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        自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞介入移植治療腦梗死臨床研究

        2014-09-10 09:21:36張志彬賈芙蓉中國人民解放軍第二零八醫(yī)院神經(jīng)介入科吉林長春130062
        吉林醫(yī)學(xué) 2014年2期
        關(guān)鍵詞:充質(zhì)自體骨髓

        王 旭,張志彬,賈芙蓉,楊 宏 (中國人民解放軍第二零八醫(yī)院神經(jīng)介入科,吉林 長春 130062)

        腦梗死是神經(jīng)系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病,為腦血液供應(yīng)障礙引起缺血、缺氧,導(dǎo)致局限性腦組織缺血性壞死和腦軟化。通過超早期溶栓和腦神經(jīng)保護(hù)等措施使部分患者的神經(jīng)功能得到良好的恢復(fù),但多數(shù)患者不能在有效時間窗內(nèi)到達(dá)醫(yī)院,有一大部分(50% ~70%)患者遺留癱瘓、失語等嚴(yán)重后遺癥。大量動物實驗證實各種干細(xì)胞治療腦梗死模型后其行為神經(jīng)功能均有所改善,這使臨床應(yīng)用干細(xì)胞治療腦梗死成為可能。有臨床報道自體BMSCs移植后患者癥狀有效緩解,功能明顯改善,預(yù)后觀察良好,且無嚴(yán)重并發(fā)癥出現(xiàn)[1]?,F(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料:選擇2009年1月~2010年6月解放軍二零八醫(yī)院收治的腦梗死患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①根據(jù)臨床表現(xiàn)和頭部CT、MRI確診,均符合1995年全國第四屆腦血管病會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2];②首次發(fā)病,發(fā)病時間在1~2個月之間,病情穩(wěn)定的患者;③患者知情同意,排除合并癲癇腫瘤等病例。

        全部120例患者,男74例,女46例;年齡36~73歲;平均56.3歲;隨機分為干細(xì)胞移植組和對照組,每組60例。兩組患者的年齡、性別構(gòu)成比例、發(fā)病部位、病情輕重等差異均無顯著性意義(P>0.05),具有可比性。末次發(fā)病至接受BMSCs時間為大于1個月,平均35.6天。所有患者采用介入技術(shù)一次性移植BMSCs。

        1.2 方法:對照組患者給予拜阿司匹靈100 mg,1片/d;阿托伐他汀 20 mg,1 片/d,普羅布考片片 0.75 mg,2 次/d,連用1個月。

        移植組需家屬或患者簽署干細(xì)胞治療知情同意書及介入移植術(shù)同意術(shù),同時需經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。在常規(guī)藥物治療基礎(chǔ)上,給予重組人粒細(xì)胞集落刺激因子150 μg,1次/d,皮下注射,連用3~5 d,待血常規(guī)白細(xì)胞升至30×109/L左右后可抽取自體骨髓。醫(yī)生在嚴(yán)格無菌狀態(tài)下采用局部麻醉通過骨穿抽取自體骨髓200 ml(枸櫞酸鈉抗凝)。在超凈工作臺內(nèi)將自體骨髓加入至干細(xì)胞提取專用試劑盒中,應(yīng)用寧夏中聯(lián)達(dá)生物有限公司的骨髓、臍帶血處理試劑盒,經(jīng)過去除紅細(xì)胞、離心、提取、清洗等步驟,獲得細(xì)胞懸液。然后采用流式細(xì)胞儀監(jiān)測法,并進(jìn)行計數(shù)。原則上在一定范圍內(nèi)一次干細(xì)胞的數(shù)量越多效果越好。但由于來源受限,本組患者一般每次細(xì)胞數(shù)在(1~2)×108個左右。

        1.3 功能測評:采用國際通用的功能獨立行評測(FIM)評分方法,于患者治療前、治療后1個月、6個月進(jìn)行評定。主要評價6個方面的能力:生活自理能力、活動能力、行動能力、理解交流能力、括約肌控制能力、社會認(rèn)識能力,分值越高表示功能獨立性好。最高分126分(運動功能評分91分,認(rèn)知功能評分35分),最低分18分。主要觀察指標(biāo):腦梗死患者干細(xì)胞治療前、后功能獨立性評定量表評分。

        2 結(jié)果

        2.1 參與者數(shù)量分析:納入患者120例,全部進(jìn)入結(jié)果分析。

        2.2 腦梗死患者干細(xì)胞治療前、治療后功能獨立性評分:移植組60例治療前FIM評分為(25.3±6.6),治療后1個月評分為(72.3±7.2)(P<0.01),6個月評分為(94.8±7.4)(P<0.01),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。對照組治療前評分為(24.9±7.2),治療后1個月(37.3±5.3)(P<0.05),治療后6個月(70.4±3.1)分(P<0.01)。與對照組相比,移植組治療后1個月、6個月差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

