湖南省湘潭市中心醫(yī)院，湖南 湘潭 411100

正交試驗法優(yōu)選復方麻芥透皮貼的提取工藝

王艷平

湖南省湘潭市中心醫(yī)院，湖南 湘潭 411100

目的優(yōu)選復方麻芥透皮貼的最佳提取工藝。方法采用正交試驗，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的浸出量及浸膏得率為考察指標，用Lq(34)正交表安排實驗，優(yōu)化提取條件。結果最佳提取工藝為藥材用70%乙醇回流提取3次，溶媒加量分別為8、6、6倍，提取時間分別為2、1.5、1.5h。結論優(yōu)化得到的工藝簡單易行、穩(wěn)定性好。

復方麻芥透皮貼；提取工藝；鹽酸麻黃堿；鹽酸偽麻黃堿；正交實驗

復方麻芥透皮貼由麻黃、白芥子、延胡索等組成，具有溫肺祛痰、平喘止咳之功效，臨床用于冷哮緩解期有顯著療效[1]。為優(yōu)選其提取工藝條件，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿浸出量、浸膏得率為指標，采用正交法優(yōu)選復方麻芥透皮貼的提取工藝條件，為確定該制劑的提取工藝提供實驗依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器 DioNEXP680系列高效液相色譜儀(600輸液泵、M32工作站)；AT-330紫外檢測器；DK-S22型電熱恒溫水浴鍋；766-3型遠紅外輻射干燥箱(上海陽光實驗儀器有限公司)。

1.2 材料 鹽酸麻黃堿(批號：171241-20030)、鹽酸偽麻黃堿(批號：171237-200807)均由中國生物制品檢定所提供；其余藥材均由湖南天泰和康醫(yī)藥有限公司提供，符合中國藥典2010年版一部要求。供試品溶液制備均使用分析純試劑；高效液相色譜使用色譜純試劑。

2 方法與結果

2.1 正交試驗設計 預試驗表明提取次數以3次為佳，在此基礎上采用正交試驗對提取工藝條件做進一步優(yōu)化。選擇乙醇濃度、乙醇用量、提取時間作為考察因素，以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿浸出量為評價指標，用L9(34)正交表安排試驗，因素水平與正交試驗設計見表1、表2。

2.2 提取實驗 依處方比例稱取麻黃、白芥子、延胡索等藥材，共9份，按正交試驗設計表的安排(見表2)，分別加乙醇回流提取三次，過濾，收集濾液，各份分別用相對應濃度的乙醇定容至500ml，備用。

2.3 鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量測定[2]

2.3.1 色譜條件 色譜柱：CenturySIL C18 -BDS；流動相：乙腈-0.1%磷酸(4∶96)；流速：1.0ml/min；檢測波長：210nm；柱溫：室溫。

表1 正交試驗因素水平表

2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸麻黃堿10.4mg、鹽酸偽麻黃堿10.2mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻。精密量取4ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含鹽酸麻黃堿41.6μg)。

2.3.3 供試品溶液的制備與測定[3]精密量取提取液20ml，50-60℃水浴揮干，殘渣用甲醇溶解，定容至25ml，過濾，精密量取續(xù)濾液2ml，置中性氧化鋁柱(100-200目，2g，內徑1cm)上，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液約9ml，置10ml容量瓶中，加磷酸1滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔薄膜濾過，取續(xù)濾液備用。

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，測定鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量，并根據藥材投料量計算鹽酸鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的浸出量，結果見表2。

2.4 浸膏得率測定 精密量取上述提取液25ml，置于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱重，計算浸膏得率，結果見表2。

表2 正交試驗設計表及結果

注：*綜合評分：鹽酸麻黃堿浸出量/最大鹽酸麻黃堿浸出量×0.4×100+鹽酸偽麻黃堿浸出量/最大鹽酸偽麻黃堿浸出量×0.4×100+浸膏得率/最大浸膏得率×0.2 ×100。

2.5 數據分析 從表2可知，最佳提取工藝條件為A1B3C3，以綜合評分為標準，各因素的主次順序為A、C、B。表3方差分析結果表明：因素A、C對試驗結果有顯著性影響(P<0.05)，因素B的影響無顯著性意義(P>0.05)。考慮到乙醇用量對實驗結果無顯著性影響，但加醇量為6、4、4倍時又不能將藥材完全掩蓋，綜合經濟效益考慮，因此選擇A1B2C3 為最佳提取工藝條件。

2.6 驗證實驗 由于所選方案A1B2C3是正交表中沒有的方案，故尚需做實驗予以驗證，以保證提取工藝的重現(xiàn)性和可行性。按處方比例取麻黃、白芥子等藥材，3份，按方案A1B2C3要求的工藝條件及上述的實驗方法制備三批樣品，并測定鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿浸出量及浸膏得率，結果見表4，結論：該工藝穩(wěn)定可行，重現(xiàn)性好。

表3 方差分析表

F0.05(2,2)=19.00,F>0.01(2,2)=99.00

表4 正交驗證

3 討論

復方麻芥透皮貼為我院傳統(tǒng)制劑，原為敷貼散劑，其制備工藝是將藥材粉碎直接配制，我們將麻黃等藥材的有效部位進行提取，結合新型透皮貼膏技術和新型基質材料研制成貼劑。采用2010部中國藥典中色譜條件[4]測定麻黃中鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的含量分離效果不佳，經多次預實驗，最終選擇文獻[2]中的色譜條件，調整流動相比例為乙腈-0.1%磷酸(4:96)時分離效果最好。

本試驗通過正交實驗法優(yōu)選了復方麻芥透皮貼的最佳提取工藝件，即麻黃等藥材用70%乙醇提取3次，乙醇用量分別為8、6、6倍，提取時間分別為2、1.5、1.5h。在最佳實驗的基礎上，按最佳工藝進行了驗證實驗，結果證明，該提取工藝穩(wěn)定性好，科學可行，為以后該制劑的制備工藝提供依據。

[1]彭農建,譚燦燦.麻芥透皮貼劑三伏治療支氣管哮喘202例觀察[J].吉林醫(yī)學，2011，32(36)：7722.

[2]丘明明.HPLC測定骨通貼膏中鹽酸麻黃堿的含量及含量均勻度[J].中國藥師，2010，13(5)：695-696.

[3]喬明,韓建偉,李華.咳喘貼提取工藝研究[J].中國實驗方劑學雜志，2007，13(8)：8-9.

[4]國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：300-301.

OpyimizationofExtractionProcessofFufangMajiePlasterswithOrthogonalDesignMethod

WANG Yan-ping

Xiangtan Central Hospital,Xiangtan 411100,China

ObjectiveTo optimize the extraction process Fufang Majie Plasters.MethodsUsing the orthogonal test,the leaching amount and extract Ephedrine Hydroehloride and Pseudoephedrine Hydroehloride rate as the study index,L9(34)orthogonal experiment,optimum extraction conditions.ResultsThe optimum extraction process using 70% ethanol reflux extraction 3 times,solvent amount is respectively 8,6,6 times,extracting time were 2,1.5,1.5h.ConclusionThe optimum extracting process is simple，stable and eficient.

Fufang Majie Plasters;Extraction process;Ephedrine Hhydroehloride;Pseudoephedrine Hydrochloride;Orthogonal design method

王艷平(1983-)，女，主管藥師，主要從事中藥制劑工藝與質量控制的研究。E-mail:wangyanping2001@163.com

R284.2

A

1007-8517(2014)20-0022-02

2014.07.11)