葉章發(fā) 張超

肝素化血漿標(biāo)本對(duì)偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果的影響分析

葉章發(fā) 張超

目的 觀察分析肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定時(shí), 對(duì)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果有無(wú)影響。方法 采集血液標(biāo)本, 分別使用肝素化血漿和血清標(biāo)本, 進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定, 兩組檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 肝素化血漿血鈣測(cè)定結(jié)果：2.71 mmol/L, 血清血鈣測(cè)定結(jié)果：2.31 mmol/L。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 肝素化血漿標(biāo)本對(duì)偶氮胂Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果具有嚴(yán)重影響, 不宜使用肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定。

肝素化血漿；偶氮砷Ⅲ法；血鈣測(cè)定

在臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理中, 分析前質(zhì)量保證有重要意義,不同標(biāo)本處理方式, 可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。作者觀察分析肝素化血漿和血清標(biāo)本, 使用偶氮砷Ⅲ法測(cè)定血鈣的結(jié)果, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 門診、住院患者隨機(jī)血液標(biāo)本105例(剔除嚴(yán)重脂血、溶血及黃疸標(biāo)本), 年齡1.0~78.0歲, 其中男50例, 女55例。

1.2 儀器 OLYMPUS AU-2700全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 試劑及相關(guān)用品 江蘇康健醫(yī)療用品有限公司提供一次性真空采血管(肝素管、普通管), 其中肝素管(肝素鈉)每支抗凝血液5.00 ml。

RANDOX (Human-Sera分析用人血清基質(zhì))定值凍干質(zhì)量控制血清。

偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定試劑盒(國(guó)內(nèi)某品牌),試劑主要成分：偶氮砷Ⅲ(ARSENAZO Ⅲ):0.20 mmol/L; 咪唑： 75 mmol/L。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 采集患者清晨空腹靜脈血液, 分別注入一次性真空采血管肝素管(5.00 ml)和普通管(3.00~5.00 ml)中,待普通管血液收縮后, 再一起進(jìn)行標(biāo)本離心處理。于此同時(shí),將5支同一批號(hào)的定值凍干質(zhì)控血清嚴(yán)格按照使用說(shuō)明進(jìn)行充分溶解、混勻后, 每支再分別分配到6支檢測(cè)管中, 共30份,與檢測(cè)標(biāo)本一起上機(jī)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 檢測(cè)數(shù)據(jù)處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析, 使用配對(duì)資料組間差異 t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

見表1。

表1 肝素化血漿及血清標(biāo)本血鈣測(cè)定結(jié)果

肝素化血漿與血清標(biāo)本血鈣測(cè)定結(jié)果, 兩組檢測(cè)數(shù)據(jù)配對(duì)資料組間差異t檢驗(yàn), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；所用定值凍干質(zhì)控血清參考值(ARSENAZO Ⅲ法 ):2.30 mmol/L。

3 討論

血鈣或者血液總鈣測(cè)定, 一般是指使用血液血清標(biāo)本進(jìn)行總鈣含量測(cè)定。關(guān)于血鈣測(cè)定, 雖然已經(jīng)使用過(guò)許多鈣結(jié)合染料, 其中鄰-甲酚酞絡(luò)合酮和偶氮砷Ⅲ(ARSENAZO Ⅲ), 至今一直在廣泛應(yīng)用, 當(dāng)然, 鈣離子與偶氮砷Ⅲ結(jié)合力還受到緩沖液, Ph和鈉濃度的影響［1］。血鈣檢測(cè)作為臨床一般常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目, 目前較多使用偶氮砷Ⅲ比色法, 而且已經(jīng)有文獻(xiàn)證明,該方法是較為理想的方法［2］。按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的具體要求［1］, 應(yīng)該使用血清標(biāo)本進(jìn)行血鈣的測(cè)定。但在實(shí)際工作中, 使用肝素化血漿標(biāo)本進(jìn)行血鈣測(cè)定的情況確實(shí)存在。亦有文獻(xiàn)報(bào)道血清與肝素化血漿標(biāo)本,血鈣測(cè)定結(jié)果差異不具顯著性［3］, 但其未提供具體的實(shí)驗(yàn)方法以及試劑具體配方。在購(gòu)買的試劑盒, 一般都有生產(chǎn)廠家提供的詳細(xì)產(chǎn)品使用說(shuō)明書, 對(duì)標(biāo)本處理有具體的要求。我們選擇國(guó)內(nèi)一家較為知名的試劑生產(chǎn)商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣檢測(cè)試劑盒, 廠家在使用說(shuō)明上明確這樣注明樣本要求：血清、肝素化血漿、尿。血清或肝素化血漿中的鈣, 在2~8℃下可穩(wěn)定10 d。但在實(shí)際工作中, 發(fā)現(xiàn)有一定問(wèn)題, 故進(jìn)行了此次實(shí)驗(yàn)。通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)的觀察、分析?？梢詮囊陨蠈?shí)驗(yàn)結(jié)果看出, 肝素化血漿與血清標(biāo)本,偶氮砷Ⅲ法血鈣測(cè)定結(jié)果差異甚大, 足以影響臨床醫(yī)生對(duì)患者病情的分析以及治療措施的制定。特別是對(duì)于那些低清蛋白血癥、慢性腎功能衰竭、甲狀腺功能減退、維生素D缺乏、電解質(zhì)代謝紊亂等低鈣血癥患者, 可能產(chǎn)生嚴(yán)重后果［4］。而另一家國(guó)內(nèi)試劑生產(chǎn)商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣試劑盒, 試劑主要配方為偶氮砷Ⅲ(ARSENAZO Ⅲ)： 0.10×10-3mol/L,磷酸鹽緩沖液(pH7.0)：50×10-3mol/L。則明確要求使用血清標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定, 此次實(shí)驗(yàn)未使用次家試劑。臨床生化檢測(cè), 一般要求使用血清進(jìn)行, 尤其對(duì)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中要求使用血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目, 改為血漿進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí), 必須進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)證實(shí), 方可使用, 以免影響實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性, 影響臨床的診斷與治療。臨床醫(yī)生亦應(yīng)依據(jù)檢驗(yàn)科采集標(biāo)本的具體要求, 嚴(yán)格督促工作人員采集合格的標(biāo)本, 保障醫(yī)療工作的順利開展。

［1］ 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南京:東南大學(xué)出版社, 2006:383-383.

［2］ 張莉.偶氮砷Ⅲ發(fā)鈣試劑盒不確定度的分析.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2012,11(20):1661-1662.

［3］ 蘇少華.肝素抗凝血漿用于急診生化檢驗(yàn)的研究.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生, 2007,45(6):13-14.

［4］ 周新.涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn).北京:人民衛(wèi)生出版社, 2006:43-44.

464000 信陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院