        2.3 不良反應(yīng):本組未出現(xiàn)發(fā)熱、栓塞等不良反應(yīng)。

        表1 各組患者治療前后功能獨立性評定量表評分的比較(±s)

        表1 各組患者治療前后功能獨立性評定量表評分的比較(±s)

        注:與治療前相比,①P<0.05,②P<0.01;與對照組相比,③P<0.05,④P <0.01

        組別 治療前 治療后1個月 治療后6個月對照組 24.9±7.2 37.3±5.3① 70.4±3.1②移植組 25.3±6.6 72.3±7.2③④ 94.8±7.4③④

        3 討論

        本組采用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞介入移植方法治療腦梗死的臨床療效和不良反應(yīng)進(jìn)行觀察,結(jié)果:移植組60例在治療前FIM評分為(25.3±6.6),治療后1個月評分為(72.3±7.2)(P<0.01),6個月評分為(94.8±7.4)(P<0.01),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。對照組治療前評分為(24.9±7.2),治療后1個月(37.3±5.3)(P<0.05),治療后6個月70.4±3.1分(P<0.01)。與對照組相比,移植組治療后1個月、6個月差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。術(shù)后無不良反應(yīng)發(fā)生。結(jié)果表明:自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞介入移植腦梗死是安全有效的。

        自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療腦梗死的機制可能如下:①細(xì)胞替代學(xué)說:干細(xì)胞可直接分化為受損的神經(jīng)組織進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)重建[3-4];②神經(jīng)保護(hù)學(xué)說:干細(xì)胞和受損的腦組織相互作用,分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子以對抗細(xì)胞凋亡、增強神經(jīng)萌芽、突觸發(fā)生、神經(jīng)傳遞、促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放[5-7];③血管發(fā)生學(xué)說:募集血循環(huán)中的內(nèi)皮祖細(xì)胞歸巢和促進(jìn)新生血管形成,血管發(fā)生和生成與提高神經(jīng)恢復(fù)密切相關(guān)[8]。

        目前,可選擇的BMSCS移植途徑有許多種,主要右靜脈、動脈、腦實質(zhì)內(nèi)等,靜脈移植途徑方便,對患者無明顯損傷,但易出現(xiàn)靜脈栓塞或肺栓塞可能。腦實質(zhì)內(nèi)移植一般通過立體定向方法,在頭CT下定位后,頭皮下鉆孔將干細(xì)胞送至腦組織局部,病灶區(qū)干細(xì)胞濃度高,易收到好的療效,但操作有侵入性,不易被接受。動脈移植或介入移植,是在股動脈穿刺、動脈導(dǎo)管在DSA數(shù)字剪影下將導(dǎo)管超選入病灶局部,將干細(xì)胞送至病灶局部。此方法對患者無損傷,干細(xì)胞不通過靜脈途徑,直接在病灶周圍發(fā)揮作用,能使有限的干細(xì)胞發(fā)揮最大的療效,且?guī)缀鯚o栓塞的危險,療效肯定。本研究60例移植患者均取得較好療效。

        自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞取自自體骨髓,無免疫反應(yīng)及倫理道德等問題,只要在骨髓穿刺及干細(xì)胞提取時注意無菌操作,可將感染降到最低,本組患者無一例感染。

        自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療腦梗死安全可靠,但何時移植療效最好,目前尚無定論,仍需大樣本臨床比較。

        [1] 孟憲國,朱士文,高華,等.自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療腦梗死6個月隨訪[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2009,13(32):6374.

        [2] 中華神經(jīng)科學(xué)會.各類腦血管疾病診斷要點[J].中華神經(jīng)科雜志,1996,29(6):379.

        [3] Skvortsova VI,Gubskiy LV,Tairova RT,et al.Use of bone marrow mesenchymal(stromal)stem cells in experimental ische-mic stroke in rats[J].Bull Exp Biol Med,2008,145(1):122.

        [4] Shen LH,Li Y,Chen J,et al.Therapeutic benefit of bone marrow stromal cells administered 1 month after stroke[J].J Cereb Blood Flow Metab,2007,27(1):6.

        [5] Deng YB,Ye WB,Hu ZZ,et al.Intravenously administered BMSCs reduce neuronal apoptosis and promote neuronal proliferation through the release of VEGFafter stroke in rats[J].Neurol Res,2010,32(2):148.

        [6] Qu R,Li Y,Gao Q,et al.Neurotrophic and growth factor gene expression profiling of mouse bone marrow stromal cells induced by ischemic brain extracts.Neuropathology,2007,27(4):355.

        [7] Lindholm D.Neurotrophic factors and neuronal plasticity:Is there a link[J].Adv Neurol,73:1.

        [8] Krupinski J,Stroemer P,Slevin M,et al.Three dimensional structure and survival of newly formed blood vessels after focal cerebral ischemia[J].Neuroreport,2003,14(8):1171.

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