操作方法;在實(shí)驗(yàn)條件上，還可以變換各項(xiàng)條件 (如實(shí)驗(yàn)溫度、血液濃度、樣本水中浸泡時(shí)間等)來(lái)對(duì)Acid Yellow7顯現(xiàn)深色滲透性客體上的潛血鞋印進(jìn)行深層研究?？傊珹cid Yellow7作為一種靈敏的蛋白質(zhì)染色劑，在與蛋白質(zhì)反應(yīng)后在440nm光源激發(fā)下通過(guò)橙色護(hù)目鏡觀察能夠觀察到明顯的熒光特征，排除了深色以及復(fù)雜客體背景的干擾，彌補(bǔ)了現(xiàn)有的一些顯現(xiàn)潛血足跡方法的不足，我們要充分總結(jié)并利用它的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，發(fā)揮它在偵查工作當(dāng)中的作用。